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原文传递 一种检测肺炎衣原体抗体间接ELISA检测试剂盒及检测方法
专利名称: 一种检测肺炎衣原体抗体间接ELISA检测试剂盒及检测方法
摘要: 本发明公开了一种检测肺炎衣原体抗体间接ELISA检测试剂盒及检测方法,检测试剂盒包括肺炎衣原体重组抗原ELISA包被酶标条、血清稀释板、稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶标二抗结合物、洗涤液、TMB显色液和终止液。终止液为2 M浓硫酸。CP重组抗原的序列为SEQ ID NO.1。通过方阵优化最佳抗原包被浓度和血清稀释度、确定酶标二抗稀释度、确定封闭液种类和封闭时间、抗体孵育时间。本发明用于检测CP抗体具有特异性强、敏感性高、稳定性好和通量高等优点,可以很好的而检测人体血清中CP抗体,对临床诊断具有一定的指导意义。
专利类型: 发明专利
申请人: 南京拂晓生物科技有限公司
发明人: 李伟;郭晓
专利状态: 有效
申请日期: 1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期: 1900-01-20T08:00:00+0805
申请号: CN201911413726.7
公开号: CN111122860A
代理机构: 北京中建联合知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人: 周娓娓
分类号: G01N33/569;G01N33/543;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/569;G01N33/543
申请人地址: 210046 江苏省南京市栖霞区红枫科技园C3栋第二层
主权项: 1.一种检测肺炎衣原体抗体间接ELISA检测试剂盒,其特征在于:检测试剂盒包括肺炎衣原体重组抗原ELISA包被酶标条、血清稀释板、稀释液、阳性对照液、阴性对照液、酶标二抗结合物、洗涤液、TMB显色液和终止液。 2.如权利要求1所述的检测肺炎衣原体抗体间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,终止液为2 M浓硫酸。 3.如权利要求1所述的检测肺炎衣原体抗体间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,CP重组抗原的序列为SEQ ID NO.1。 4.如权利要求3所述的检测肺炎衣原体抗体间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,抗原包被方法是:使用CBS碳酸盐缓冲溶液稀释蛋白质浓度至2 µg/mL,100 µL/孔,放于4 ℃包被 12-18 h。 5.如权利要求4所述的检测肺炎衣原体抗体间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,稀释液和洗涤液都是含有Tween-20的磷酸盐缓冲液。 6.如权利要求1所述的检测肺炎衣原体抗体间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,阴性对照血清是临床上诊断未感染肺炎衣原体的人血清。 7.如权利要求1所述的检测肺炎衣原体抗体间接ELISA检测试剂盒,其特征在于,阳性对照血清是临床上确诊有肺炎衣原体的人血清。 8.使用如权利要求1-7任一项所述的检测肺炎衣原体抗体间接ELISA检测试剂盒的检测方法,其特征在于, 步骤一,一抗孵育:取出试剂,待恢复室温后,将阴阳性对照液和待检样品使用血清稀释板稀释所需的稀释倍数,转至抗原板,孵育; 步骤二,二抗孵育:使用PBST洗液洗涤后加入酶标二抗,孵育; 步骤三,显色:洗涤后加入显色液反应; 步骤四,终止:加入终止液,测定其吸光光度值。
所属类别: 发明专利
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