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原文传递一种基于NiCo2O4纳米片的热致增敏型甲状腺球蛋白电致化学发光免疫器

专利名称：	一种基于NiCo2O4纳米片的热致增敏型甲状腺球蛋白电致化学发光免疫器
摘要：	本发明公开一种基于NiCo2O4纳米片的热致增敏型甲状腺球蛋白电致化学发光免疫器，特点是以单壁碳纳米管（SWCNTs）为导电载体负载pNiCo2O4 NSs制得到双功能催化剂pNiCo2O4 NSs/SWCNTs，其具有优异的析氧反应（OER）催化性能，增加溶液中氧气的浓度，从而提高luminol的发光强度。而且pNiCo2O4 NSs/SWCNTs具有优异的光热性能，能够有效地将808 nm激光转化为热，提高电极表面温度，进而在电极表面形成温度梯度层，加快电活性物质向电极表面的扩散速度，进一步增强luminol的发光信号。本发明具有灵敏度高、线性范围宽、特异性强等优点，可用于甲状腺球蛋白（Tg）的检测，在临床应用方面具有较为重要的价值和实际意义。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	福建;35
申请人：	福建师范大学
发明人：	戴宏;房丹丹;李佳宁;高利红;张书培;衣欢;郑祥钦;颜建英
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-18T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201910415731.5
公开号：	CN110031529A
代理机构：	福州智理专利代理有限公司
代理人：	王义星
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	350108 福建省福州市闽侯县上街镇学园路福建师大旗山校区福建师大科研处
主权项：	1.一种基于NiCo2O4纳米片的热致增敏型甲状腺球蛋白电致化学发光免疫器，其特征在于，包括以下步骤：（1）玻碳电极（GCE）首先在铺有氧化铝粉末的麂皮上机械打磨抛光，用二次水洗去表面残留粉末，再移入超声水浴中清洗，直至清洗干净，最后依次用乙醇，稀酸和水彻底洗涤；（2）滴加3 uL 浓度为 4 mg/mL的氨基功能化的pNiCo2O4 NSs/SWCNTs 悬浮液于干净的玻碳电极表面，红外灯下烘干，冷却至室温，制得pNiCo2O4 NSs /SWCNTs修饰电极；（3）滴加3 uL 1 wt.% 戊二醛于步骤（2）所制得的电极界面，室温下反应40 min；（4）滴加3 uL 浓度为50 ng/mL 的甲状腺球蛋白抗体（Ab）于步骤（3）修饰电极表面，室温下孵育40 min，用去离子水洗去物理吸附，制得Ab/pNiCo2O4 NSs/SWCNTs修饰电极；（5）滴加 3 uL 1.0 wt.%的BSA溶液到步骤（4）修饰电极界面，室温下孵育40 min，以封闭电极表面上非特异性活性位点，用去离子水冲洗电极表面洗去物理吸附，并保存在4°C冰箱中备用；（6）将步骤（5）所获得的修饰电极浸入到不同浓度的甲状腺球蛋白 (Tg）标准溶液中并在室温下反应50 min，用去离子水冲洗电极表面，制得Tg/Ab/pNiCo2O4 NSs/SWCNTs修饰电极，并保存在4°C冰箱中备用。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的氨基功能化的pNiCo2O4 NSs/SWCNTs悬浮液由下述方法制备的：1）pNiCo2O4 NSs材料由下述方法制备的：用100 mL乙醇和200 mL去离子水配制成含有10 mM的Co(NO3)2·6H2O、5 mM Ni(NO3)2·6H2O和22.5 mM六亚甲基四胺的混合溶液，接着将该混合液转入500 mL聚四氟乙烯反应釜内衬中，150 °C下磁力搅拌12 h，冷却至室温，离心，洗涤，在烘箱中60 °C干燥一夜，最后，在空气中350 °C下煅烧2 h得到最终产物pNiCo2O4 NSs；2）200 μL 浓度为 4 mg/mL的 pNiCo2O4 NSs溶液与 200 μL浓度为 5 mg/mL 的单壁碳纳米管（SWCNTs）溶液超声混合均匀，室温下搅拌12 h，得到pNiCo2O4 NSs/SWCNTs悬浮液；接着，向该溶液中加入100 μL 浓度为 10 mM 的3-氨丙基三乙氧基硅烷（APTES），室温下振荡 6 h，离心、洗涤，得到氨基功能化的pNiCo2O4 NSs/SWCNTs悬浮液并保存在4°C冰箱中备用。 3.根据权利要求1-2任一所述的方法制备的一种基于NiCo2O4纳米片的热致增敏型甲状腺球蛋白电致化学发光免疫器。 4.权利要求3所述的一种基于NiCo2O4纳米片的热致增敏型甲状腺球蛋白电致化学发光免疫器，其特征在于，用于甲状腺球蛋白（Tg）检测，检测步骤如下：（1）使用电化学工作站采用三电极体系进行测定，以权利要求3所述的一种基于NiCo2O4纳米片的热致增敏型甲状腺球蛋白电致化学发光免疫器为工作电极，Ag/AgCl为参比电极，铂丝电极为辅助电极，在0.1 mol/mL pH 9.0的 PBS缓冲溶液中进行测试；（2）采用电位范围0 ~ -1 V，扫描速率0.1 V/s电位窗口，电致化学发光设备光电倍增管800 V对不同浓度的甲状腺球蛋白（Tg）标准溶液进行检测，通过电致化学发光设备采集-0.5 V的ECL信号强度，通过ECL信号强度与甲状腺球蛋白（Tg）标准溶液浓度之间的关系，绘制工作曲线；（3）待测样品溶液代替甲状腺球蛋白（Tg）标准溶液进行检测，检测的结果可通过工作曲线查得。
所属类别：	发明专利