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原文传递一种基于UPLC-QTOF-MS检测伸筋草生物碱成分的方法

专利名称：	一种基于UPLC-QTOF-MS检测伸筋草生物碱成分的方法
摘要：	本发明提供了一种基于UPLC‑QTOF‑MS检测伸筋草中生物碱成分的方法，包括以下步骤：(1)将伸筋草制成粉末，精密称定，然后与溶剂混合，称定重量；(2)将步骤(1)所得的伸筋草超声破碎，然后将超声过的伸筋草溶液摇匀，离心，过滤，取续滤液，即得到待测样品；(3)用超高效液相色谱分离步骤(2)中的待测样品，得到生物碱待测样品，将所得的生物碱待测样品用质谱检测，得生物碱成分物质峰，用分析软件对所述物质峰进行定性分析。本发明的方法首次采用UPLC‑QTOF‑MS技术对伸筋草中生物碱成分进行检测并定性，所述方法具有高效、快速、准确的特点。采用本发明的方法共鉴定出34种生物碱成分，为进一步研究伸筋草药效物质基础及全面质量控制提供了依据。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江阴天江药业有限公司
发明人：	张云天;翟燕娟;张宇静;张玉;何雪霞
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-30T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-21T00:00:00+0800
申请号：	CN201910361804.7
公开号：	CN109917066A
代理机构：	北京林达刘知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	刘新宇
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	214434 江苏省无锡市江阴高新区新胜路1号
主权项：	1.一种基于UPLC-QTOF-MS检测伸筋草中生物碱成分的方法，包括以下步骤： (1)将伸筋草制成粉末，精密称定，然后与溶剂混合，称定重量； (2)将步骤(1)所得的伸筋草超声破碎，然后将超声过的伸筋草溶液摇匀，离心，过滤，取续滤液，即得到待测样品； (3)用超高效液相色谱分离步骤(2)中的待测样品，得到生物碱待测样品，将所得的生物碱待测样品用质谱检测，得生物碱成分物质峰，用分析软件对所述物质峰进行定性分析。 2.根据权利要求1所述的一种基于UPLC-QTOF-MS检测伸筋草中生物碱成分的方法，其特征在于，所述方法还包括以下步骤，在步骤(1)将伸筋草制成粉末之前先将伸筋草烘干。 3.根据权利要求2所述的一种基于UPLC-QTOF-MS检测伸筋草中生物碱成分的方法，其特征在于，所述烘干的步骤是将伸筋草放入烘箱中烘烤，温度为40～100℃，优选为50-70℃，烘烤的程度为将伸筋草烘烤至恒重。 4.根据权利要求1所述的一种基于UPLC-QTOF-MS检测伸筋草中生物碱成分的方法，其特征在于，所述方法还包括以下步骤，在步骤(2)将伸筋草超声破碎后，放冷，再称定重量，用步骤(1)中的溶剂补足减失的重量。 5.根据权利要求1所述的一种基于UPLC-QTOF-MS检测伸筋草中生物碱成分的方法，其特征在于，步骤(1)中的溶剂为甲醇，水或者甲醇水溶液，所述伸筋草与溶剂的质量体积比为0.5-10g：10-100ml。 6.根据权利要求1所述的一种基于UPLC-QTOF-MS检测伸筋草中生物碱成分的方法，其特征在于，步骤(2)中超声的时间为5-120分钟，超声功率为100～400W，超声频率为10～100KHz，离心的转速为5000～20000rpm，离心时间为2～30分钟。 7.根据权利要求1所述的一种基于UPLC-QTOF-MS检测伸筋草中生物碱成分的方法，其特征在于，步骤(3)中的超高效液相色谱的分离条件为，色谱柱为Waters UPLC CORTECS T3液相色谱柱、Waters ACQUITY UPLC HSS T3液相色谱柱或Agilent Eclipse Plus C18液相色谱柱，洗脱系统流动相为：流动相A为体积浓度0.02～0.5％甲酸水溶液，流动相B为乙腈溶液，流速为0.1-1ml/min。 8.根据权利要求7所述的一种基于UPLC-QTOF-MS检测伸筋草中生物碱成分的方法，其特征在于，所述色谱柱的柱温为10-50℃，洗脱系统流动相为：流动相A为体积浓度0.05～0.2％甲酸水溶液，流动相B为乙腈溶液，流速为0.2-0.5ml/min，进样体积为0.5-2μL，梯度洗脱程序为下表所示：时间(分钟) 流动相A(％) 流动相B(％) 0～5 100→97 0→3 5～6 97→89 3→11 6～13 89 11 13～18 89→70 11→30 18～22 70→62 30→38 22～25 62→55 38→45 25～27 55→10 45→90 27～29 10 90 29～30 10→100 90→0 。 9.根据权利要求1所述的一种基于UPLC-QTOF-MS检测伸筋草中生物碱成分的方法，其特征在于，步骤(3)中质谱检测的条件为：离子源为电喷雾离子源、大气压化学电离、电子轰击电离、化学电离或快原子轰击，干燥气温度为200-400℃，流量为1-20L/min，雾化器压力为10-100psi。 10.根据权利要求1所述的一种基于UPLC-QTOF-MS检测伸筋草中生物碱成分的方法，其特征在于，所述分析软件为Aglient MassHunter Qualitative Analysis B.07.00软件。
所属类别：	发明专利