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原文传递一种益根调理膏质量标准的检测方法

专利名称：	一种益根调理膏质量标准的检测方法
摘要：	本发明公开了一种益根调理膏质量标准的检测方法。本发明根据2015版《中国药典》四部膏滋项下(通则0183)检查项目进行性状、相对密度、不溶物和含水量检查项目研究；采用薄层色谱法(TLC)对益根调理膏中的黄精、补骨脂、益智进行鉴别；采用HPLC法对益根调理膏中的有效成分补骨脂素和圆柚酮进行含量测定研究，以期为该产品的质量控制提供依据，该方法专属性强，重现性好，耐用性好，方法简便，可以有效控制益根调理膏的质量。
专利类型：	发明专利
申请人：	广西中医药大学
发明人：	蒋林;农毅清;庞宇舟;李芳婵;陈清;罗宇东
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T21:00:00+0805
申请号：	CN201911422283.8
公开号：	CN111044644A
代理机构：	北京华仁联合知识产权代理有限公司
代理人：	李冰
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/90;G01N30/94;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/74;G01N30/90;G01N30/94
申请人地址：	530000 广西壮族自治区南宁市明秀东路179号
主权项：	1.一种益根调理膏质量标准的检测方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)、益根调理膏的制备； (2)、益根调理膏的薄层鉴别； (3)、益根调理膏的成品检查； (4)、益根调理膏的含量测定。 2.根据权利要求1所述的一种益根调理膏质量标准的检测方法，其特征在于，所述益根调理膏的制备步骤如下： (1)、按重量份称取以下药材：黄精25份、玉竹15份、覆盆子15份、桑椹10份、补骨脂20份、益智20份、韭子15份、火麻仁10份、山楂10份； (2)将黄精、玉竹、桑椹混合均匀，加相当于混合药材重量10倍的水提取2次，每次1.5h，过滤，浓缩； (3)将覆盆子、补骨脂、韭子、益智、火麻仁、山楂混合均匀，加相当于混合药材重量12倍的60％乙醇提取2次，每次1.5h，过滤，蒸去乙醇浓缩； (4)合并两次浓缩液，浓缩至相对密度为1.05-1.10，加入相当于浓缩物重量20％的辅料，熬制30min，不断搅拌混匀，加水适量调至1000g，分装，即得益根调理膏。 3.根据权利要求2所述的一种益根调理膏质量标准的检测方法，其特征在于，所述辅料为蜂蜜和饴糖按照重量比1∶1混合而成。 4.根据权利要求1所述的一种益根调理膏质量标准的检测方法，其特征在于，所述益根调理膏的薄层鉴别步骤如下： (1)、黄精薄层鉴别 ①、供试品溶液的制备取益根调理膏5g，加70％乙醇20mL，加热回流1h，过滤，滤液蒸干，残渣加水10mL使溶解，加正丁醇20mL萃取2次，合并正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1mL溶解，作为供试品溶液； ②、对照溶液的制备取黄精对照药材0.5g，加70％乙醇20mL，同供试品制备方法制备对照药材溶液；取缺黄精的阴性样品5g，同供试品制备方法制备阴性对照品溶液； ③、方法按照薄层色谱法(中国药典2015版四部通则0502)试验，吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(5∶2∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草醛硫酸溶液，在105℃加热至斑点显色清晰； (2)、补骨脂薄层鉴别 ①、供试品溶液制备取益根调理膏5g，加甲醇20mL，超声处理30min，滤过，滤液蒸干加甲醇5mL溶解，即得供试品溶液； ②、对照品溶液制备取缺补骨脂阴性样品5g，同供试品制备方法法制备阴性对照品溶液；取补骨脂素对照品适量，加甲醇制成每1mL含补骨脂素2mg的溶液；取异补骨脂素对照品适量，加甲醇制成每lmL含补骨脂素2mg的溶液； ③、方法按照薄层色谱法(《中国药典》四部通则0502)试验，吸取上述两种溶液各5μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(4∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％氢氧化钾甲醇溶液，置紫外光灯(365mn)下检视； (3)、益智薄层鉴别 ①、供试品溶液制备取益根调理膏5g，加无水乙醇30mL，超声处理30min，滤过，滤液挥干，残渣加水10mL，分别加正丁醇30mL萃取，萃取2次，取蒸干，加无水乙醇1mL溶解，即得供试品溶液； ②、对照品溶液制备取益智对照药材0.5g，加无水乙醇30mL，同供试品制备方法制备对照药材溶液。取缺益智的阴性样品5g，同供试品制备方法制备阴性对照溶液； ③、方法按照薄层色谱法(通则0502)试验，吸取上述两种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(5∶2∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，分别喷以5％香草醛硫酸溶液和5％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，置日光下检视。 