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原文传递番茄中海藻糖-6-磷酸含量的超高效液相色谱串联质谱检测方法

专利名称：	番茄中海藻糖-6-磷酸含量的超高效液相色谱串联质谱检测方法
摘要：	本发明公开了番茄中海藻糖‑6‑磷酸含量的超高效液相色谱串联质谱检测方法，包括以下步骤：(1)准备标准工作溶液并进行超高效液相色谱串联质谱检测；(2)根据步骤(1)获得的标准谱图制作标准工作溶液的浓度和色谱峰面积关系曲线图；(3)番茄样品的预处理，得到待检测海藻糖‑6‑磷酸含量的样品溶液；(4)超高效液相色谱串联质谱检测；(5)样品中海藻糖‑6‑磷酸的含量的确定：通过步骤(4)中获得的样品谱图的保留时间确定海藻糖‑6‑磷酸的色谱峰，并将海藻糖‑6‑磷酸的色谱峰面积与步骤(2)中的标准工作溶液的浓度和色谱峰面积关系曲线图进行比对，用插入法确定样品溶液中的海藻糖‑6‑磷酸含量。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国农业科学院蔬菜花卉研究所
发明人：	蒋卫杰;李强;余宏军
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-25T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201910338255.1
公开号：	CN109900833A
代理机构：	北京同辉知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	孙艳敏;杨敬
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	100081 北京市海淀区中关村南大街12号
主权项：	1.一种番茄中海藻糖-6-磷酸含量的超高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)准备标准工作溶液并进行超高效液相色谱串联质谱检测：称取海藻糖-6-磷酸标准品于容量瓶中，用体积分数为80％的乙腈溶解并定容，然后用体积分数为80％的乙腈逐级稀释配制多个浓度梯度的标准工作溶液，将不同浓度的标准工作溶液进行超高效液相色谱串联质谱检测并得到标准谱图； (2)根据步骤(1)获得的标准谱图制作标准工作溶液的浓度和色谱峰面积关系曲线图； (3)番茄样品的预处理：将番茄样品置于装有液氮的研钵中研磨成粉，称取定量研磨的番茄粉末样品加入离心管中，向离心管内加入蒸馏水，涡旋震荡，之后超声提取，进行离心，取上清液，通过滤膜过滤，得到待检测海藻糖-6-磷酸含量的样品溶液； (4)超高效液相色谱串联质谱检测：将步骤(3)制备的待检测的样品溶液进行超高效液相色谱串联质谱检测，得到样品谱图； (5)样品中海藻糖-6-磷酸的含量的确定：通过步骤(4)中获得的样品谱图的保留时间确定海藻糖-6-磷酸的色谱峰，并将海藻糖-6-磷酸的色谱峰面积与步骤(2)中的标准工作溶液的浓度和色谱峰面积关系曲线图进行比对，用插入法确定样品溶液中的海藻糖-6-磷酸含量。 2.根据权利要求1所述的番茄中海藻糖-6-磷酸含量的超高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，步骤(3)中番茄样品的预处理：将番茄样品置于装有液氮的研钵中研磨成粉，称取0.3-0.7g研磨的粉末样品加入2mL离心管中，加入0.7-1.3mL蒸馏水，涡旋震荡4-6min，超声提取8-15min，其中超声功率为100W，超声温度为15-25℃，3-5℃温度下在13000rpm进行离心15-30min，取上清液，上清液通过0.15-0.25μm滤膜过滤，得到待检测海藻糖-6-磷酸含量的样品溶液。 3.根据权利要求2所述的番茄中海藻糖-6-磷酸含量的超高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，步骤(3)中番茄样品的预处理：将番茄样品置于装有液氮的研钵中研磨成粉，称取0.5g研磨的粉末样品加入2mL离心管中，加入1mL蒸馏水，涡旋震荡5min，超声提取10min，其中超声功率为100W，超声温度为20℃，4℃温度下在13000rpm进行离心20min，取上清液，上清液通过0.2μm滤膜过滤，得到待检测海藻糖-6-磷酸含量的样品溶液。 4.根据权利要求1所述的番茄中海藻糖-6-磷酸含量的超高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，采用的超高效液相色谱的参数条件为： (1)色谱柱：AQUITY UPLC BEH C18 1.7μm(2.1×50mm)； (2)流动相：乙腈/含0.1％氢氧化铵的水； (3)梯度洗脱程序为：0-4min，100％乙腈；4-4.5min，100％乙腈-60％乙腈；4.5-8min，60％乙腈；8-10min，60％乙腈-0乙腈；10-13min，0乙腈-100％乙腈；最后保持100％乙腈2min； (4)柱温：30℃； (5)进样量：5μl； (6)流速：0.2mL/min。 5.根据权利要求1所述的番茄中海藻糖-6-磷酸含量的超高效液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，采用的质谱参数条件为： (1)电离模式：负离子(ESI-)； (2)毛细管电压：2.5kv； (3)离子源温度：150℃； (4)脱溶剂气温度：350℃； (5)脱溶剂气流量：650L/h； (6)锥孔反吹气流量：0； (7)锥孔电压：58v； (8)扫描模式：多反应监测(MRM)模式； (9)离子对：421.1145/240.8659，421.1145/78.7361。
所属类别：	发明专利