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原文传递一种检测蘑菇中鹅膏毒肽的方法

专利名称：	一种检测蘑菇中鹅膏毒肽的方法
摘要：	本发明公开了一种检测蘑菇中鹅膏毒肽的方法。该方法包括如下步骤：(1)采用甲醇提取蘑菇子实体得到毒素提取液；(2)采用HPLC检测所述毒素提取液，得到鹅膏毒肽的吸收峰的峰面积；(3)采用鹅膏毒肽的标样配制标准溶液，然后采用HPLC检测所述标准溶液，得到不同进样量时的峰面积，进而得到所述鹅膏毒肽的标样的进样量与峰面积之间的线性回归方程；步骤(2)和(3)中HPLC检测的条件相同；(4)根据步骤(2)中得到的峰面积与步骤(3)得到的线性回归方程，即得到蘑菇中鹅膏毒肽的含量。本驸马方法可用于蘑菇中鹅膏毒肽的定量检测，适用于山东乃至泰山毒蘑菇种类资源多样性的特点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东省泰安第二中学
发明人：	张化榕;李壮
专利状态：	有效
申请日期：	2019-02-19T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-21T00:00:00+0800
申请号：	CN201910121333.2
公开号：	CN109917053A
代理机构：	北京纪凯知识产权代理有限公司
代理人：	王春霞
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	271000 山东省泰安市虎山东路校园街3号
主权项：	1.一种检测蘑菇中鹅膏毒肽的方法，包括如下步骤： (1)采用甲醇提取蘑菇子实体得到毒素提取液； (2)采用HPLC检测所述毒素提取液，得到鹅膏毒肽的吸收峰的峰面积； (3)采用鹅膏毒肽的标样配制标准溶液，然后采用HPLC检测所述标准溶液，得到不同进样量时的峰面积，进而得到所述鹅膏毒肽的标样的进样量与峰面积之间的线性回归方程；步骤(2)和(3)中HPLC检测的条件相同； (4)根据步骤(2)中得到的峰面积与步骤(3)得到的线性回归方程，即得到蘑菇中鹅膏毒肽的含量。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(1)中，所述甲醇提取的步骤如下：将干燥的所述蘑菇子实体粉碎后，采用甲醇水溶液进行提取；离心后取上清液。 3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述甲醇水溶液的体积百分含量为50％；所述甲醇水溶液的用量为：1g所述蘑菇子实体：200mL甲醇水溶液；所述提取的条件如下：温度为30～37℃，时间为12～30h。 4.根据权利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述方法还包括采用石油醚脱脂处理所述上清液的步骤；所述脱脂处理后的提取液经浓缩、定容后用0.22μm的微孔滤膜过滤。 5.根据权利要求1-4中任一项所述的方法，其特征在于：步骤(2)和(3)中，所述HPLC检测的条件如下：分析柱为YWG C18，5μm反相分析柱；二极管阵列检测器为SPD-M20A；检测波长为295nm；洗脱液由A液和B液组成，pH值为5.0；其中，A液由体积含量为10％的乙腈和90％的0.02mol/L的醋酸铵水溶液的混合液，B液为体积含量为24％的乙腈和76％的0.02mol/L的醋酸铵水溶液的混合液；洗脱梯度为：0～15min，A液的体积含量由100％调至95％，B液的体积含量由0％调至5％；15～35min，A液的体积含量由95％调至20％，B液的体积含量由5％调至80％，并保持5min；40～45min，A液的体积含量由20％调至0％，B液的体积含量由80％调至100％，并保持5min；50～55min，A液的体积含量由0％调制100％，B液的体积含量由100％调至0％，并保持10min；流动相流速为1.0mL/min；进样量为20μL。
所属类别：	发明专利