5.根据权利要求1所述的一种益根调理膏质量标准的检测方法，其特征在于，所述益根调理膏的成品检查步骤如下： (1)性状观察3批益根调理膏的外观形状、色、嗅、味； (2)、相对密度按照《中国药典》2015年版第四部相对密度法通则(0601)测定相对密度； (3)、不溶物取益根调理膏3批，按照《中国药典》2015年版第四部膏滋项下(通则0183)，分别取样品5g，加热水200mL，搅拌使溶化，放置3分钟后观察，三批样品均无焦屑异物； (4)、含水量取益根调理膏6批，按照《中国药典》2015年版四部水分测定法(通则0832)项下烘干法进行测定。 6.根据权利要求1所述的一种益根调理膏质量标准的检测方法，其特征在于，所述益根调理膏的含量测定步骤如下： (1)、益根调理膏中补骨脂素含量测定 ①、色谱条件 PHenomenex GeminiC18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相乙腈-水(38∶62)，流速1mL/min，检测波长244nm，进样量5μL； ②、供试品溶液制备取益根调理膏2g，精密称定，置具塞锥形瓶中(3份)，精密加入甲醇溶液20mL，称定重量，超声处理(功率250W，频率40KHz)30min，放冷，再称定重量，以甲醇补充减失的重量，过滤，取续滤液，即得； ③、对照品溶液制备取补骨脂素适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含补骨脂素0.0985mg的对照品溶液； ④、专属性考察分别取补骨脂素对照品溶液、供试品溶液及阴性对照品溶液，按上述步骤①的色谱条件操作； ⑤、标准曲线绘制精密取1、2、4、6、8、10μL补骨脂素对照品溶液，按上述步骤①的色谱条件操作，记录峰面积，以质量为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)，进行线性回归； ⑥、稳定性试验取益根调理膏适量，精密称定，按上述步骤②的方法制备供试品溶液，取续滤液过0.45μm微孔滤膜，按上述步骤①的色谱条件操作，分别于0、2、4、8、12、24h进样，记录峰面积，计算每1g益根调理膏中补骨脂素的含量，计算RSD； ⑦、精密度试验取补骨脂素对照品溶液，过0.45μm微孔滤膜，按上述步骤①的色谱条件操作，连续进样6次，记录峰面积，计算RSD； ⑧、重复性试验取益根调理膏2g，共6份，精密称定，按上述步骤②的方法制备供试品溶液，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，按上述步骤①的色谱条件操作，记录峰面积，计算RSD； ⑨、加样回收试验取益根调理膏1g，共6份，精密称定，分别精密加入补骨脂素对照品，精密加入甲醇20mL，按上述步骤②的方法制备供试品溶液，供试品溶液过0.45μm的微孔滤膜，按上述步骤①的色谱条件操作，计算加样回收率； ⑩、含量测定取6批益根调理膏，按上述步骤②的方法制备供试品溶液，按上述步骤①的色谱条件操作，记录峰面积，计算RSD； (2)、益根调理膏中圆柚酮含量测定 ①、色谱条件 PHenomenex GeminiC18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，流动相乙腈-水(56∶44)，柱温30℃，流速1mL/min，检测波长239nm，进样量10μL； ②、供试品溶液制备取益根调理膏2g，精密称定，置具塞锥形瓶中(3份)，分别精密加入甲醇溶液20mL，超声提取(功率250W，频率40KHz)30min，放冷，补重，取续滤液，即得供试品溶液； ③、对照品溶液制备取圆柚酮对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1mL含圆柚酮对照品0.055mg的溶液； ④、专属性考察分别取圆柚酮对照品溶液、供试品溶液及阴性样品溶液，按上述步骤①的色谱条件操作； ⑤、标准曲线绘制精密吸取2、4、6、8、10、12μL圆柚酮对照品溶液注入高效液相色谱仪中，按上述步骤①的色谱条件操作，记录峰面积，以质量为横坐标(X)，峰面积为纵坐标(Y)，进行线性回归； ⑥、稳定性试验取益根调理膏2g，精密称定，按上述步骤②的方法制备供试品溶液，过0.45μm微孔滤膜，按上述步骤①的色谱条件操作，分别于0、2、4、8、12、24h进样，记录峰面积，计算每1g益根调理膏中圆柚酮的含量，计算RSD； ⑦、精密度试验取圆柚酮对照品溶液，过0.45μm微孔滤膜，按上述步骤①的色谱条件操作，连续进样6次，记录峰面积，计算RSD，； ⑧、重复性试验取益根调理膏2g，共6份，精密称定，按上述步骤②的方法制备供试品溶液，取续滤液，过0.45μm微孔滤膜，按上述步骤①的色谱条件操作，记录峰面积，计算每1g益根调理膏中圆柚酮的含量，计算RSD； ⑨、加样回收试验取益根调理膏1g，共6份，精密称定，分别精密加入与药材相当量的圆柚酮，按上述步骤②的方法制备供试品溶液，取续滤液过0.45μm的微孔滤膜，按上述步骤①的色谱条件操作，记录峰面积，计算加样回收率； ⑩、含量测定取6批益根调理膏，按上述步骤②的方法制备供试品溶液，按上述步骤①的色谱条件操作，记录峰面积，计算RSD。
所属类别：	发明专利