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原文传递一种适配体传感器及其制备方法

专利名称：	一种适配体传感器及其制备方法
摘要：	本发明涉及一种利用靶分子与其适体之间的特异性识别的性质，构建的基于纳米通道限域特性的单核增生李斯特菌快速超灵敏检测器。本发明还涉及将经单核增生李斯特菌的DNA适体修饰的多孔氧化铝膜作为电极，组装自制电解池；铁氰化钾离子作为探针离子，对单核增生李斯特菌进行检测的方法。当LM存在且浓度较低时，电流升高值随其浓度的增加显著下降；随LM浓度的增加，电流变化值下降；LM浓度在100‑1250CFU/mL范围内时，与电流升高值之间呈线性关系；当其浓度大于1500CFU/mL时，电流变化值趋于稳定。因此，该检测方法对LM的最低检测限可达100CFU/mL，线性范围100‑1250CFU/mL，可在10分钟内完成检测。经108CFU/mL的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌对照实验，表明其对李斯特菌具有高度选择性。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广东海洋大学
发明人：	李承勇;周浓;周春霞;王娟
专利状态：	有效
申请日期：	2016-05-19T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201910106931.2
公开号：	CN109900757A
代理机构：	北京锺维联合知识产权代理有限公司
代理人：	罗银燕
分类号：	G01N27/26(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	524088 广东省湛江市麻章区湖光岩东海大路1号
主权项：	1.一种适配体传感器，其包括多孔氧化铝膜电极和含有磷酸二氢钠与磷酸氢二钠配制的pH值为7的PBS缓冲溶液的电解池，所述多孔氧化铝膜电极为表面经单核增生李斯特菌的DNA适体修饰的多孔氧化铝膜，并且在其电极的外侧面镀金。 2.根据权利要求1的适配器传感器，其中，所述多孔氧化铝膜的孔径为20nm。 3.根据权利要求1或2的适配器传感器，其中所述DNA适体是DNA单核苷酸链，有47个氨基，其中“5′”端修饰了一个醛基(5′-CHO-ATC CAT GGG GCG GAG ATG AGG GGG AGG AGGGCG GGT ACC CGG TTG AT-3′)。 4.根据权利要求1-3中任一项的适配器传感器，所述镀金是通过使用真空离子溅射仪实现的。 5.制备权利要求1的适配器传感器的方法，所述方法包括：步骤(1)：将多孔氧化铝膜逐步清洗、煮沸、浸泡以修饰官能团；步骤(2)：用真空离子溅射仪在多孔氧化铝膜一面镀金、过塑制成膜电极；步骤(3)：将与单核增生李斯特菌特异性结合的适体修饰在多孔氧化铝膜的纳米通道表面上。 6.根据权利要求5的方法，所述多孔氧化铝膜的孔径为20nm。 7.根据权利要求5或6的方法，其中，在步骤(1)中，使用30％的过氧化氢来修饰羟基；使用3-氨丙基三乙氧基硅烷来修饰氨基。 8.根据权利要求5-7中任一项的方法，在步骤(3)中，所使用的适体是DNA单核苷酸链，有47个氨基，其中“5′”端修饰了一个醛基(5′-CHO-ATC CAT GGG GCG GAG ATG AGG GGGAGG AGG GCG GGT ACC CGG TTG AT-3′)。
所属类别：	发明专利