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原文传递一种对多种目标物同时检测的方法

专利名称：	一种对多种目标物同时检测的方法
摘要：	本发明涉及抗生素的检测，具体的说是一种对多种目标物同时检测的方法。通过构建“OR”或“INHIBIT”逻辑操作，以待检测目标物的核酸适体为识别分子，通过酶催化底物产生电位信号指示离子，采用脉冲恒电流控制的计时电位分析技术实现对多种目标物的同时检测。本发明方法具有一定的通用性，可以通过改变识别分子的适体序列实现对不同目标物的检测。在检测过程中亦可以利用含有离子交换剂的敏感膜，通过测定电极的开路电位实现多种物质的检测。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	中国科学院烟台海岸带研究所
发明人：	丁家旺;刘淑文;秦伟
专利状态：	有效
申请日期：	2018-01-11T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-19T00:00:00+0800
申请号：	CN201810026287.3
公开号：	CN110031530A
代理机构：	沈阳科苑专利商标代理有限公司
代理人：	李颖;周秀梅
分类号：	G01N27/416(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	264003 山东省烟台市莱山区春晖路17号
主权项：	1.一种对多种目标物同时检测的方法，其特征在于：通过构建“OR”或“INHIBIT”逻辑操作，以待检测目标物的核酸适体为识别分子，通过酶催化底物产生电位信号指示离子，采用脉冲恒电流控制的计时电位分析技术实现对多种目标物的同时检测。 2.按权利要求1所述的对多种目标物同时检测的方法，其特征在于：所述“OR”逻辑操作中，以待测目标物作为输入信号，不同待测目标物产生的电位响应作为对应的输出信号；所述“INHIBIT”逻辑操作，以不同待测目标物以及其特异性识适体分别作为输入信号，各输入信号产生的电位响应为输出信号。 3.按权利要求1或2所述的对多种目标物同时检测方法，其特征在于：所述计时电位分析为以聚合物膜离子选择性电极为工作电极，采用工作电极、对电极及参比电极的三电极体系对酶催化底物产生的指示离子进行检测，得出指示离子电位响应值即可实现对待测目标物的定性检测；再根据上述产生的指示离子电位响应值与酶催化前产生的初始电位之间的差值，即可实现对待测目标物的定量检测。 4.按权利要求1或2所述的对多种目标物同时检测方法，其特征在于：所述识别分子是与待测目标物特异性结合的序列；所述待测目标物为抗生素、细菌、蛋白、细胞、病毒、重金属离子、氨基酸、农药、藻毒素或有机小分子。 5.按权利要求1所述的对多种目标物同时检测方法，其特征在于：所述底物为2,2′-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、鲁米诺、3,3,′5,5′-四甲基联苯胺、邻氨基苯酚、吲哚-3-乙酸或邻苯二胺，苯胺、联苯胺、四甲基联苯胺、邻联茴香胺、二氨基联苯胺、对茴香胺、间茴香胺、邻茴香胺、甲苯胺、氯苯胺、氟苯胺、二甲基联苯胺、4,4’-亚甲基双邻氯苯胺、对氨基偶氮苯、萘胺、硝基萘胺、对乙氧基苯胺、邻苯二胺、间苯二胺、对苯二胺、N-苯基对苯二胺、联大茴香胺、邻联甲苯胺、三甲基苯胺、氨基苯甲酸、氨基比林、氨基安替吡啉、氨基芴，苯酚、邻苯二酚、间苯二酚、对苯二酚、对苯氧基苯酚、对羟基联苯、甲氧基苯酚、甲基苯酚、氯苯酚、二甲基苯酚、二氯苯酚、对羟基苯甲酸、氯萘酚、抗坏血酸、多巴胺、对叔丁基儿茶酚、对乙酰氨基酚、酪氨酸、咖啡酸、儿茶酚、儿茶酚紫、铬黑T、酸性铬蓝K、偶氮染料、隐性亮绿或溴邻苯三酚。 6.按权利要求1所述的对多种物质同时检测的方法，其特征在于：所述酶为辣根过氧化物酶、碱性磷酸脂酶、大豆过氧化物酶、丁酰胆碱酯酶、尿酶、β-半乳糖苷酶、漆酶、胆红素氧化酶、多酚氧化酶、酪氨酸酶或G-四联体功能酶。 7.按权利要求3所述的对多种目标物同时检测方法，其特征在于：所述酶催化前产生的初始电位是采用恒电流和恒电位相结合的方式检测获得，将工作电极，对电极及参比电极的三电极体系插入Tris-HCl背景溶液中，在零电流情况下，获得其开路电位，然后对工作电极施加恒定的阴极脉冲电流，通过计时电位响应，得到初始电位。 8.按权利要求3所述的对多种目标物同时检测方法，其特征在于：所述指示离子电位响应值是将酶以及底物的混合溶液加入到Tris-HCl背景溶液中，采用恒电流和恒电位相结合的方式，得酶催化底物产生指示离子的电位响应值。 9.按权利要求1所述的对多种目标物同时检测方法，其特征在于：所述工作电极为粘附有聚合物膜的离子选择性电极。 10.按权利要求1-9所述任意一项对多种目标物同时检测方法，其特征在于：所述对工作电极所施加的恒定的阴极脉冲电流大小为0.1-10μA，所施加的脉冲电流时间为0.1-10s；每次施加脉冲电流后，通过进一步向电极施加开路电位10-600s，实现电极更新。
所属类别：	发明专利