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原文传递黑老虎根的切片制备方法

专利名称：	黑老虎根的切片制备方法
摘要：	本发明公开了一种黑老虎根的切片制备方法，是以黑老虎的根为原料，经过软化剂的浸泡并采用超声处理，得到所述黑老虎根的切片。其中，所述软化剂包括以下重量份的原料：5份浓度为50％的氢氧化钾或氢氧化钠溶液、3份体积分数为30％的丙三醇以及2份超纯水。以强碱、甘油和水配制而得软化剂，不仅能够快速有效的将黑老虎的根快速软化，并且该软化剂原料简单、来源方便、同时毒性较小，再结合超声加热技术使得软化处理更充分，使得制备得到的切片效果更佳。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广西;45
申请人：	广西壮族自治区药用植物园
发明人：	周雅琴;余丽莹;谢月英;农东新;黄宝优;王春丽
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-26T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-12T00:00:00+0800
申请号：	CN201910234254.2
公开号：	CN110006721A
代理机构：	北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	靳浩
分类号：	G01N1/28(2006.01);G;G01;G01N;G01N1
申请人地址：	530023 广西壮族自治区南宁市兴宁区长岗路189号
主权项：	1.一种黑老虎根的切片制备方法，其特征在于：将黑老虎根为原料经过软化剂的浸泡并采用超声处理以后，再进行后续的步骤，最终得到黑老虎根的切片。 2.如权利要求1所述的黑老虎根的切片制备方法，其特征在于：所述软化剂包括以下重量份的原料： 5份质量浓度为50％的氢氧化钾或氢氧化钠溶液、3份体积分数为30％的丙三醇以及2份超纯水。 3.如权利要求1所述的黑老虎根的切片制备方法，其特征在于：所述软化剂通过以下步骤制备：量取5份质量浓度为50％的氢氧化钾或氢氧化钠溶液，加入3份体积分数为30％的丙三醇以及2份超纯水，搅拌至完全溶解，即得到所述软化剂。 4.如权利要求1所述的黑老虎根的切片制备方法，其特征在于，所述超声处理为：将黑老虎的根完全浸泡在所述软化剂中，采用可加热的超声仪在温度50—60℃、80Hz的条件下进行软化处理5次，每次30分钟。 5.如权利要求1所述的黑老虎根的切片制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一：配制软化剂：量取5份质量浓度为50％的氢氧化钾或氢氧化钠溶液，加入3份体积分数为30％的丙三醇、2份超纯水，搅拌至完全溶解，得到软化剂；步骤二：将超声仪的温度调节至50—60℃，把干燥的黑老虎的根浸泡于软化剂中转移至超声仪中，在80Hz条件下进行超声处理5次，每次30分钟，得到软化的黑老虎根；步骤三：配制固定液：取5份福尔马林溶液、5份正丙酸或冰醋酸溶液、90份浓度为70％的酒精混合，得到固定液；步骤四：将步骤二所得的软化的黑老虎根切割成5mm的小块，放入步骤三所得的固定液中进行固定24小时，得到固定好的黑老虎根；步骤五：将步骤四所得的固定好的黑老虎根取出，并依次转入体积浓度为75％、85％、95％、100％的酒精中浸泡40—45分钟，得到脱水后的黑老虎根；步骤六：将步骤五所得的脱水后的黑老虎的根放入透明剂中进行透明处理70—90分钟，得到透明的黑老虎根；步骤七：向步骤六所得的透明的黑老虎根中加入碎蜡，在温度为40℃的条件下保存10—20小时，取出浸蜡的黑老虎根加入纯石蜡并调节温度至55—60℃，保存9—15小时，期间每个3—5小时取出黑老虎根至新的纯石蜡一次，得到包埋好的黑老虎根；步骤八：取出包埋好的黑老虎根，采用自动切片机将黑老虎根切割成12—18μm的根切片；步骤九：用粘片剂将根切片粘附在载玻片上，并于35—45℃条件下将载玻片烤干，得到干燥的根切片；步骤十：将干燥的根切片经过复水再脱水处理后进行染色，最后用封固剂将切片封固，即得到所述黑老虎根的切片。 6.如权利要求5所述的黑老虎根的切片制备方法，其特征在于，所述透明剂可以是二甲苯或环保透明剂。 7.如权利要求5所述的黑老虎根的切片制备方法，其特征在于，所述透明处理的步骤为： S1：将二甲苯和无水酒精按1:2的体积比混合，得到第一混合液；将二甲苯和无水酒精按2:1的体积比混合，得到第二混合液； S2：将步骤五所得的脱水后的黑老虎的根放入无水酒精中浸泡10—15分钟，然后取出再放入第一混合液中浸泡15—20分钟；再取出放入第二混合液中浸泡20—25分钟；最后取出放入二甲苯中浸泡25—30分钟，即得到所述透明的黑老虎根。
所属类别：	发明专利