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原文传递一种检测TSWV的速测卡及其制备、使用方法

专利名称：	一种检测TSWV的速测卡及其制备、使用方法
摘要：	本发明涉及一种免疫金标速测卡，应用双抗体夹心免疫层析的原理，检测植物样本中的番茄斑点枯萎病毒TSWV。检测时，首先向加样孔中加入待检样本，如果样本中含该病毒，在样本层析移动的过程中，病毒会与金标垫上的胶体金标记的特异性单克隆抗体结合，然后被NC膜相应病毒检测线（T线）上的抗体沉积，相应病毒的检测线（T线）显色，多余的金标单克隆抗体在继续移动过程中被控制线上的二抗沉积，控制线（C线）显色；如果样本中不含上述病毒，则检测线（T线）不显色，控制线（C线）显色。应用该速测卡可现场对各种样品中TSWV进行准确、快速和灵敏的检测。
专利类型：	发明专利
申请人：	贵州省烟草科学研究院
发明人：	贾蒙骜;郭玉双;王亚琴;张孝廉;赵会纳
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN201911418774.5
公开号：	CN111077317A
代理机构：	贵阳中新专利商标事务所
代理人：	张行超
分类号：	G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558
申请人地址：	550081 贵州省贵阳市贵州贵阳观山湖区龙滩坝路29号
主权项：	1.一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡，包含：底板上依次粘贴的样品垫、金标垫、NC膜以及吸收垫，其特征在于：所述的金标垫固定有胶体金标记的TSWV单克隆抗体，所述的NC膜有一条检测线，固定TSWV特异性多克隆抗体。 2.根据权利要求1所述的一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡，其特征在于：所述的TSWV单克隆抗体由分泌TSWV单克隆抗体的杂交瘤细胞株制备得到。 3.根据权利要求1所述的一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡，其特征在于：所述的金标垫上单克隆抗体的量为5 ng-50 ng，优化的量为48ng；NC膜上多克隆抗体的量为0.4μg-1.2μg，优化的量为0.6μg。 4.根据权利要求2所述的一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡，其特征在于：分泌TSWV单克隆抗体的杂交瘤细胞株，保藏编号为CCTCC NO:C2019179。 5.根据权利要求1所述的一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡，其特征在于：还包括封盖板，所述的封盖板设置加样孔和结果观察孔，加样孔对应样品垫的位置，结果观察孔对应金标垫和NC膜位置。 6.如权利要求1-5之一所述的一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡的制备方法，其特征在于：（1）将TSWV的特异性多克隆抗体和二抗分别固定于NC膜上；（2）在碱性条件下将胶体金颗粒与抗TSWV特异性单克隆抗体通过静电作用力相互结合；（3）速测卡的组装：底板上依次粘贴的样品垫、金标垫、NC膜以及吸收垫，加盖封盖板与底板合并形成速测卡。 7.根据权利要求1-5之一所述的一种检测番茄斑点枯萎病毒TSWV的速测卡的使用方法，其特征在于：首先于加样孔中加入样品溶液并水平放置，1min后，于结果观察孔中观察颜色变化，作出判断；如果只有控制线C线，没有相应的检测线T线，则表明为待检物质为阴性；既有控制线C线，又有相应的检测线T线，则表明待检物质为阳性。
所属类别：	发明专利