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原文传递一种水产品中组胺检测方法

专利名称：	一种水产品中组胺检测方法
摘要：	本发明公开了一种水产品中组胺检测方法，包括如下步骤：步骤1：清洗后去头、骨、内脏、皮，取背部肌肉等可食部分，使用绞肉机高档位绞碎混合均匀，步骤2：取步骤1中制备好的样品5g（精确至0.01g）于50ml离心管中，加入25ml0.4M的高氯酸溶液，旋涡混匀，超声提取20分钟，振荡提取5min，9000r离心5min，将上清液转移至50ml容量瓶中，再加入20ml0.4M的高氯酸溶液重复提取一次，合并上清液，若样品含有油脂，则加入10ml正己烷振荡10min，8000r/min离心5分钟，弃去上层正己烷，下层试样溶液转移至容量瓶，用0.4M的高氯酸溶液定容，待衍生。
专利类型：	发明专利
申请人：	山东中质华检测试检验有限公司
发明人：	房裕;仲光凤;郑文娟;王姣;高恒
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T19:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T19:00:00+0805
申请号：	CN202010060856.3
公开号：	CN111175403A
代理机构：	青岛致嘉知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	孟志
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
申请人地址：	272000 山东省济宁市高新区洸河路16号鲁南质检中心院
主权项：	1.一种水产品中组胺检测方法，包括如下步骤：步骤1：清洗后去头、骨、内脏、皮，取背部肌肉等可食部分，使用绞肉机高档位绞碎混合均匀，制备的样品放入-18℃以下冰柜冷冻暂存。 2.步骤2：取步骤1中制备好的样品5g（精确至0.01g）于50ml离心管中，加入25ml0.4M的高氯酸溶液，旋涡混匀，超声提取20分钟，振荡提取5min，9000r离心5min，将上清液转移至50ml容量瓶中，再加入20ml0.4M的高氯酸溶液重复提取一次，合并上清液，若样品含有油脂，则加入10ml正己烷振荡10min，8000r/min离心5分钟，弃去上层正己烷，下层试样溶液转移至容量瓶，用0.4M的高氯酸溶液定容，待衍生。 3.步骤3：移取步骤2中的提取液1ml至15ml离心管中，依次加入1mlpH=10的碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液，2ml丹璜酰氯溶液，旋涡混匀，放置到60℃的水浴振荡锅中，反应20min，拿出加入100ul浓氨水，混匀静置20min，以终止反应，用乙腈定容至5ml，混匀过0.22um微孔滤膜，供高效液相色谱仪分析。 4.溶液配制：0.4M高氯酸：取24ml高氯酸于1L容量瓶中，用水定容，pH=10的饱和碳酸氢钠/碳酸钠缓冲液；酰氯：称取0.2g丹璜酰氯用乙腈定容至20ml。 5.所述液相色谱条件为：色谱柱：C18色谱柱，150mm×4.6mm（内径）；流动相：乙腈+0.02m/L乙酸铵（75+25，体积比），等度洗脱；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；进样体积:5ul;紫外检测波长：255nm。 6.色谱条件的优化；分别选择以下三个色谱条件，对标品进行检测；（1）水-乙腈（10+90，含0.01mol/L乙酸铵）+0.01mol/L乙酸铵（75+25），等度洗脱，流速：1.0ml/min，柱温：30℃，进样体积:5ul；紫外检测波长：254nm。 7.（2）乙腈+0.02m/L乙酸铵（75+25，体积比），等度洗脱；流速：1.0ml/min；柱温：30℃；进样体积:5ul;紫外检测波长：255nm；（3）流动相A为90%乙腈/10%（含0.1%乙酸的0.01mol/L乙酸铵溶液），流动相B为10%乙腈/90%（含0.1%乙酸的0.01mol/L乙酸铵溶液），流速0.8mL/min，梯度洗脱程序见表1，柱温：35℃，进样体积:5ul;紫外检测波长：254nm。
所属类别：	发明专利