详情

原文传递一种消渴清指纹图谱检测方法

专利名称：	一种消渴清指纹图谱检测方法
摘要：	本发明涉及一种消渴清药物指纹图谱检测方法，所述方法，包括以下步骤：步骤a：黄酮类成分芒果苷的检测方法，步骤b：挥发性成分及非极性成分苍术素的检测方法；以及消渴清指纹图谱的建立方法，所述方法，包括以下步骤：步骤a：消渴清黄酮类成分指纹图谱的制备方法，步骤b：消渴清挥发性成分及非极性成分的指纹图谱的制备方法，所得多批次合格产品的色谱图经过计算机模型处理，形成统一一致的色谱图，从而得到一种消渴清药物标准对照指纹图谱。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	天津;12
申请人：	天士力医药集团股份有限公司
发明人：	刘海涛;苏娟;高展;孙玉侠
专利状态：	有效
申请日期：	2018-03-13T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-24T00:00:00+0800
申请号：	CN201810205210.2
公开号：	CN110274963A
代理机构：	北京华科联合专利事务所(普通合伙)
代理人：	王为
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	300410 天津市北辰区淮河道与汀江西路交口天之骄园区法务中心知识产权部
主权项：	1.一种消渴清药物的检测方法，其特征在于，所述方法，包括以下步骤：步骤a：黄酮类成分芒果苷的含量测定方法，所述方法步骤如下：步骤a1对照品溶液的制备；步骤a2供试品溶液的制备；步骤a3测定：分别吸取步骤a1所得的对照品溶液及步骤a2供试品溶液，注入超高效液相色谱仪测定，得到色谱图，根据色谱图计算芒果苷的含量；步骤b：挥发性成分及非极性成分苍术素的含量测定方法，所述方法步骤如下：步骤b1对照品溶液的制备；步骤b2供试品溶液的制备；步骤b3测定：分别吸取步骤b1所得的苍术素对照品溶液与步骤b2所得的供试品溶液，注入气相色谱仪测定，得到色谱图，根据色谱图计算苍术素的含量。 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述方法，包括以下步骤：步骤a：黄酮类成分芒果苷的含量测定方法，所述方法步骤如下：步骤a1对照品溶液的制备：取芒果苷对照品适量，精密称定，加50％-70％甲醇溶液制成每1ml含芒果苷15μg-25μg的对照品溶液；步骤a2供试品溶液的制备：取消渴清药物0.15g-0.50g，加入50％-70％甲醇10ml，超声处理10-40分钟，取出，放冷，离心，吸取上清液0.8-1.2ml，上聚酰胺柱，先用沸程60℃～90℃的石油醚20ml洗脱，弃去洗脱液，再用甲醇洗脱，收集洗脱液，用甲醇定容，摇匀，取定容后的甲醇溶液18-22ml，水浴蒸至近干，转移至量瓶中，加50％-70％(v/v)的甲醇定容，摇匀，滤过，得到滤液；步骤a3分别吸取步骤芒果苷对照品溶液及供试品溶液，注入超高效液相色谱仪测定；步骤b：挥发性成分及非极性成分苍术素的含量测定方法，所述方法步骤如下：步骤b1对照品溶液的制备取苍术素对照品适量，精密称定，至棕色容量瓶中，加甲醇制成溶液，摇匀，即得苍术素对制成每1ml含0.03mg-0.05mg的溶液，步骤b2供试品溶液的制备取消渴清药物0.7-1.3g，加入40-60％甲醇10ml，超声10-35min，使完全溶解，再精密加入沸程60～90℃的石油醚5-15ml,密塞，精密称定，超声萃取15-35min,补足减失重量，离心,取上清液，滤过，即得；步骤b3测定法吸取苍术素对照品溶液与供试品溶液，注入气相色谱仪，测定，即得。 3.根据权利要求1或2任何一项权利要求所述的检测方法，其中，步骤a：黄酮类成分及芒果苷的含量测定方法的色谱条件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.05％-0.15％三氟乙酸溶液为流动相B，流速为0.8ml/min-1.2ml/min，梯度洗脱；柱温30℃-40℃；检测波长为254nm 梯度洗脱程序或梯度洗脱程序 4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于，其中流动相B为0.1％三氟乙酸溶液，流速为1.0ml/min，柱温为35℃。 