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一种减少核蛋白抽提物EMSA实验假阳性结果的方法
| 专利名称： | 一种减少核蛋白抽提物EMSA实验假阳性结果的方法 |
| 摘要： | 本发明涉及一种减少核蛋白抽提物EMSA实验假阳性结果的方法，属于分子生物学技术领域。本发明利用核蛋白抽提物进行经典EMSA实验；对生物素标记探针使用量进行梯度实验，确定生物素标记探针最优使用量；采用生物素标记探针最优使用量，进行核蛋白抽提物上样量梯度实验，得到核蛋白EMSA实验的核酸蛋白复合物目的条带。本发明方法将目的条带精准定位，降低了经典EMSA技术的假阳性率，减少后续结果分析的工作量，提高了实验结论的可靠性。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 申请人： | 昆明理工大学 |
| 发明人： | 杨召辉;蒲有伟 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 1900-01-20T17:00:00+0805 |
| 发布日期： | 1900-01-20T17:00:00+0805 |
| 申请号： | CN202010055587.1 |
| 公开号： | CN111024957A |
| 代理机构： | 昆明合众智信知识产权事务所 |
| 代理人： | 张玺 |
| 分类号： | G01N33/68;G01N33/53;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68;G01N33/53 |
| 申请人地址： | 650093 云南省昆明市五华区学府路253号 |
| 主权项： | 1.一种减少核蛋白抽提物EMSA实验假阳性结果的方法，其特征在于，具体步骤如下： （1）利用核蛋白抽提物进行经典EMSA实验； （2）对生物素标记探针使用量进行梯度实验，确定生物素标记探针最优使用量； （3）采用步骤（2）生物素标记探针最优使用量，进行核蛋白抽提物上样量梯度实验，得到准确的核酸蛋白复合物的目的条带。 2.根据权利要求1所述，降低核蛋白抽提物EMSA实验假阳性结果的方法，其特征在于：步骤（2）实验体系为20mL，生物素标记探针使用量的相邻梯度差值为1~20fmoL；阴性对照组未添加核蛋白抽提物，阳性对照采用经典EMSA实验中成功实验组。 3.根据权利要求1所述，降低核蛋白EMSA实验假阳性结果的方法，其特征在于：步骤（3）实验体系为20mL，核蛋白抽提物上样量的相邻梯度差值为0.1×2n-1mL，其中1≤n≤10，阴性对照组未添加核蛋白抽提物，阳性对照组采用经典EMSA实验中成功实验组。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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