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原文传递一种消渴清药物生物碱类成分检测方法

专利名称：	一种消渴清药物生物碱类成分检测方法
摘要：	本发明涉及一种消渴清药物生物碱类成分检测方法，所述方法，包括以下步骤：A供试品溶液制备，B测定：吸取步骤A所得的供试品溶液，注入高效液相色谱仪测定，得到色谱图，C和消渴清药物生物碱类成分标准对照指纹图谱对照，符合一致为合格产品。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	天津;12
申请人：	天士力医药集团股份有限公司
发明人：	刘海涛;苏娟;高展;孙玉侠
专利状态：	有效
申请日期：	2018-03-13T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-24T00:00:00+0800
申请号：	CN201810206462.7
公开号：	CN110274981A
代理机构：	北京华科联合专利事务所(普通合伙)
代理人：	王为
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	300410 天津市北辰区淮河道与汀江西路交口天之骄园区法务中心知识产权部
主权项：	1.一种消渴清药物生物碱类成分检测方法，其特征在于，包括以下步骤 A供试品溶液制备，方法如下：取待测样品消渴清药物0.3-0.7g，加入8-12ml甲醇溶液中，密闭，称定重量，超声处理，取出，放冷，再称定重量，用甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，离心，取4-6ml，上中性氧化铝柱，用甲醇10-15ml洗脱，收集流出液与洗脱液，加水至24-26ml，摇匀，滤过，得到滤液； B测定：吸取步骤A所得的供试品溶液，注入高效液相色谱仪测定，得到色谱图，C和消渴清药物生物碱类成分标准对照指纹图谱对照，符合一致为合格产品。 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，其中， A供试品溶液制备，方法如下：取待测样品消渴清药物0.5g，加入10ml甲醇盐酸的混合溶液，超声处理30分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇盐酸混合溶液补足减失的重量，摇匀，离心3分钟，取5ml，上中性氧化铝柱上，用甲醇15ml洗脱，收集流出液与洗脱液于25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，滤过，得到滤液。 3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，其中， A供试品溶液制备，方法如下：取待测样品消渴清药物0.5g，精密称定，置于50ml离心管中，精密加入10ml甲醇:盐酸(100:1)混合溶液，密闭，称定重量，超声处理，取出，放冷，再称定重量，用甲醇:盐酸(100:1)混合溶液补足减失的重量，摇匀，离心3分钟，取上清液备用；精密量取续滤液5ml，加在中性氧化铝柱上，用甲醇15ml洗脱，收集流出液与洗脱液于25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，滤过，得续滤液。 4.根据权利要求1-3任何一项权利要求所述的检测方法，其特征在于，其中高效液相色谱的色谱条件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％三氟乙酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；柱温35℃；检测波长为345nm梯度洗脱程序为或或 5.权利要求1所述的消渴清药物生物碱类成分标准对照指纹图谱的建立方法，其特征在于，步骤如下： A对照品溶液制备，方法如下：分别取盐酸巴马汀和盐酸小檗碱对照品，加甲醇溶液制成酸巴马汀和盐酸小檗碱的混合对照品溶液； B供试品溶液制备，方法如下：取多批次合格消渴清药物0.3-0.7g，加入8-12ml甲醇溶剂中，密闭，称定重量，超声处理，取出，放冷，再称定重量，用甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，离心，取4-6ml，上中性氧化铝柱，用甲醇10-15ml洗脱，收集流出液与洗脱液，加水至24-26ml，摇匀，滤过，得到滤液； C测定：吸取步骤A和B所得的溶液，注入高效液相色谱仪测定，得到色谱图，上述方法所得多批次合格药物的色谱图经过计算机模型处理，形成统一一致的色谱图，从而得到一种消渴清药物生物碱类成分标准对照指纹图谱。 