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一种轮状病毒Elisa检测方法及其试剂盒
| 专利名称： | 一种轮状病毒Elisa检测方法及其试剂盒 |
| 摘要： | 本发明涉及一种可以一次性检测A‑C三种基因型轮状病毒的Elisa检测试剂盒，及检测方法。本发明所的试剂盒中含有能够与A‑C三型轮状病毒抗体结合的VP4衍生抗原片段。实验证明，本发明的试剂盒操作简单、快速、敏感性高、特异性强、实验设备要求简单、应用范围广泛；能够解决临床上轮状病毒防治痛点。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 申请人： | 牡丹江医学院 |
| 发明人： | 修云霞;于琦;张洋;沈聪;任春娜;刘婵娟 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 1900-01-20T21:00:00+0805 |
| 发布日期： | 1900-01-20T19:00:00+0805 |
| 申请号： | CN202010068082.9 |
| 公开号： | CN111175502A |
| 代理机构： | 北京辰权知识产权代理有限公司 |
| 代理人： | 董李欣 |
| 分类号： | G01N33/569;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/569 |
| 申请人地址： | 157011 黑龙江省牡丹江市牡丹江医学院附属第二医院 |
| 主权项： | 1.一种轮状病毒VP4抗原衍生片段，其特征在于：所述片段的氨基酸序列如SEQ IDNO.1所示。 2.一种轮状病毒Elisa检测试试剂盒，所述试剂盒包括：酶标板、VP4抗原片段溶液、酶标二抗、洗涤液、PBST封闭液、包含TMB的底物溶液、反应终止液。 3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中，VP4抗原片段为其衍生片段，序列如SEQID NO.1所示溶；酶标二抗为羊抗人IgG抗体和酶标羊抗人IgA抗体混合溶液。 4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中，VP4抗原衍生片段溶液浓度为2ug/ml，抗体混合溶液中抗体总浓度为3ug/ml、两种抗体比例为1:1；所述PBST封闭液含有3％的BSA；所述酶为HRP。 5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于：所述反应终止液为H2SO4，浓度为2mol/L；所述洗涤液为含有0.05％Tween20的PBS，PH值为7.4。 6.一种检测A-C型轮状病毒感染的方法，所述方法包括如下步骤： (1)将VP4抗原衍生片段溶液包被酶标板(100ul/孔)，洗涤液洗板3-5次，封闭液封闭，200ul/孔，37℃；洗板3-5次，拍干； (2)取粪便样品，1:1000倍稀释，取稀释液加入包被好的酶标板中，200ul/孔，37℃孵育1.5-3h后，洗板3-5次； (3)加入HRP标记的抗体混合溶液，100ul/孔，37℃孵育0.5-2h；洗板3-5次，拍干； (4)加入TMB底物溶液显色，100ul/孔，3-10min；终止液终止反应，观察每孔颜色； (5)判定：基本颜色为无色判定为阴性，颜色呈黄色则判定为阳性。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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