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原文传递启脾制剂中人参茎叶掺伪的检查方法

专利名称：	启脾制剂中人参茎叶掺伪的检查方法
摘要：	本发明公开了一种启脾制剂中人参茎叶掺伪的检查方法，启脾制剂包括启脾丸和启脾口服液，检查方法是采用高效液相色谱法检测启脾制剂中是否含人参茎叶专属成分人参皂苷F1，以检查启脾制剂中是否存在人参茎叶掺伪的现象。本发明的方法先进行了专属性试验，得出人参茎叶区别于人参其他部位的专属性成分，再用专属性成分作为对照品进行检测，结果区别明显；而且该方法还进行了试验条件的考察，且将启脾丸与启脾口服液中人参茎叶掺伪的检查方法统一，方法简单、精密度高、重现性好、稳定性好、回收率高、测定结果准确，为启脾制剂质量标准的建立奠定了基础。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广西;45
申请人：	广西壮族自治区食品药品检验所
发明人：	张涛;谢培德;吕轶峰;林敬开;冯枫;白桂昌;覃丽郦
专利状态：	有效
申请日期：	2019-01-30T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201910093672.4
公开号：	CN109900818A
代理机构：	南宁市来来专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	来光业
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	530021 广西壮族自治区南宁市青秀区青湖路9号
主权项：	1.一种启脾制剂中人参茎叶掺伪的检查方法，其特征在于，所述启脾制剂包括启脾丸和启脾口服液，检查方法是采用高效液相色谱法检测启脾制剂中是否含人参茎叶专属性成分人参皂苷F1，以检查启脾制剂中是否存在人参茎叶掺伪的现象，具体内容如下：（1）色谱条件：超高效液相色谱仪，Thermo AcclaimTM RSLC C120 C18（2.1×100mm，2.2μm）；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，进行梯度洗脱50min；检测波长为203nm；理论板数按人参皂苷Rg1峰计算应不低于10000；（2）对照品溶液的制备： 1）启脾口服液检查所需的对照品溶液①：取人参皂苷F1对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含60μg人参皂苷F1的溶液，即得； 2）启脾丸检查所需的对照品溶液②：取人参皂苷F1对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含7.5μg人参皂苷F1的溶液，即得；（3）供试品溶液的制备： 1）启脾口服液作为供试品：精密量取样品50mL，加入三氯甲烷振摇提取3次，每次30mL，弃去三氯甲烷提取液，水液加水饱和正丁醇振摇提取5次，水饱和正丁醇的加入量依次是50mL、30mL、30mL、20mL、20mL，合并正丁醇提取液，加氨试液洗涤4次，每次50mL，弃去氨试液，再加水饱和正丁醇轻轻振摇洗涤2次，每次50mL，弃去水洗液，正丁醇液回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解并转移至5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.22μm滤膜滤过，取续滤液，即得； 2）启脾丸作为供试品：取样品10丸，剪碎，取大蜜丸5g或取水丸2g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入70%乙醇50mL，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25mL，蒸干，残渣加水30mL使溶解，用水饱和正丁醇提取3次，每次50mL，合并正丁醇提取液，用氨试液50mL洗涤，弃去氨试液，再用水饱和正丁醇50mL洗涤1次，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至5mL量瓶，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.22μm滤膜滤过，取续滤液，即得；（4）测定：精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μL，注入超高效液相色谱仪，测定，即得；对照品溶液①和启脾口服液供试品溶液对应，对照品溶液②和启脾丸供试品溶液对应。 2.根据权利要求1所述启脾制剂中人参茎叶掺伪的检查方法，其特征在于，所述方法还包括在检查之前进行专属性试验，具体内容如下：（1）检测：取人参主根样品、须根样品、启脾制剂生产单位提供的人参样品、人参茎叶样品各0.25g，精密称定，置锥形瓶中，精密加入70%乙醇50mL，称定重量，加热回流30分钟，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液25mL，蒸干，残渣加水30mL使溶解，用水饱和正丁醇提取3次，每次50mL，合并正丁醇提取液，用氨试液50mL洗涤，弃去氨试液，再用水饱和正丁醇50mL洗涤1次，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇使溶解并转移至5mL量瓶，加甲醇稀释至刻度，摇匀，用0.22μm滤膜滤过，取续滤液，即得供试品溶液，取各供试品溶液1μL，注入超高效液相色谱仪，测定；（2）结果人参主根、须根及启脾制剂生产单位提供的人参均未检出人参皂苷F1成分，而人参茎叶检出人参皂苷F1，因此，以人参皂苷F1为人参茎叶的专属性成分，对启脾制剂进行人参茎叶掺伪的考察。 3.根据权利要求1所述启脾制剂中人参茎叶掺伪的检查方法，其特征在于，所述方法还包括实验条件的考察：（1）色谱条件考察；（2）供试品溶液制备的考察。 4.根据权利要求1所述启脾制剂中人参茎叶掺伪的检查方法，其特征在于，所述方法还包括限度的拟定，具体内容如下：（1）启脾口服液限度的拟定：取人参3.82g、人参茎叶0.21g，混匀，取其他各味相当于制备200mL的药材，按处方工艺制成200mL掺5%人参茎叶的启脾口服液样品；精密量取50mL，按启脾口服液供试品溶液制备方法制成5%人参茎叶掺伪样品供试品溶液，按色谱条件进行测定，结果人参茎叶皂苷F1含量约为59μg/mL；5%人参茎叶掺伪样品供试品溶液人参茎叶皂苷F1含量为5.9μg/mL，对应对照品的浓度为59μmg/mL，以5%掺伪作为启脾口服液检测低限即以人参茎叶皂苷F1对照品的浓度为限度，规定结果判断标准为：供试品色谱中，在与人参茎叶皂苷F1对照品色谱峰保留时间相应的位置上不得出现色谱峰；若出现保留时间相同的色谱峰，且该色谱峰峰面积值大于对照品溶液的峰面积值，则视为阳性检出；（2）启脾丸限度的拟定：取人参1.92g、人参茎叶0.11g，混匀，按处方五十分之一用量称取除人参外的各味药材，混匀，按处方工艺制成掺5%人参茎叶的启脾丸样品；取5g，精密称定，按启脾丸供试品溶液制备方法制成5%人参茎叶掺伪样品供试品溶液，按色谱条件进行测定，结果人参茎叶皂苷F1含量为0.044mg/丸；5%人参茎叶掺伪样品供试品溶液，结果人参茎叶皂苷F1含量为0.044mg/丸，对应对照品的浓度为7.3μg/mL，规定结果判断标准为：供试品色谱中，在与人参茎叶皂苷F1对照品色谱峰保留时间相应的位置上不得出现色谱峰；若出现保留时间相同的色谱峰，且该色谱峰峰面积值大于对照品溶液的峰面积值，则视为阳性检出。
所属类别：	发明专利