6.根据权利要求5的方法，其特征在于，步骤如下： A对照品溶液制备，方法如下：分别取盐酸巴马汀和盐酸小檗碱对照品，精密称定，加80％甲醇制成每ml含盐酸巴马汀1.0～3.0μg和盐酸小檗碱3.5～5.5μg的混合对照品溶液； B供试品溶液制备，方法如下：取多批次合格消渴清药物0.5g，加入10ml甲醇盐酸的混合溶液，超声处理30分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇盐酸混合溶液补足减失的重量，摇匀，离心3分钟，取5ml，上中性氧化铝柱上，用甲醇15ml洗脱，收集流出液与洗脱液于25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，滤过，得到滤液； C测定：吸取步骤A和B所得的溶液，注入高效液相色谱仪测定，得到色谱图，上述方法所得多批次合格药物的色谱图经过计算机模型处理，形成统一一致的色谱图，从而得到一种消渴清药物生物碱类成分标准对照指纹图谱。 7.根据权利要求6的方法，其特征在于，步骤如下：步骤A对照品溶液制备，方法如下：分别取盐酸巴马汀和盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加80％甲醇制成每ml含盐酸巴马汀2μg和盐酸小檗碱4.5μg的混合对照品溶液；步骤B供试品溶液制备，方法如下：取多批次合格消渴清药物0.5g，精密称定，置于50ml离心管中，精密加入10ml甲醇:盐酸(100:1)混合溶液，密闭，称定重量，超声处理，取出，放冷，再称定重量，用甲醇:盐酸(100:1)混合溶液补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液备用；精密量取续滤液5ml，加在中性氧化铝柱上，用甲醇15ml洗脱，收集流出液与洗脱液于25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，滤过，得到续滤液；步骤C测定：吸取步骤A和B所得的溶液，注入高效液相色谱仪测定，得到色谱图，上述方法所得多批次合格药物的色谱图经过计算机模型处理，形成统一一致的色谱图，从而得到一种消渴清药物生物碱类成分标准对照指纹图谱。 8.根据权利要求5-7任意一项权利要求所述的方法，其特征在于，其中，高效液相色谱的色谱条件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％三氟乙酸溶液为流动相B，按表中的规定进行梯度洗脱；柱温35℃；检测波长为345nm，梯度洗脱程序为或或 9.一种消渴清药物生物碱类成分的含量检测方法，其特征在于，包括以下步骤： A对照品溶液制备，方法如下：取盐酸小檗碱对照品，精密称定，加甲醇溶液制成盐酸小檗碱对照品溶液； B供试品溶液制备，方法如下：取待测样品消渴清药物0.3-0.7g，加入8-12ml甲醇溶剂中，密闭，称定重量，超声处理，取出，放冷，再称定重量，用甲醇溶液补足减失的重量，摇匀，离心，取4-6ml，上中性氧化铝柱，用甲醇10-15ml洗脱，收集流出液与洗脱液，加水至24-26ml，摇匀，滤过，得到滤液； C测定：吸取步骤A和B所得的溶液，注入高效液相色谱仪测定，得到色谱图，计算样品中盐酸小檗碱含量，使用相对校正因子计算出盐酸巴马汀的含量，梯度洗脱程序为或或 10.根据权利要求9所述的含量检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤A对照品溶液制备，方法如下：取盐酸小檗碱对照品，精密称定，加80％甲醇制成盐酸小檗碱4.5μg对照品溶液；步骤B供试品溶液制备，方法如下：取消渴清颗粒0.5g，精密称定，置于50ml离心管中，精密加入10ml甲醇:盐酸(100:1)混合溶液，密闭，称定重量，超声处理，取出，放冷，再称定重量，用甲醇:盐酸(100:1)混合溶液补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液备用；精密量取续滤液5ml，加在中性氧化铝柱上，用甲醇15ml洗脱，收集流出液与洗脱液于25ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，滤过，得到续滤液；步骤C测定：吸取步骤A和B所得的溶液各20μl，注入高效液相色谱仪测定，得到色谱图，计算样品中盐酸小檗碱、使用相对校正因子计算出盐酸巴马汀的含量，其中，高效液相色谱的色谱条件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％三氟乙酸溶液为流动相B，进行梯度洗脱；柱温35℃；检测波长为345nm。
所属类别：	发明专利