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原文传递一种蔬菜中腐霉利的检测方法

专利名称：	一种蔬菜中腐霉利的检测方法
摘要：	本发明提供了一种蔬菜中腐霉利的检测方法，所述检测方法包括如下步骤：(1)将待测物萃取，得到萃取液；(2)将步骤(1)得到的萃取液中加入脱色剂进行脱色，得到脱色后的溶液；(3)将步骤(2)得到的脱色后的溶液在碱的作用下发生开环反应，得到开环化合物，而后开环化合物在羟胺作用下发生缩合反应，得到异羟肟酸类化合物；(4)将步骤(3)中得到的异羟肟酸类化合物酸化，加入缓冲溶液调pH，而后加入显色剂显色，通过目视比色法检测蔬菜中的腐霉利；该检测方法具有检测方法简单，分析周期短，成本低廉，适用范围广，数据准确性好，可用于腐霉利的检测，满足企业生产的要求。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	无锡中德伯尔生物技术有限公司
发明人：	张文涛;任水英;周丽;邹晓兰;朱华玲;李林
专利状态：	有效
申请日期：	2019-02-27T00:00:00+0800
发布日期：	2019-04-23T00:00:00+0800
申请号：	CN201910144833.8
公开号：	CN109668885A
代理机构：	北京品源专利代理有限公司
代理人：	巩克栋
分类号：	G01N21/78(2006.01);G;G01;G01N;G01N21
申请人地址：	214174 江苏省无锡市惠山经济开发区堰新路311号创业中心三期5号楼
主权项：	1.一种蔬菜中腐霉利的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤： (1)将待测物萃取，得到萃取液； (2)将步骤(1)得到的萃取液中加入脱色剂进行脱色，得到脱色后的溶液； (3)将步骤(2)得到的脱色后的溶液在碱的作用下发生开环反应，得到开环化合物，而后开环化合物在羟胺作用下发生缩合反应，得到异羟肟酸类化合物； (4)将步骤(3)中得到的异羟肟酸类化合物酸化，加入缓冲溶液调pH，而后加入显色剂显色，通过目视比色法检测蔬菜中的腐霉利。 2.根据权利要求1所述蔬菜中腐霉利的检测方法，其特征在于，步骤(1)所述萃取用溶剂为乙腈和饱和盐溶液的混合物；优选地，所述饱和盐溶液为饱和氯化钠溶液和/或饱和氯化钾溶液；优选地，以待测物的质量为1-3g计，所述乙腈的体积为2-6mL；优选地，以待测物的质量为1-3g计，所述饱和盐溶液的体积为0.5-1.5mL；优选地，步骤(1)所述萃取包括先进行涡旋，而后进行离心；优选地，所述涡旋的时间为2-5min；优选地，所述离心的时间为1-3min。 3.根据权利要求1或2所述蔬菜中腐霉利的检测方法，其特征在于，步骤(1)还包括将萃取后的有机液进行清洗；优选地，所述清洗用溶剂为饱和盐溶液；优选地，所述饱和盐溶液为饱和氯化钠溶液和/或饱和氯化钾溶液；优选地，所述清洗的方式包括先将萃取后得到的有机层和饱和盐溶液进行混合，而后进行离心；优选地，所述混合的方式为振荡混合；优选地，所述混合的时间为0.5-1min；优选地，所述离心的时间为1-3min。 4.根据权利要求1-3任一项所述蔬菜中腐霉利的检测方法，其特征在于，步骤(2)所述脱色剂为石墨化炭黑；优选地，步骤(2)所述脱色的方式包括先将萃取液和脱色剂混合，而后进行离心；优选地，所述混合的方式为振荡混合；优选地，所述混合的时间为0.5-1min；优选地，所述离心的时间为1-3min；优选地，以待测物的质量为1-3g计，步骤(2)所述脱色剂的加入量为0.05-0.15g。 