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原文传递一种A组轮状病毒抗原检测试纸条、试剂盒及其制备方法

专利名称：	一种A组轮状病毒抗原检测试纸条、试剂盒及其制备方法
摘要：	本发明公开了一种A组轮状病毒抗原检测试纸条、试剂盒及其制备方法，其中A组轮状病毒抗原试纸条，包括通过将包被有抗A组轮状病毒检测抗体的硝酸纤维素膜、包被有抗A组轮状病毒免疫标记抗体的免疫结合垫、样品垫、吸水纸依次贴附到聚氯乙烯底板制得；该试纸条可通过检测标记物的方法检测待检样品中是否存在A组轮状病毒抗原；该试纸条和包括有该试纸条的检测卡可特异快速地进行A组轮状病毒早期感染的检测与诊断，减低成本，快速检测，满足临床使用的需要。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏硕世生物科技股份有限公司
发明人：	杨标;金巍;刘中华;王国强
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-10T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910284036.X
公开号：	CN110018313A
代理机构：	南京苏科专利代理有限责任公司
代理人：	徐振兴;姚姣阳
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	225300 江苏省泰州市医药高新区药城大道1号G19三楼
主权项：	1.一种A组轮状病毒抗原试纸条的制备方法,其特征在于,包括以下步骤： a.碳酸钾调节胶体金的pH至预定值，依次加入A组轮状病毒抗体、牛血清白蛋白溶液，离心得到沉淀，重悬液重悬沉淀得到A组轮状病毒抗体免疫金； b.用包被液稀释A组轮状病毒抗体得到抗A组轮状病毒抗体检测线工作液；用包被液稀释羊抗鼠IgG多抗得到质控线工作液； c.用步骤a得到的所述A组轮状病毒抗体免疫金对结合垫喷金得到免疫结合垫，用步骤b得到的所述抗A组轮状病毒抗体检测线工作液、羊抗鼠IgG多抗质控线工作液分别在硝酸纤维素膜上划线； d.将步骤c得到的膜置于室温，湿度≤30%条件下干燥后取出粘贴于聚氯乙烯底板上得到贴膜的聚氯乙烯底板； e.将样品垫、免疫结合垫、贴膜的聚氯乙烯底板和吸水纸从上至下组装在一起得到A组轮状病毒抗原检测试纸条。 2.根据权利要求1所述的A组轮状病毒抗原试纸条的制备方法，其特征在于：步骤a所述的具体步骤是将胶体金中加入0.2M碳酸钾，混匀调节pH，然后加入A组轮状病毒抗体混匀后静置30min，再加入10%牛血清白蛋白溶液，混匀静置30min，在4℃、转速为8000g的条件下离心30min得到沉淀，沉淀用所述重悬液重悬至离心前总体积的1/3。 3.根据权利要求1或2所述的A组轮状病毒抗原试纸条的制备方法，其特征在于：步骤a中所述的碳酸钾为0.2M碳酸钾溶液，碳酸钾溶液体积与胶体金溶液体积比例为：1-10uL：1ml；所述牛血清白蛋白溶液浓度为10%，牛血清白蛋白溶液的加入体积为胶体金体积的1/10-1/100。 4.根据权利要求1或2所述的A组轮状病毒抗原试纸条的制备方法，其特征在于：所述重悬液的制备方法为将1g BSA、0.5g 聚乙烯吡咯烷酮、2g 海藻糖以及4g 蔗糖溶解到pH值为8.5的 0.1M 三羟甲基氨基甲烷溶液并定容到100mL。 5.根据权利要求1所述的A组轮状病毒抗原试纸条的制备方法，其特征在于：步骤b中，所述的包被液为海藻糖溶于pH7-8的0.01M磷酸盐缓冲液，所述海藻糖与定容后总体积比例为0.2g：10mL。 6.所述抗A组轮状病毒抗体检测线工作液中抗体浓度为1.0mg/mL；所述羊抗鼠IgG多抗的质控线工作液中抗体浓度为1.0mg/mL。 7.根据权利要求1所述的A组轮状病毒抗原试纸条的制备方法，其特征在于：步骤c中所述喷金划膜过程通过喷金划膜设备实现；所述免疫结合垫采用玻璃纤维膜。 8.根据权利要求1所述的A组轮状病毒抗原试纸条的制备方法，其特征在于：步骤d中所述样品垫采用玻璃纤维膜，在使用前用样品垫处理液对所述样品垫浸泡后置于室温，湿度≤30%条件下干燥，其中所述样品垫处理液是将0.5酪蛋白、0.5g 表面活性剂S9、1mL吐温-20，溶解到pH值为8.5的0.15M 三羟甲基氨基甲烷溶液并定容到100mL。 9.一种A组轮状病毒抗原检测卡的制备方法，其特征在于：将权利要求1步骤e获得的A组轮状病毒抗原检测试纸条置入塑料外壳中，其中，塑料外壳的加样孔在样品垫上方，塑料外壳的观察窗在检测线T和质控线C上方,加样孔和观察窗上方无遮挡物。 10.一种A组轮状病毒抗原试剂盒的制备方法，其特征在于：将权利要求9中获得的A组轮状病毒抗原检测卡装入铝箔袋，与采样吸管、说明书装盒组成A组轮状病毒抗原检测试剂盒。 11.一种A组轮状病毒抗原试纸条,试纸条自上而下依次由样品垫（1）、免疫结合垫（2）、硝酸纤维素膜（3）和吸水垫（6）粘贴于聚氯乙烯底板（7）上组成，其中，所述免疫结合垫上包被有标记胶体金的A组轮状病毒抗体，硝酸纤维素膜设有检测线T和控制线C，检测线包被了抗A组轮状病毒单克隆抗体，控制线包被了羊抗鼠IgG多抗。 12.一种A组轮状病毒抗原检测卡，包括装有权利要求11所述试纸条的塑料外壳（8），其中塑料外壳设有加样孔（9）和观察窗（10），加样孔在样品垫上方，观察窗在检测线T和质控线C上方。 13.一种A组轮状病毒抗原检测试剂盒，将权利要求12所述检测卡和采样吸管、说明书装盒得到试剂盒。
所属类别：	发明专利