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原文传递一种鉴定桑叶是否经霜的检测方法

专利名称：	一种鉴定桑叶是否经霜的检测方法
摘要：	本发明利用非靶向植物代谢组学技术结合正交信号校正偏最小二乘判别分析区分经霜和未经霜桑叶的方法。具体提供一种鉴定桑叶是否经霜的检测方法，其特征在于：通过下述差异性标志物的相对比值之一种或多种来判别：枸橼酸衍生物/绿原酸、桑皮苷F/绿原酸、和色氨酸/绿原酸。采用本发明的分析方法能够有效区分霜桑叶和桑叶，直观的判别其分类情况，快速、准确地获得了可区分两者的差异性标志物，检测结果准确可靠。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东省中医药研究院
发明人：	郭威;王亮;曲永胜;邹文
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-04T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-12T00:00:00+0800
申请号：	CN201910161860.6
公开号：	CN110007017A
代理机构：	北京知本村知识产权代理事务所
代理人：	刘江良
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	250014 山东省济南市历下区燕子山西路7号
主权项：	1.一种鉴定桑叶是否经霜的检测方法，其特征在于：通过下述差异性标志物的相对比值之一种或多种来判别：枸橼酸衍生物/绿原酸、桑皮苷F/绿原酸、和色氨酸/绿原酸。 2.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：其中的标志物是通过非靶向植物代谢组学技术结合OPLS进行测定。 3.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于：所述比值是对待测样品进行高效液相色谱-质谱后的图谱的峰面积比值。 4.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于：经霜前枸橼酸衍生物/绿原酸，桑皮苷F/绿原酸和色氨酸/绿原酸图谱的峰面积比值均低于0.3，优选地低于0.15。 5.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于：经霜后枸橼酸衍生物/绿原酸图谱的峰面积比值均高于0.8，优选高于1.0，桑皮苷F/绿原酸图谱的峰面积比值均高于0.6，优选高于0.9，色氨酸/绿原酸图谱的峰面积比值均高于0.6，优选高于0.8。 6.如权利要求3所述的检测方法，其特征在于：色谱柱采用Agilent Zorbax SB-C18，规格为250 mm×4.6 mm，5 μm；流动相：乙腈（A）-0.1%甲酸（B），梯度洗脱；检测波长320 nm；柱温30 ℃；流速1.0 mL·min-1；进样量10 μL。 7.如权利要求6所述的检测方法，其特征在于：所述梯度洗脱为：0~10 min，5%~10%A；10~15 min，10%A；15~25 min，10%A~15%A；25~40 min，15%A；40~45 min，15%~18%A；45~70 min，18%A；70~100 min，18%~100%A；100~108 min，100%A；108~116 min，5%A。 8.如权利要求7所述的检测方法，其特征在于：质谱条件采用电喷雾离子源；扫描级数5级；扫描范围：50～1000 m/z；扫描速度26000 m/z·s-1；喷雾气压力35 psi；干燥气温度350 ℃；干燥气流速9 L·min-1；毛细管电压4000 V，分流比4∶1。 9.如权利要求2至8任一项所述的检测方法：在进行色谱之前进行前期处理：将桑叶或桑叶饮片粉碎，过筛，加热回流，冷却至室温，过滤备用。 10.一种区分经霜和未经霜桑叶的方法，其特征在于：将经霜和未经霜桑叶分别进行前处理后，应用高效液相色谱-质谱方法实现对桑叶经霜过程中代谢组学的测定与分析，然后应用正交偏最小二乘-判别分析模型区分经霜和未经霜桑叶，并利用S-plot图和变量权重重要性排序预测值分布图辨别影响较大的化合物，最后通过质谱对筛选到的标志物进行指认，优选地，所述前处理是将桑叶或桑叶饮片粉碎，过筛，加热回流，冷却至室温，过滤后用于高效液相色谱-质谱分析。
所属类别：	发明专利