5.根据权利要求1-4任一项所述蔬菜中腐霉利的检测方法，其特征在于，步骤(3)所述碱为无机强碱；优选地，步骤(3)所述碱为氢氧化钠和/或氢氧化钾；优选地，步骤(3)所述碱的浓度为0.05-0.15mol/L；优选地，以待测物的质量为1-3g计，步骤(3)所述碱的体积为0.5-1.5mL。 6.根据权利要求1-5任一项所述蔬菜中腐霉利的检测方法，其特征在于，步骤(3)所述开环反应的温度为90-120℃；优选地，步骤(3)所述开环反应的时间为3-8min。 7.根据权利要求1-6任一项所述蔬菜中腐霉利的检测方法，其特征在于，步骤(3)所述羟胺为盐酸羟胺；优选地，以待测物的质量为1-3g计，步骤(3)所述羟胺的体积为0.2-0.6mL；优选地，步骤(3)所述羟胺的浓度为0.5-2mol/L；优选地，步骤(3)所述缩合反应的温度为90-120℃；优选地，步骤(3)所述缩合反应的时间为3-8min。 8.根据权利要求1-7任一项所述蔬菜中腐霉利的检测方法，其特征在于，步骤(4)所述酸化用试剂为无机强酸；优选地，所述无机强酸包括盐酸和/或硝酸；优选地，步骤(4)所述酸化用试剂的浓度为1-3mol/L；优选地，以待测物的质量为1-3g计，步骤(4)所述酸化用试剂的添加体积为0.025-0.075mL；优选地，步骤(4)所述缓冲溶液为pH为6.8的Tris-HCl缓冲液；优选地，步骤(4)所述缓冲溶液的浓度为0.05-0.15mol/L；优选地，以待测物的质量为1-3g计，步骤(4)所述缓冲溶液的添加体积为0.025-0.075mL；优选地，在步骤(4)进行所述酸化之前还包括将步骤(3)得到的异羟肟酸类化合物过滤；优选地，所述过滤的滤头孔径为0.45μm。 9.根据权利要求1-8任一项所述蔬菜中腐霉利的检测方法，其特征在于，步骤(4)所述显色剂为三价铁盐溶液；优选地，步骤(4)所述显色剂为三氯化铁溶液和/或硝酸铁溶液；优选地，步骤(4)所述显色剂的浓度为0.5-1.5％；优选地，以待测物的质量为1-3g计，所述显色剂的添加体积为0.025-0.075mL。 10.根据权利要求1-9任一项所述蔬菜中腐霉利的检测方法，其特征在于，所述检测方法包括如下步骤： (1)称取1-3g待测物，加入到体积为2-6mL乙腈和0.5-1.5mL的饱和盐溶液的混合液中，涡旋2-5min，涡旋结束后离心1-3min，离心后取上清液加入饱和盐溶液混合0.5-1min，而后离心1-3min进行清洗，得到萃取液； (2)将步骤(1)得到的萃取液中加入质量为0.05-0.15g的脱色剂混合0.5-1min，离心1-3min进行脱色，得到脱色后的溶液； (3)将步骤(2)得到的脱色后的溶液中先加入0.5-1.5mL的浓度为0.05-0.15mol/L的碱，在温度为90-120℃条件下发生开环反应，反应时间3-8min，得到开环化合物；而后将得到的开环化合物中加入0.2-0.6mL浓度为0.5-2mol/L的羟胺在温度为90-120℃条件下发生缩合反应，反应时间为3-8min，得到异羟肟酸类化合物； (4)将步骤(3)得到的衍生化物用滤径为0.45μm的滤头进行过滤，过滤后加入体积为0.025-0.075mL浓度为1-3mol/L的酸酸化，加入体积为0.025-0.075mL浓度为0.05-0.15mol/L，pH为6.8的Tris-HCl缓冲液调pH，而后加入体积为0.025-0.075mL浓度为0.5-1.5％的三价铁盐溶液进行显色，通过目视比色法检测蔬菜中的腐霉利。
所属类别：	发明专利