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原文传递一种基于PtCu RNDFs的电化学传感器的制备方法及应用

专利名称：	一种基于PtCu RNDFs的电化学传感器的制备方法及应用
摘要：	本发明属于免疫分析和生物传感技术领域，提供了一种基于PtCu RNDFs的电化学传感器的制备方法及应用。本发明使用N‑MoS2QDs@MWCNTs作为基底材料，其优良的导电性、大的比表面积和高催化活性可以有效减小背景信号；同时利用PtCuRNDFs与检测抗体孵化作为信号标记以进一步增强电化学传感器的催化性能、放大信号，实现了对黄曲霉毒素的定量检测，具有检测限低，灵敏度高，重复性、选择性和稳定性好等优势，对黄曲霉毒素的检测具有重要的科学意义和应用价值。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东理工大学
发明人：	李月云;禹晓东;贾翌雷;张栓;张春燕;吴张磊;刘尚华
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-23T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-26T00:00:00+0800
申请号：	CN201910329093.5
公开号：	CN110057891A
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	255086 山东省淄博市高新技术开发区高创园A座313室
主权项：	1.一种基于PtCu RNDFs的电化学传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下：（1）将直径为4 mm的玻碳电极用Al2O3抛光粉打磨成镜面，超纯水清洗干净；（2）将6 µL、1.0 ~ 3.0 mg/mL的N-MoS2QDs@MWCNTs溶液滴涂于上述电极表面，室温下晾干，超纯水冲洗电极表面，晾干；（3）继续将6 µL、8 ~ 12 µg/mL的黄曲霉毒素捕获抗体Ab1滴加到电极表面，超纯水冲洗，4 °C冰箱中干燥；（4）继续将3 µL、0.5 ~ 1.5 mg/mL、质量分数为1%的牛血清白蛋白BSA溶液滴加到电极表面，以封闭电极表面上的非特异性活性位点，超纯水冲洗电极表面，除去未结合的BSA，4°C冰箱中晾干；（5）继续滴加6 µL、10 pg/mL ~ 60 ng/mL的一系列不同浓度的黄曲霉毒素抗原溶液，超纯水冲洗电极表面，4 °C冰箱中晾干；（6）继续滴加6 µL、1.5 ~ 3.5 mg/mL的检测抗体孵化物PtCu RNDFs-Ab2溶液于电极表面，置4 ℃冰箱中孵化40 min、超纯水冲洗、晾干，制得一种基于PtCuRNDFs的电化学传感器。 2.如权利要求1所述的一种基于PtCu RNDFs的电化学传感器的制备方法，所述N-MoS2QDs@MWCNTs溶液的制备，其特征在于，步骤如下：（1）N-MoS2QDs的制备分别称取0.2 ~ 0.7 g氯化钼、1.0 ~ 3.0 g硫脲混合均匀，缓慢加入10 mL乙醇并搅拌；完全溶解后继续加入2.0 ~ 4.0 g纳米二氧化硅微球，超声处理30 min后在室温下干燥；后在氩气的保护下，管式炉中650 ℃加热2 ~ 4 h；所得产物用30 mL、5 mol/L的氢氧化钠刻蚀24 h，超纯水离心清洗三次，制得N-MoS2；在200 mL N，N-二甲基甲酰胺中加入上述制备的N-MoS2 100 mg，冰水浴中超声3 h，在3000 rpm下离心10 min，制得N-MoS2QDs；（2）N-MoS2QDs@MWCNTs的制备在25 mL、1 mg/mL的羧基化多壁碳纳米管中加入10 ~ 30 mL N-MoS2QDs，超声分散均匀后搅拌4 h，超纯水离心清洗三次，在60 ℃下真空干燥10 h，制得N-MoS2QDs@MWCNTs。 3.如权利要求1所述的一种基于PtCu RNDFs的电化学传感器的制备方法，所述检测抗体孵化物PtCu RNDFs-Ab2溶液的制备，其特征在于，步骤如下：（1）PtCu RNDFs的制备在30.0 ~ 40.0 mL油胺中加入0.25 ~ 0.30 g 十六烷基三甲基氯化铵，混合均匀，再依次加入0.02 ~ 0.04 g二乙酰丙酮铂，0.012 g二水合氯化铜，80 ~ 90 +µL二甘醇胺，超声20 min；转移至聚四氟乙烯内衬不锈钢反应釜，180 ℃下加热反应8 ~ 12 h，所得产物用乙醇/环己烷10:1混合物离心清洗三次，60 ℃下真空干燥，制得PtCuRNDFs; （2）检测抗体孵化物PtCu RNDFs-Ab2溶液的制备将1 ~ 3 mL浓度为2 mg/mL的PtCu RNDFs溶液加入到0.5 ~ 1.5 mL浓度为10 μg/mL的黄曲霉毒素检测抗体溶液Ab2中，4 ℃恒温振荡箱中震荡孵化12 h，离心洗涤，加入1 ~ 3mL、pH = 7.38的磷酸缓冲溶液中，制得检测抗体孵化物PtCuRNDFs-Ab2溶液，4 ℃下保存备用。 4.如权利要求1所述的制备方法制备的一种基于PtCuRNDFs的电化学传感器，用于黄曲霉毒素的检测，步骤如下：（1）使用电化学工作站以三电极体系进行测试，饱和甘汞电极为参比电极，铂丝电极为辅助电极，所制备的传感器为工作电极，在10 mL、含10 mmol/L铁氰化钾溶液中进行测试；（2）用计时电流法对黄曲霉毒素进行检测，选择-0.4 V作为电流测量的检测，输入电压为-0.4 V，取样间隔0.1 s，运行时间300 s；（3）当背景电流趋于稳定后，每隔50 s向10 mL、50 mmol/L的pH = 7.38磷酸盐缓冲溶液中注入10 μL、5 mol/L的双氧水溶液，记录电流变化。 5.如权利要求1、2、3、4所述的黄曲霉毒素，其特征在于，所述黄曲霉毒素选自下列之一：黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素G1。
所属类别：	发明专利