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原文传递胃泌素17定量检测试剂盒

专利名称：	胃泌素17定量检测试剂盒
摘要：	本发明公开了胃泌素17定量检测试剂盒，包括酶标液、胃泌素17标准品、包被抗胃泌素17单克隆抗体的免疫磁珠、化学发光底物液、洗涤液；本发明将化学发光法进行了改进，将胃泌素‑17单克隆抗体包被在磁珠微球表面，捕捉样本中的胃泌素‑17，在加入酶标胃泌素‑17单克隆抗体试剂后，形成固相‑抗体‑抗原‑酶标抗体夹心免疫复合物；本发明具有灵敏度高，线性相关性良好，检测结果准确，可靠性高，发光时间长、效果好的特点。
专利类型：	发明专利
申请人：	宁波奥丞生物科技有限公司
发明人：	周义正;余城滨;唐静;叶金晶
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T07:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T15:00:00+0805
申请号：	CN202010014186.1
公开号：	CN111157748A
代理机构：	北京盛凡智荣知识产权代理有限公司
代理人：	赵芳蕾
分类号：	G01N33/74;G01N33/577;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/74;G01N33/577
申请人地址：	315000 浙江省宁波市海曙区望春工业园区春华路885号
主权项：	1.胃泌素17定量检测试剂盒，其特征在于，包括酶标液、胃泌素17标准品、包被抗胃泌素17单克隆抗体的免疫磁珠、化学发光底物液、洗涤液。 2.如权利要求1所述的胃泌素17定量检测试剂盒，其特征在于，所述酶标液为HRP标记抗胃泌素17单克隆抗体。 3.如权利要求1所述的胃泌素17定量检测试剂盒，其特征在于，所述胃泌素17标准品为含有不同量胃泌素G17抗原的BSA蛋白溶液。 4.如权利要求1所述的胃泌素17定量检测试剂盒，其特征在于，所述包被胃泌素17单克隆抗体的免疫磁珠为标记有抗胃泌素-17单克隆抗体的磁珠。 5.如权利要求1所述的胃泌素17定量检测试剂盒，其特征在于，所述抗胃泌素17单克隆抗体包被免疫磁珠的方法如下： (1)洗涤磁珠：取100μl磁珠，将其稀释成10mg/ml的磁珠浓度，从中吸取100μl，磁分离，去上清，用洗涤液1ml洗涤三次，磁分离，去上清； (2)活化：取洗涤完成的磁珠加入150μlMES，再加入50μlEDC及50μl的NHS溶液,充分混匀，室温下25℃活化30min，活化完成磁分离去上清，以洗涤液重悬洗涤三次，分离去上清，得到活化的磁珠； (3)稀释抗胃泌素17单克隆抗体：取抗胃泌素17单克隆抗体20μl，添加样本稀释液380μl，混匀； (4)孵育：向洗涤完成后的磁珠中加入丙烯醛，经电子加速器照射使磁珠表面形成一层活性膜后，加入稀释后的抗胃泌素17单克隆抗体，37℃摇床孵育12h； (5)封闭：将孵育后的磁珠磁分离，去上清，加入400μl封闭液，37℃摇床封闭1h，封闭结束后去除上清，洗涤液清洗3次，最终加稀释液定容到500μl。 6.如权利要求5所述的胃泌素17定量检测试剂盒，其特征在于，所述封闭液是将0.01g叠氮化钠、10g牛血清白蛋白和100mL浓度为0.03mol/L磷酸盐溶液(pH＝7.4)混合得到的溶液。 7.如权利要求5所述的胃泌素17定量检测试剂盒，其特征在于，所述稀释液是含有1％BSA的PBS溶液。 8.如权利要求1或5所述的胃泌素17定量检测试剂盒，其特征在于，所述洗涤液是含有吐温-20和ProCline-300的缓冲液。 9.如权利要求1所述的胃泌素17定量检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光底物液的配制方法如下： (a)化学发光底物液A液配制：称取0.0094g过氧化脲、0.01g四聚磷酸钠、0.03g氟化钠、0.01g酒石酸钠、0.172g柠檬酸、0.347g柠檬酸钠，调整pH至5.0，用纯化水定容至100ml； (b)化学发光底物液B液配制：称取0.03g鲁米诺、0.01g十二烷基二甲基甜菜碱、0.05g对乙酰氨基酚、0.01g 2、4、6三(二甲氨基甲基)苯酚、0.0858g硼砂、0.0680g硼酸，调整pH至8.4，用纯化水定容至100ml。
所属类别：	发明专利