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原文传递 无花果酶处理抗体筛选红细胞的制备方法及应用
专利名称: 无花果酶处理抗体筛选红细胞的制备方法及应用
摘要: 本发明无花果酶处理抗体筛选红细胞的制备方法及应用,它包括洗涤、配制。质控和处理等多个步骤。本发明无花果酶处理抗体筛选红细胞的制备方法及应用,可以及时检测出是否含有不规则抗体,从而避免引起溶血性输血反应和新生儿溶血病的发生。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 江苏;32
申请人: 江苏力博医药生物技术股份有限公司
发明人: 陈玉平;陈芳芳;王布强;孙玲
专利状态: 有效
申请日期: 2019-03-13T00:00:00+0800
发布日期: 2019-06-21T00:00:00+0800
申请号: CN201910190287.1
公开号: CN109917136A
分类号: G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址: 214400 江苏省无锡市江阴市高新区东盛西路78号
主权项: 1.一种无花果酶处理抗体筛选红细胞的制备方法及应用,其特征在于: 所述制备方法及应用包括以下几个步骤: (1)待处理的筛选红细胞用盐水分别洗涤3次 (2)无花果酶配制(1%wt/vol) 称量无花果酶1g,加pH7.3的PBS100ml,室温搅拌15分钟,离心除去不溶物,分装1ml/瓶,-20℃以下保存,有效期1年,解冻后1小时内使用 (3)试剂 无花果酶:1% 无不规则抗体的血浆:10-12人份 抗-Fya:效价≥16 Fy(a+b-)RBCs:0.25ml压积RBCs,盐水洗涤3次 10mM PBS pH7.3 (4)酶浓度质控 a、于37℃用酶处理Fy(a+b-)RBCs15min。用抗-Fya检测处理好于Fy(a+b-)RBCs,如果Fy(a+b-)RBCs反应仍然阳性,则通过增加37℃处理时间(一分钟为一台阶,逐步提升)后继续检测 b、按照上述处理酶筛选红细胞,并用无不规则抗体血浆检测如果出现阳性,则降低上述酶处理的时间,1分钟为一阶段,直到与无意外抗体的血浆反应阴性且Fya抗原失活为止 (5)处理程序 a、用9份pH7.3PBS稀释1份1%无花果酶 b、将0.1ml压积RBC和0.5ml稀释后的无花果酶混合 c、37℃孵育到设定的时间(15min) d、盐水洗涤红细胞3次 e、用红细胞保存液稀释红细胞至所需浓度2-8℃保存72小时 f、检测。
所属类别: 发明专利
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