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原文传递一种测定番茄果实中可溶性糖的高效液相色谱方法

专利名称：	一种测定番茄果实中可溶性糖的高效液相色谱方法
摘要：	本发明提供了一种测定番茄果实中可溶性糖的高效液相色谱方法，该方法利用高效液相色谱串联RID‑20A示差折光检测器对可溶性糖进行检测，可区分都为五碳糖的葡萄糖及果糖，达到对葡萄糖、果糖、蔗糖三种可溶性糖同时进行准确检测的效果，所需样品量较少，仅需要0.1g甚至更少样品即可进行精确检测；检测步骤少，简单快捷，重现性较好，降低了实验误差并提高了数据的准确性，可同时对葡萄糖、果糖、蔗糖三种可溶性糖进行定性、定量，为番茄中可溶性糖的混合物准确判定、快速检测提供了科学依据。
专利类型：	发明专利
申请人：	深圳大学
发明人：	黄腾波;邱琦芸;李紫薇
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T12:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T19:00:00+0805
申请号：	CN202010088657.3
公开号：	CN111175408A
代理机构：	深圳中一联合知识产权代理有限公司
代理人：	黄志云
分类号：	G01N30/02;G01N30/14;G01N30/86;G01N30/06;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/14;G01N30/86;G01N30/06
申请人地址：	518000 广东省深圳市南山区南海大道3688号
主权项：	1.一种测定番茄果实中可溶性糖的高效液相色谱方法，其特征在于，包括如下步骤：配制葡萄糖标准品、果糖标准品、蔗糖标准品的混合标准溶液，将所述混合标准溶液进行高效液相色谱串联RID-20A示差折光检测器检测得到标准图谱，并制作标准曲线，获取各标准品的回归方程；配制番茄待测品；将所述番茄待测品在与所述混合标准溶液相同的检测条件下进行高效液相色谱串联RID-20A示差折光检测器检测，获得所述番茄待测品的色谱图，根据所述番茄待测品的色谱图的保留时间确定葡萄糖、果糖、蔗糖的种类，并根据各种类的色谱峰面积计算得到所述葡萄糖、果糖、蔗糖的含量。 2.根据权利要求1所述的测定番茄果实中可溶性糖的高效液相色谱方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测的条件如下：检测器为岛津LC-16液相色谱仪搭配RID-20A示差折光检测器；色谱柱为NH2色谱柱；柱温为30-50℃；流动相A溶液为纯水，流动相B溶液为乙腈；洗脱方式为等度洗脱；洗脱时间为15～20min。 3.据权利要求2所述的测定番茄果实中可溶性糖的高效液相色谱方法，其特征在于，等度洗脱时，流动相A的体积百分比为15％～20％，流动相B的百分比为80％～85％。 4.据权利要求3所述的测定番茄果实中可溶性糖的高效液相色谱方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测的条件如下：所述NH2色谱柱的规格为3μm，4.6×250mm；进样量为10-30μL；洗脱流速为1.0～1.5mL/min。 5.根据权利要求1～4任一所述的测定番茄果实中可溶性糖的高效液相色谱方法，其特征在于，配置番茄待测品的步骤中，包括如下方法：提供番茄样品，收集所述番茄样品的果肉；将所述果肉加入有机溶剂进行萃取得到第一混合物，将所述第一混合物进行加热处理后进行离心处理，收集第一混合物上清液；将所述第一混合物上清液进行浓缩处理，得到第一提取物；将所述第一提取物加入超纯水进行混合、过滤得到所述番茄待测品。 6.根据权利要求5所述的测定番茄果实中可溶性糖的高效液相色谱方法，其特征在于，将所述果肉加入有机溶剂进行萃取得到第一混合物的步骤中，所述第一混合物的浓度为50～100mg/L。 7.根据权利要求5所述的测定番茄果实中可溶性糖的高效液相色谱方法，其特征在于，将所述第一混合物进行加热处理的步骤中，所述加热处理的温度为35～40℃，加热处理的时间为25～30分钟。 8.根据权利要求5所述的测定番茄果实中可溶性糖的高效液相色谱方法，其特征在于，将所述第一混合物进行加热处理后进行离心处理的步骤中，所述离心处理的条件为：离心处理的转速为10000rcf～12000rcf；离心处理的时间为20～25分钟。 9.根据权利要求1～4任一所述的测定番茄果实中可溶性糖的高效液相色谱方法，其特征在于，将所述混合标准溶液进行高效液相色谱串联RID-20A示差折光检测器检测得到标准图谱，并制作标准曲线，获取各标准品的回归方程的步骤中，将所述混合标准溶液进行逐级稀释，配制至少5种不同浓度的混合标准稀释液，将所述不同浓度的混合标准稀释液进行高效液相色谱串联RID-20A示差折光检测器检测并得到标准图谱，通过所述标准图谱中的保留时间确定各标准品的种类，以各标准品的峰面积与对应的各标准品的浓度制作标准曲线，获取各标准品的回归方程。 10.根据权利要求1所述的测定番茄果实中可溶性糖的高效液相色谱方法，其特征在于，包括如下步骤：配制葡萄糖标准品、果糖标准品、蔗糖标准品的混合标准溶液，将所述混合标准溶液进行逐级稀释，配制30mg/mL、20mg/mL、10mg/mL、5mg/mL、2.5mg/mL、1.25mg/mL6种不同浓度的混合标准稀释液，将所述不同浓度的混合标准稀释液进行高效液相色谱串联RID-20A示差折光检测器检测并得到标准图谱，通过所述标准图谱中的保留时间确定各标准品的种类，以各标准品的峰面积与对应的各标准品的浓度制作标准曲线，获取各标准品的回归方程；其中，所述色谱条件如下：检测器为岛津LC-16液相色谱仪搭配RID-20A示差折光检测器；色谱柱选用NH2色谱柱；柱温为30～50℃；进样量为10～30μL；流动相A溶液为纯水，流动相B溶液为乙腈；洗脱方式为等度洗脱，等度洗脱时，流动相A的体积百分比为15％～20％，流动相B的百分比为80％～85％；洗脱时间为15～20min；洗脱流速为1.0～1.5mL/min；提供番茄样品，收集所述番茄样品的果肉；将所述果肉加入有机溶剂进行萃取得到第一混合物，将所述第一混合物进行加热处理后进行离心处理，收集第一混合物上清液；将所述第一混合物上清液进行浓缩处理，得到第一提取物；将所述第一提取物加入超纯水进行混合、过滤得到所述番茄待测品；将所述番茄待测品进行在与所述混合标准溶液相同的检测条件下进行高效液相色谱串联RID-20A示差折光检测器检测，获得所述番茄待测品的色谱图，根据所述番茄待测品的色谱图的保留时间确定葡萄糖、果糖、蔗糖的种类，并根据各种类的色谱峰面积计算得到所述葡萄糖、果糖、蔗糖的含量。
所属类别：	发明专利