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原文传递一种生物制品中游离蛋白含量的高效液相测定方法

专利名称：	一种生物制品中游离蛋白含量的高效液相测定方法
摘要：	本发明属于游离蛋白含量的检测领域，特别公开一种生物制品中游离蛋白含量的高效液相测定方法，包括色谱条件：色谱柱SRT SEC系列分析柱或TSKgel G3000SW分析柱，柱温4‑30℃，流动相0.2M氯化钠溶液，流速0.2‑1.0mL/min，pH 6.8‑7.2，检测波长280nm；样品溶液的配制：取待测样品适量，用流动相稀释，得到进样样品；含量测定：将进样样品注入高效液相色谱仪，记录色谱图，并计算测量结果。本发明能够精确测定出结合疫苗中游离的CRM197蛋白的含量，保证了结合疫苗的有效性和安全性，具有成本低廉、精确度高、重复性好、检测简便快捷、便于被广泛推广和应用的特点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	艾美卫信生物药业(浙江)有限公司
发明人：	曹方;马伟;李强
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-15T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910300815.4
公开号：	CN110018253A
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	315609 浙江省宁波市宁海县科技工业园区竹泉路29号
主权项：	1.一种生物制品中游离蛋白含量的高效液相测定方法，其特征在于，包括以下步骤： ①、色谱条件：色谱柱为SRT SEC系列分析柱或TSKgelG3000SW分析柱，柱温为4-30℃，流动相为0.2M氯化钠溶液，流速为0.2-1.0mL/min，pH为6.8-7.2，检测波长为280nm； ②、样品溶液的配制：取待测样品适量，用流动相稀释待测样品，得到进样样品； ③、含量测定：将进样样品注入高效液相色谱仪，记录色谱图，根据面积归一法计算测量结果。 2.根据权利要求1所述的一种生物制品中游离蛋白含量的高效液相测定方法，其特征在于，步骤①中，所述SRT SEC系列分析柱为SRT SEC-300分析柱，所述TSKgelG3000SW分析柱的规格为7.5mm×600mm。 3.根据权利要求1所述的一种生物制品中游离蛋白含量的高效液相测定方法，其特征在于，步骤①中，所述柱温为20-26℃。 4.根据权利要求3所述的一种生物制品中游离蛋白含量的高效液相测定方法，其特征在于，步骤①中，所述柱温为23±1℃。 5.根据权利要求1所述的一种生物制品中游离蛋白含量的高效液相测定方法，其特征在于，步骤①中，所述流速为0.4-0.75mL/min。 6.根据权利要求5所述的一种生物制品中游离蛋白含量的高效液相测定方法，其特征在于，步骤①中，所述流速为0.5mL/min。 7.根据权利要求1所述的一种生物制品中游离蛋白含量的高效液相测定方法，其特征在于，步骤①中，所述pH为7.0±0.02。 8.根据权利要求1所述的一种生物制品中游离蛋白含量的高效液相测定方法，其特征在于，步骤②中，所述进样样品中总蛋白含量为＞12.5μg。 9.根据权利要求8所述的一种生物制品中游离蛋白含量的高效液相测定方法，其特征在于，步骤②中，所述进样样品中总蛋白含量为20-50μg。 10.根据权利要求1所述的一种生物制品中游离蛋白含量的高效液相测定方法，其特征在于，适用于结合疫苗中游离CRM197蛋白的含量测定。
所属类别：	发明专利