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分离测定N-琥珀酰色氨酸对映异构体的液相色谱方法
| 专利名称： | 分离测定N-琥珀酰色氨酸对映异构体的液相色谱方法 |
| 摘要： | 本发明涉及一种分离测定N‑琥珀酰色氨酸对映异构体的液相色谱方法，现有的检测方法效率较低，准确度较差。本发明是采用蛋白键合型手性色谱柱，其主要包括以乙酸铵‑乙腈为流动相，对N‑琥珀酰‑色氨酸对映异构体进行分离测定。本发明N‑琥珀酰色氨酸对映异构体的高效液相分离检测方法，能够有效分离和测定N‑琥珀酰色氨酸对映异构体，专属性强，准确度高，可用于N‑琥珀酰色氨酸对映异构体的定性和定量。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 浙江;33 |
| 申请人： | 浙江工业大学 |
| 发明人： | 彭青;吴黎诚;储消和;生英涛;余炜;方明山 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2018-12-29T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-07-19T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201811629727.0 |
| 公开号： | CN110031583A |
| 代理机构： | 杭州赛科专利代理事务所(普通合伙) |
| 代理人： | 尹建民 |
| 分类号： | G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30 |
| 申请人地址： | 310014 浙江省杭州市下城区潮王路18号 |
| 主权项： | 1.分离测定N-琥珀酰色氨酸对映异构体的液相色谱方法，其特征在于采用蛋白键合型手性色谱柱，其主要包括以乙酸铵-乙腈为流动相，对N-琥珀酰-色氨酸对映异构体进行分离测定。 2.根据权利要求书1所述的分离测定N-琥珀酰色氨酸对映异构体的液相色谱方法，其特征在于所述蛋白键合型手性色谱柱为CHIRALPAK HAS，其中键合的蛋白为人血清白蛋白。 3.根据权利要求书1或2所述的分离测定N-琥珀酰色氨酸对映异构体的液相色谱方法，其特征在于所述的乙酸氨的浓度为30～50mM。 4.根据权利要求书3所述的分离测定N-琥珀酰色氨酸对映异构体的液相色谱方法，其特征在于所述的乙酸氨的浓度为50mM。 5.根据权利要求书1所述的分离测定N-琥珀酰色氨酸对映异构体的液相色谱方法，其特征在于所述的乙酸铵与乙腈的体积比为85:15。 6.根据权利要求书1所述的分离测定N-琥珀酰色氨酸对映异构体的液相色谱方法，其特征在于，该方法中所述流动相流速为0.5～0.7ml/min。 7.根据权利要求书1所述的分离测定N-琥珀酰色氨酸对映异构体的液相色谱方法，其特征在于，该方法中所述色谱条件中色谱柱温为25～30℃。 8.根据权利要求书1所述的分离测定N-琥珀酰色氨酸对映异构体的液相色谱方法，其特征在于，该方法中所述流动相流速为0.6ml/min，所述色谱条件中色谱柱温为30℃。 9.根据权利要求书1所述的分离测定N-琥珀酰色氨酸对映异构体的液相色谱方法，其特征在于检测器是采用紫外检测器，检测波长为280nm。 10.如权利要求书1中所述的分离测定N-琥珀酰色氨酸对映异构体的液相色谱方法，其特征在于具体步骤如下： 步骤一：溶液配制 称取N-琥珀酰色氨酸对映异构体适量，置于烧杯，用稀释液(15％乙腈+85％50mM乙酸铵)超声溶解，转入容量瓶，再用稀释液定容至相应刻度，摇匀，即得； 步骤二：测定 自动进样器进样10μL注入液相色谱仪，记录色谱图至主峰保留时间的1.5倍。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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