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原文传递一种UHPLC-MS-MS测定水翁花中熊果酸的方法

专利名称：	一种UHPLC-MS-MS测定水翁花中熊果酸的方法
摘要：	本发明公开了一种UHPLC‑MS‑MS测定水翁花中熊果酸的方法，其包括以下步骤：取水翁花药材粉末，加入甲醇，超声处理，加甲醇补足减失重量，过滤，取续滤液加甲醇定容，即得供试品溶液；取熊果酸对照品，加甲醇溶解并定容，即得对照品溶液；取对照品溶液制成不同浓度的熊果酸标准溶液，注入高效液相色谱‑质谱联用仪中分析，以进样浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，得到标准曲线，将供试品溶液注入高效液相色谱‑质谱联用仪中，测得供试品溶液的峰面积，计算得出熊果酸的含量。本发明采用UHPLC检测方法，操作简单快速，稳定可靠，灵敏度和重复性良好，具有较高的精密度，大大缩短了检测时间，便于对水翁花中熊果酸进行定量检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广东省第二中医院(广东省中医药工程技术研究院)
发明人：	毕晓黎;钟鸣;刘布鸣;陈昭;赖茂祥;胥爱丽;李养学;柴玲;邱宏聪
专利状态：	有效
申请日期：	2019-02-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-07T00:00:00+0800
申请号：	CN201910149384.6
公开号：	CN109856306A
代理机构：	东莞市兴邦知识产权代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	梁首强;冯思婷
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	510095 广东省广州市越秀区恒福路60号
主权项：	1.一种UHPLC-MS-MS测定水翁花中熊果酸的方法，其特征在于，其包括以下步骤：步骤1，供试品溶液的制备：取水翁花药材粉末，加入甲醇，超声处理，加甲醇补足减失重量，过滤，取续滤液加甲醇定容，即得供试品溶液；步骤2，对照品溶液的制备：取熊果酸对照品，加甲醇溶解并定容，即得对照品溶液；步骤3，含量的测定：取对照品溶液制成不同浓度的熊果酸标准溶液，注入高效液相色谱-质谱联用仪中分析，以熊果酸标准溶液的进样浓度为横坐标，以峰面积为纵坐标，得到标准曲线，将供试品溶液注入高效液相色谱-质谱联用仪中，测得供试品溶液的峰面积，计算得出熊果酸的含量。 2.根据权利要求1所述的UHPLC-MS-MS测定水翁花中熊果酸的方法，其特征在于，在步骤3中，高效液相色谱-质谱联用仪的色谱条件：采用Phenomenex-C18柱为色谱柱，色谱柱规格为2.0×50mm、5μm，以乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度洗脱，流速为700μL/min，柱温为25℃，进样量为10μL。 3.根据权利要求2所述的UHPLC-MS-MS测定水翁花中熊果酸的方法，其特征在于，梯度洗脱的条件：0-1min，5-5％A；1.0-1.5min，5-95％A；1.5-2.5min，95-95％A；2.5-3.0min，95-5％A。 4.根据权利要求1所述的UHPLC-MS-MS测定水翁花中熊果酸的方法，其特征在于，在步骤3中，高效液相色谱-质谱联用仪的质谱条件：ESI离子源，采用质谱正、负离子模式，汽化室温度为350℃，鞘气压力为30psi，辅气压力为10psi，离子传输管温度为300℃；水翁花检测采用SIM模式，质荷比为455.5。 5.根据权利要求4所述的UHPLC-MS-MS测定水翁花中熊果酸的方法，其特征在于，正离子模式喷雾电压为3500V，负离子模式喷雾电压为3000V。 6.根据权利要求1所述的UHPLC-MS-MS测定水翁花中熊果酸的方法，其特征在于，在步骤1中，水翁花药材粉末与甲醇的比例为0.5g水翁花药材粉末：25mL甲醇。 7.根据权利要求1所述的UHPLC-MS-MS测定水翁花中熊果酸的方法，其特征在于，在步骤1中，超声处理30min，采用0.22μm微孔滤膜过滤。 8.根据权利要求1所述的UHPLC-MS-MS测定水翁花中熊果酸的方法，其特征在于，在步骤3中，取适量对照品溶液，分别加甲醇稀释并定容，制得浓度分别为10、50、100、200、500、1000ng/mL的熊果酸标准溶液。 9.根据权利要求1所述的UHPLC-MS-MS测定水翁花中熊果酸的方法，其特征在于，在步骤2中，制得的对照品溶液的浓度为115.5μg/mL。 10.根据权利要求9所述的UHPLC-MS-MS测定水翁花中熊果酸的方法，其特征在于，标准曲线为y＝1115.4x+4815.8，r2＝0.9996，进样浓度x的取值范围为10-1000ng/mL。
所属类别：	发明专利