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原文传递一种基于纳米金荧光检测溶菌酶的方法及其应用

专利名称：	一种基于纳米金荧光检测溶菌酶的方法及其应用
摘要：	本发明提供一种基于纳米金荧光检测溶菌酶的方法及其应用，包括步骤如下：(1)溶菌酶标准溶液的配制：将溶菌酶标准品溶于磷酸盐缓冲溶液中，制得不同浓度的溶菌酶标准溶液；(2)标准曲线的测定：向不同浓度的溶菌酶标准溶液中加入纳米金溶液，于37℃下反应5min，加入罗丹明6G溶液，得混合溶液，测定混合溶液的荧光光谱并记录荧光强度，将每条曲线552nm处的荧光强度与对应的溶菌酶标准溶液浓度的对数值作图，得标准曲线；(3)待测样品溶菌酶的测定：测定待测样品的荧光强度，对照标准曲线计算其溶菌酶含量。本发明的定量检测限为0.1μg/mL，具有检测限低，操作过程简单，试剂用量少，检测方法快速、灵敏等优点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东大学
发明人：	于丽;郑聪;亓鲁滨;鹿洁;马慧;周乐乐
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-10T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-05T00:00:00+0800
申请号：	CN201910282960.4
公开号：	CN109975260A
代理机构：	济南金迪知识产权代理有限公司
代理人：	杨磊
分类号：	G01N21/64(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	250199 山东省济南市历城区山大南路27号
主权项：	1.一种基于纳米金荧光检测溶菌酶的方法，包括步骤如下： (1)溶菌酶标准溶液的配制：将溶菌酶标准品溶于磷酸盐缓冲溶液中，制得不同浓度的溶菌酶标准溶液； (2)标准曲线的测定：分别向步骤(1)制得的不同浓度的溶菌酶标准溶液中加入纳米金溶液，于37℃下反应5min，然后加入罗丹明6G溶液，得到混合溶液，分别取混合溶液，经激发光源激发，激发狭缝为2nm，发射狭缝为2nm，扫描其荧光光谱并记录荧光强度，将每条曲线552nm处的荧光强度与对应的溶菌酶标准溶液浓度的对数值作图，得到标准曲线； (3)待测样品溶菌酶的测定：将待测样品溶于磷酸盐缓冲溶液中，按照步骤(2)的方法测试体系的荧光强度，通过测得的荧光强度对照标准曲线计算得到待测样品中溶菌酶的含量。 2.根据权利要求1所述的基于纳米金荧光检测溶菌酶的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的磷酸盐缓冲溶液包括：磷酸10mmol/L，NaCl 138mmol/L，KCl 2.7mmol/L，溶液的pH＝7.4。 3.根据权利要求1所述的基于纳米金荧光检测溶菌酶的方法，其特征在于，步骤(1)中所述的溶菌酶标准溶液中溶菌酶的浓度为0.1～10μg/mL。 4.根据权利要求1所述的基于纳米金荧光检测溶菌酶的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的纳米金溶液的浓度为0.35nmol/L。 5.根据权利要求1所述的基于纳米金荧光检测溶菌酶的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的纳米金溶液的加入体积与溶菌酶标准溶液体积之比为1:1。 6.根据权利要求1所述的基于纳米金荧光检测溶菌酶的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的罗丹明6G溶液的浓度为0.1μmol/L。 7.根据权利要求1所述的基于纳米金荧光检测溶菌酶的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的罗丹明6G溶液的加入体积与溶菌酶标准溶液体积之比为1:1。 8.根据权利要求1所述的基于纳米金荧光检测溶菌酶的方法，其特征在于，步骤(2)中所述的激发光源的激发波长为520nm。 9.权利要求1-8任一项所述的基于纳米金荧光检测溶菌酶的方法，用于尿液中溶菌酶的检测。
所属类别：	发明专利