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原文传递一种小花清风藤的HPLC指纹图谱建立方法

专利名称：	一种小花清风藤的HPLC指纹图谱建立方法
摘要：	本发明公开了一种小花清风藤的HPLC指纹图谱建立方法。该方法具有简便、稳定、精密度高、重现性好等优点；用该方法还能较为全面地反映小花清风藤中所含化学成分的种类与数量，进而对其质量进行整体描述和评价。且用该方法检测到的小花清风藤指纹图谱化学成分相对较多、各特征峰高度比例适中，基线较平稳，分离度和峰形好，柱效高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	贵州;52
申请人：	贵阳中医学院
发明人：	徐文芬;孙庆文;潘国吉;王波;陈胤睿
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-17T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-14T00:00:00+0800
申请号：	CN201910044474.9
公开号：	CN109884222A
代理机构：	北京联创佳为专利事务所(普通合伙)
代理人：	张梅;赵恒英
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	550025 贵州省贵阳市花溪区大学城栋青南路
主权项：	1.一种小花清风藤的HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：包括以下步骤： (1)混合对照品溶液的制备：分别精密称取槲皮素-3-O-龙胆双糖苷、Camellianoside、Tsubakioside A、山奈酚-3-O-芸香糖苷、异鼠李素-3-O-芸香糖苷对照品，加70％乙醇溶液溶解，摇匀，制成槲皮素-3-O-龙胆双糖苷质量浓度为0.0625mg/mL、Camellianoside质量浓度为0.250mg/mL、Tsubakioside A质量浓度为0.0675mg/mL、山奈酚-3-O-芸香糖苷质量浓度为0.0625mg/mL、异鼠李素-3-O-芸香糖苷质量浓度为0.0500mg/mL的混合对照品溶液； (2)供试品溶液的制备：精密称定小花清风藤粉末，精密加70％乙醇溶液溶解，称定重量，超声提取，放冷，用70％乙醇溶液补重，摇匀，过滤，滤液用0.45μm有机微孔滤膜过滤，即得； (3)指纹图谱建立的色谱条件：色谱柱：ThermoAccucore-C18，150×4.6mm，2.6μm；流动相：30％四氢呋喃甲醇溶液为A相，乙腈为B相，0.1％磷酸水溶液为C相；梯度洗脱，检测波长为360nm，流速为1mL/min，柱温30℃，进样量10μL；记录谱图得到小花清风藤药材的HPLC指纹图谱； (4)标准指纹谱图的确认：按照上述提供的方法，对多批次小花清风藤建立其HPLC指纹图谱，通过分析比较确定了15个共有峰，这些共有峰构成了小花清风藤的指纹特征，建立了共有模式，作为小花清风藤药材的标准指纹图谱。 2.如权利要求1所述的小花清风藤的HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：所述供试品溶液这样制备：精密称定小花清风藤粉末1g，置50mL具塞锥形瓶中，精密加70％乙醇溶液15mL，称定重量，超声提取60min，放冷，用70％乙醇溶液补重，摇匀，过滤，滤液用0.45μm有机微孔滤膜过滤，即得。 3.如权利要求1或2所述的小花清风藤的HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：超声提取时，功率为100W，频率为80Hz。 4.如权利要求1所述的小花清风藤的HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：梯度洗脱时，梯度洗脱程序是：0-5min：5％→12％的A和3％→6％的B；5-15min：12％→10％的A和6％→8％的B；15-20min：10％→20％的A和8％→10％的B；20-35min：20％→53％的A和10％→28％的B；35-45min：53％的A和28％的B；45-50min：53％→70％的A和28％→30％的B；50-60min：70％→65％的A和30％→35％的B。 5.如权利要求1所述的小花清风藤的HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：所述15个共有峰中，1号峰为槲皮素-3-O-龙胆双糖苷，2号峰为Camellianoside，3号峰为TsubakiosideA，4号峰为山奈酚-3-O-芸香糖苷，6号峰为异鼠李素-3-O-芸香糖苷。 6.如权利要求1所述的小花清风藤的HPLC指纹图谱建立方法，其特征在于：所述15个共有峰，以6号峰异鼠李素-3-O-芸香糖苷为参照峰，其相对保留时间分别为0.444-0.447、0.515-0.518、0.714-0.719、0.831-0.833、0.943-0.945、1.000、1.107-1.117、1.551-1.557、1.629-1.635、1.646-1.653、1.664-1.671、1.776-1.784、1.804-1.813、2.250-2.260、2.282-2.292。
所属类别：	发明专利