5.根据权利要求1或2任何一项权利要求所述的检测方法，其中，步骤b：挥发性成分及非极性成分的含量测定方法的色谱条件为用(5％-苯基)-甲基聚硅氧烷色谱柱，以氮气为载气，进样口温度250℃；分流比1:1；检测器温度250℃；进行升温程序；流速为每分钟1.0ml，升温程序或升温程序 6.一种消渴清药物指纹图谱的建立方法，所述方法包括以下步骤：步骤a：消渴清黄酮类成分指纹图谱的制备方法，所述方法步骤如下：步骤a1多批次合格消渴清药物供试品溶液的制备；步骤a2测定：吸取步骤a1制备的多批次合格消渴清药物的供试品溶液，注入超高效液相色谱仪测定，得到多批次合格消渴清药物的色谱图；步骤b：消渴清挥发性成分及非极性成分的指纹图谱的制备方法，所述方法步骤如下：步骤b1多批次合格消渴清药物供试品溶液的制备步骤b2测定：分别吸取步骤b1所得的多批次合格消渴清药物的供试品溶液，注入气相色谱仪测定，得多批次合格消渴清药物到色谱图；上述方法所得多批次合格药物的色谱图经过计算机模型处理，形成统一一致的色谱图，得到消渴清药物超高效液相标准对照指纹图谱，和气相色谱标准对照指纹图谱。 7.根据权利要求6所述的方法，所述方法包括以下步骤：步骤a：消渴清黄酮类成分指纹图谱的制备方法，所述方法步骤如下：步骤a1供试品溶液的制备：取消渴清成药或中间体消渴清药物活性成分0.15g-0.50g，加入50％-70％甲醇10ml，超声处理10-40分钟，取出，放冷，离心，吸取上清液0.8-1.2ml，上聚酰胺柱，先用沸程60℃～90℃的石油醚20ml洗脱，弃去洗脱液，再用甲醇洗脱，收集洗脱液，用甲醇定容，摇匀，取定容后的甲醇溶液18-22ml，水浴蒸至近干，转移至量瓶中，加50％-70％(v/v)的甲醇定容，摇匀，滤过，得到滤液；步骤a2吸取步骤a1制备的多批次合格消渴清药物的供试品溶液，注入超高效液相色谱仪测定，得到色谱图；步骤b：消渴清挥发性成分及非极性成分的指纹图谱的制备方法，所述方法步骤如下：步骤b1供试品溶液的制备取消渴清药物0.7-1.3g，加入40-60％甲醇10ml，超声10-35min，使完全溶解，再精密加入沸程60～90℃的石油醚5-15ml,密塞，精密称定，超声萃取15-35min,补足减失重量，离心,取上清液，滤过，即得；步骤b2测定：分别吸取步骤b1所得的多批次合格消渴清药物的供试品溶液，注入气相色谱仪测定，得到色谱图。 8.根据权利要求6或7任何一项权利要求所述的方法，其中，步骤a：黄酮类成分及芒果苷的含量测定方法的色谱条件为以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.05％-0.15％三氟乙酸溶液为流动相B，流速为0.8ml/min-1.2ml/min，梯度洗脱；柱温30℃-40℃；检测波长为254nm；梯度洗脱程序或梯度洗脱程序其中，流动相B为0.1％三氟乙酸溶液，流速为1.0ml/min，柱温为35℃。 9.根据权利要求6或7任何一项权利要求所述的方法，其中，步骤b：挥发性成分及非极性成分的含量测定方法的色谱条件为用(5％-苯基)-甲基聚硅氧烷色谱柱，以氮气为载气，进样口温度250℃；分流比1:1；检测器温度250℃；，进行升温程序；流速为每分钟1.0ml。升温程序或升温程序 10.一种消渴清药物的指纹图谱检测方法，所述方法，步骤如下：步骤a：黄酮类成分芒果苷的检测方法，所述方法步骤如下：供试品溶液的制备；吸取供试品溶液，注入超高效液相色谱仪测定，得到色谱图；步骤b：挥发性成分及非极性成分苍术素的检测方法，所述方法步骤如下：供试品溶液的制备；吸取供试品溶液，注入气相色谱仪测定，得到色谱图；将所得的消渴清药物超高效液相色图谱，和气相色谱图与消渴清药物超高效液相标准对照指纹图谱，和气相色谱标准对照指纹图谱进行对照，符合一致为合格产品。
所属类别：	发明专利