详情

原文传递一种植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理方法及其采用的前处理固相材料

专利名称：	一种植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理方法及其采用的前处理固相材料
摘要：	本发明公开了一种植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理方法及其采用的前处理固相材料。该方法先以溶剂提取内源性油菜素甾醇，用吸附有硼亲和试剂的固相材料对所得提取溶液中的油菜素甾醇进行衍生和同步萃取，然后在解吸时同步引入盐诱导相转移萃取，进一步除去过量硼亲和试剂及亲水性杂质，进而实现了植物样品中内源性油菜素甾醇的选择性富集。该方法简单、快速、高灵敏、高通量，尤其在去除植物提取液内源性杂质方面表现出高选择性，可实现低含量的内源性油菜素甾醇的前处理，结合化学衍生，进而提高分析检测植物样品中内源性油菜素甾醇的灵敏度。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	武汉绿剑可瑞信科技有限公司
发明人：	冯钰锜;罗晓彤;蔡保东
专利状态：	有效
申请日期：	2017-12-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-05T00:00:00+0800
申请号：	CN201711459622.0
公开号：	CN109975085A
代理机构：	湖北武汉永嘉专利代理有限公司
代理人：	张秋燕
分类号：	G01N1/28(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	430070 湖北省武汉市东湖开发区高新大道666号武汉国家生物产业基地项目B、C、D区研发楼B1栋
主权项：	1.一种用于植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理固相材料，其特征在于它为一种吸附有硼亲和试剂的固相材料，包括硼亲和试剂和固相基体材料两部分，硼亲和试剂与固相基体材料之间依靠强阳离子交换作用与疏水作用结合；其中，硼亲和试剂的结构通式如式1或式2所示：式1、式2中，Z为苯基或苯甲基，Y为仲胺、叔胺基团，A为季铵盐基团，X为卤素离子。 2.根据权利要求1所述的一种用于植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理固相材料，其特征在于所述固体基体材料为含有阳离子交换基团的硅胶颗粒、磁性材料、无定型材料、凝胶、填充柱或整体柱中的一种。 3.根据权利要求1所述的一种用于植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理固相材料，其特征在于所述吸附有硼亲和试剂的固相材料直接由固体基体材料置于含有硼亲和试剂的溶液中吸附获得。 4.根据权利要求3所述的一种用于植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理固相材料，其特征在于所说固体基体材料质量与含有硼亲和试剂的溶液体积的比例在(1～100)mg：1mL，含有硼亲和试剂的溶液的浓度在0.5～10mg/mL。 5.一种植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理方法，其特征在于主要包括以下步骤： 1)在植物样品中定量加入多种内源性油菜素甾醇的同位素内标，然后以溶剂提取，得到样品溶液； 2)将步骤1)所得样品溶液中加入吸附有硼亲和试剂的固相材料，对样品溶液中的油菜素甾醇进行萃取和同步标记；其中，所述吸附有硼亲和试剂的固相材料为权利要求1所述的样品前处理固相材料； 3)将步骤2)所得固相材料中加入解吸液和盐，对油菜素甾醇的衍生产物进行解吸和同步盐诱导相转移萃取，弃去下层解吸液以除去过量硼亲和试剂及亲水性杂质，收集上层解吸液，从而实现植物样品中多种内源性油菜素甾醇的样品前处理。 6.根据权利要求5所述的一种植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理方法，其特征在于所述步骤1)所得样品溶液体积与加入吸附有硼亲和试剂的固相材料的质量比为1mL：(5～50mg)。 7.根据权利要求5所述的一种植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理方法，其特征在于步骤2)中加入吸附有硼亲和试剂的固相材料时加入部分水，并与步骤1)所得样品溶液混合，构成含水30～50wt％的溶液。 8.根据权利要求5所述的一种植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理方法，其特征在于步骤3)所述解吸液是包括水、与水互溶的有机溶剂的混合溶液，水、与水互溶的有机溶剂之间体积比为9：10～19：20之间。 9.根据权利要求5所述的一种植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理方法，其特征在于步骤3)中，盐加入的质量与步骤3)所述解吸液总体积的比为(20～50mg)：1mL。 10.根据权利要求5所述的一种植物样品中内源性油菜素甾醇的样品前处理方法，其特征在于步骤3)中收集上层解吸液后，还包括去除上层解吸液中的有机溶剂，然后复溶，获得直接用于定量分析检测植物样品中内源性油菜素甾醇的待测溶液。 11.一种植物样品中内源性油菜素甾醇的定量分析检测方法，其特征在于将权利要求10所述前处理方法所得植物样品中内源性油菜素甾醇的待测溶液通过分析仪器采集响应信号或者数据，结合稳定同位素和标准曲线法测定植物样品中内源性油菜素甾醇的含量。
所属类别：	发明专利