详情

原文传递一种用于免疫分析的微尺度磁富集检测装置及检测方法

专利名称：	一种用于免疫分析的微尺度磁富集检测装置及检测方法
摘要：	本发明涉及一种用于免疫分析的微尺度磁富集检测装置及其检测方法。所述检测装置，包括微流控芯片，所述微流控芯片包括至少一条微通道，所述微通道包括用于加入磁性免疫复合物与酶底物的样品池、检测区和出样口；所述磁性免疫复合物为生物样品通过特异性免疫反应与磁珠及酶相连形成；还包括磁铁，所述磁铁设置在检测区的上方；本发明还提供一种使用该装置的检测方法。通过本发明的微尺度磁富集原位检测方法，将用于免疫分析的样品富集在微流控通道的检测区中，并利用微尺度下报告分子快速传质的特性，降低目标样品检出限两个数量级以上。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	中山大学
发明人：	李攻科;董建伟;杨佳妮;夏凌
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-06T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910371420.3
公开号：	CN110031622A
代理机构：	广州骏思知识产权代理有限公司
代理人：	卢娟
分类号：	G01N33/535(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	510275 广东省广州市海珠区新港西路135号
主权项：	1.一种用于免疫分析的微尺度磁富集检测装置，包括微流控芯片，其特征在于：所述微流控芯片包括至少一条微通道，所述微通道呈“一”字型且在芯片上平行排列，所述微通道包括用于加入磁性免疫复合物与酶底物的样品池、检测区和出样口；所述磁性免疫复合物为样品通过特异性免疫反应与磁珠及酶相连形成；还包括磁铁，所述磁铁设置在检测区的上方；注射泵，所述注射泵与出样口连接。 2.根据权利要求1所述的一种用于免疫分析的微尺度磁富集检测装置，其特征在于：所述芯片材料为聚二甲基硅氧烷(PDMS)、环烯烃共聚物(COC)、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)或玻璃中的任意一种。 3.根据权利要求1所述的一种用于免疫分析的微尺度磁富集检测装置，其特征在于：所述芯片上平行排列4-8条所述微通道，用于4-8个样品的同时测定。 4.根据权利要求1所述的一种用于免疫分析的微尺度磁富集检测装置，其特征在于：所述微通道的宽度为50-500μm，长度为10-40mm，深度为10-100μm；所述样品池直径为2-5mm，检测区长度为0.1-2mm，出样口直径为0.8-1.5mm。 5.根据权利要求1所述的一种用于免疫分析的微尺度磁富集检测装置，其特征在于：所述磁铁为钕铁硼磁铁，长度为20-40mm，宽度为5-20mm，高度为1-4mm。 6.根据权利要求1所述的一种用于免疫分析的微尺度磁富集检测装置，其特征在于：所述微通道出样口与注射泵用聚四氟乙烯或硅胶毛细管连接。 7.根据权利要求1所述的一种用于免疫分析的微尺度磁富集检测装置，其特征在于：所述免疫分析对象类型为蛋白质、外泌体和细胞；所述磁珠粒径范围为300nm-6.5μm；所述酶为辣根过氧化物酶、葡萄糖氧化酶或碱性磷酸酶中的一种；所述酶底物为10-乙酰基-3,7-二羟基吩噁嗪(Amplex Red)、3,3’,5,5’-四甲基联苯胺(TMB)、2,2-联氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、邻苯二胺(OPD)或荧光素二磷酸(FDP)中的一种。 8.一种用于免疫分析的微尺度磁富集检测方法，其特征在于：包括如下步骤， 1)、固载有抗体的磁珠通过特异性免疫反应与样品中的待测抗原结合； 2)、被吸附在磁珠表面的抗原与酶标抗体通过特异性免疫反应形成磁性免疫复合物； 3)、将磁性免疫复合物与酶底物混合均匀，加入权利要求1所述的微通道一端的样品池中； 4)、开启注射泵，采用抽取模式将样品引入微通道； 5)、进样完毕后，用胶带封住样品池和出样口，在磁铁下方的检测区拍照记录报告分子随时间的变化规律。 9.根据权利要求8所述的一种用于免疫分析的微尺度磁富集检测方法，其特征在于：所述样品体积为1-100μL；所述的进样流速度为5-30μL/min。
所属类别：	发明专利