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原文传递甘草汁炙女贞子的指纹图谱检测方法

专利名称：	甘草汁炙女贞子的指纹图谱检测方法
摘要：	本发明公开了甘草汁炙女贞子指纹图谱的检测方法，该方法包括以下步骤：步骤1、甘草汁炙女贞子供试品溶液的制备；步骤2、混合对照品溶液的制备；步骤3、分别精密吸取定量供试品与对照品溶液注入液相色谱图仪，记录色谱图；步骤4、将甘草汁炙女贞子指纹图谱仪器导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择不同批次甘草汁炙女贞子的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰，用平均值计算法生成甘草汁炙女贞子的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积。本发明所研究的甘草汁炙女贞子指纹图谱，能全面、客观地评价甘草汁炙女贞子的质量。本发明提供的检测方法具有方法简单、准确度高、重复性好、精密度高等优点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	南京海昌中药集团有限公司
发明人：	蔡宝昌;李国维;金俊杰;李轩涛;秦昆明;丁斐;郑艳萍;申海宁
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-30T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-12T00:00:00+0800
申请号：	CN201910360552.6
公开号：	CN110007031A
代理机构：	南京经纬专利商标代理有限公司
代理人：	杨海军
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	210061 江苏省南京市高新开发区软件园2号研发楼B座1-3层
主权项：	1.一种甘草汁炙女贞子的指纹图谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1、甘草汁炙女贞子供试品溶液的制备：取适量生甘草，浸泡后煎煮，取煎煮液，浓缩，得甘草汁待用，称取适量女贞子饮片，用甘草汁闷润后炒制得甘草汁炙女贞子样品；取甘草汁炙女贞子打粉，称取粉末置于具塞锥形瓶中，加入甲醇，称重，超声处理后补足失重，离心后取上清液，用0.45μm有机微孔滤膜滤过，取续滤液，即得待测供试品溶液；步骤2、甘草汁炙女贞子对照品溶液的制备：分别取特女贞苷、甘草苷和甘草酸铵对照品适量，精密称定，分别置于容量瓶中，加甲醇分别配成特女贞苷、甘草苷和甘草酸铵的对照品储备液；然后分别精密吸取特女贞苷、甘草苷和甘草酸铵的对照品溶液适量，加甲醇定容至20ml，制成特女贞苷、甘草苷和甘草酸铵的混合对照品溶液；步骤3、分别精密吸取步骤1的甘草汁炙女贞子供试品溶液和步骤2的混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪，记录色谱图；步骤4，将步骤3中获得的甘草汁炙女贞子供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A；选择不同批次的甘草汁炙的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成甘草汁炙女贞子的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分。 2.根据权利要求1所述的一种甘草汁炙女贞子的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤1、甘草汁炙女贞子供试品溶液的制备方法为：取甘草待用，用水浸泡1h，煎煮2次，每次30min，滤过，合并滤液，浓缩得甘草汁待用；取生女贞子饮片待用，取适量甘草汁闷润3h，120℃下炒制8min得甘草汁炙女贞子样品待用；取甘草汁炙女贞子打粉，精密称取过4号筛，取粉末1.0g，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，称定质量，超声提取30min，室温放置，再称定质量，用甲醇补足失重，12000r/min离心3min，取上清液，过0.45μm有机微孔滤膜，即得甘草汁炙女贞子供试品溶液。 3.根据权利要求1所述的一种甘草汁炙女贞子的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤2、混合对照品溶液的制备：分别取特女贞苷、甘草苷和甘草酸铵对照品适量，精密称定，置于10ml容量瓶中，加甲醇配成浓度分别为290μg/ml、312μg/ml和288μg/ml的特女贞苷、甘草苷和甘草酸铵对照品储备液；然后分别精密取特女贞苷、甘草苷和甘草酸铵对照品溶液适量，加甲醇定容至20ml，制成每1ml含特女贞苷14.5μg、甘草苷15.6μg和甘草酸铵14.4μg的混合对照品溶液。 4.根据权利要求1所述的一种甘草汁炙女贞子的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤3、高效液相色谱仪检测的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.2％磷酸水作为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱，流速为0.5～1.5ml·min-1，柱温25～40℃，检测波长200～360nm。 5.根据权利要求4所述的一种甘草汁炙女贞子的指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤3高效液相色谱仪检测的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以0.2％磷酸水作为流动相A，以乙腈为流动相B，梯度洗脱，流速为0.8ml·min-1，柱温30℃，检测波长254nm。 6.根据权利要求4或5所述的一种甘草汁炙女贞子的指纹图谱检测方法，其特征在于，梯度洗脱如下表：时间/min 流动相A体积百分比流动相B体积百分比 0 95 5 20 90 10 40 83 17 55 75 25 95 65 35 105 0 100 。 7.根据权利要求4所述的一种甘草汁炙女贞子的指纹图谱检测方法，其特征在于，色谱柱为色谱柱为11 STAR LP RP-18 endcapped，规格为4.6*250mm，5μm。 8.根据权利要求1所述的一种甘草汁炙女贞子的指纹图谱检测方法，其特征在于，得到的甘草汁炙女贞子指纹图谱中有6个共有峰，各共有峰的保留时间分别为：共有峰1，保留时间为52.914min；共有峰2，保留时间为57.919min；共有峰3，保留时间为71.147min；共有峰4，保留时间为76.014min；共有峰5，保留时间为81.031min；共有峰6，保留时间为103.046min。 9.根据权利要求8所述的一种甘草汁炙女贞子的指纹图谱检测方法，其特征在于，其中，1号峰为甘草苷，2号峰为特女贞苷，6号峰为甘草酸铵。
所属类别：	发明专利