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一种利用SYBR GREEN I单染色技术检测污水处理活性污泥中聚糖菌的方法
| 专利名称： | 一种利用SYBR GREEN I单染色技术检测污水处理活性污泥中聚糖菌的方法 |
| 摘要： | 一种利用SYBR GREEN I单染色技术检测污水处理活性污泥中聚糖菌的方法，属于污水生物处理技术领域。本发明根据聚糖菌的物理性质联合SYBR GREEN I单染色技术，检测其在污水处理系统中的含量。通过流式细胞仪对全菌形态特点进行检测，根据细菌体积大小与胞内颗粒复杂情况，分析聚糖菌占全菌的百分比，进而对聚糖菌做相对定量。本发明提供了一种经济、简便、可靠的污水处理系统活性污泥中聚糖菌的定量方法，为实际污水处理厂调控生物除磷条件提供了理论依据。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 北京;11 |
| 申请人： | 北京工业大学 |
| 发明人： | 曾薇;孟庆安;王保贵;彭永臻 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-04-01T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-06-28T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910255586.9 |
| 公开号： | CN109946218A |
| 代理机构： | 北京思海天达知识产权代理有限公司 |
| 代理人： | 刘萍 |
| 分类号： | G01N15/14(2006.01);G;G01;G01N;G01N15 |
| 申请人地址： | 100124 北京市朝阳区平乐园100号 |
| 主权项： | 1.一种利用SYBR GREEN I单染色技术检测污水处理活性污泥中聚糖菌的方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)取处理生活污水反应器中的泥于离心管中，在10000r/min离心3min，弃掉上清液，并往离心管上加入与泥相同体积PBS缓冲液，3倍泥体积质量百分比浓度为4％的多聚甲醛溶液，4℃固定3h； (2)离心弃掉上清液，往离心管加入与泥相同体积PBS缓冲液，超声破碎； (3)离心弃掉上清液，依次往离心管加入体积百分数为50％，80％，99％乙醇溶液，每次脱水3分钟共9分钟，每次加入乙醇溶液量为2倍泥体积，晾干； (4)往离心管中加入3倍泥体积的PBS缓冲液，然后依次在30μm与10μm滤膜过滤； (5)往过滤后的样品加入SYBR Green I染料，染色半小时； (6)对染色后的样品稀释500倍后，开启流式细胞仪，对样品进行检测； (7)在流式细胞仪第一通道上设置FL1＝700，收集50000个颗粒，对SYBR Green I显示阳性的区域进行圈门，对流式表示颗粒体积与复杂情况的图中圈出靠右单独的区域，得到聚糖菌占全菌的百分占比。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，超声破碎利用超声破碎仪，超声功率为80W，每超声30s后停5s，共超声4min30s。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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