详情

原文传递一种同时检测昆虫体内多类痕量持久性卤代有机污染物的方法

专利名称：	一种同时检测昆虫体内多类痕量持久性卤代有机污染物的方法
摘要：	本发明提供一种同时检测昆虫体内多类痕量持久性卤代有机污染物的方法。本发明采用加速溶剂萃取目标化合物，同时使用浓硫酸和浓盐酸净化，利用不同类型的固相萃取小柱分离不同的目标化合物，实现了多种POPs的同步提取和净化过程；添加相应的13C同位素内标和氘代回收率指示物对前处理过程和仪器检测误差进行质量控制和对目标化合物进行定量分析。采样同位素稀释法和高分辨气相/液相质谱法对这些有机污染物进行检测，获得了高灵敏的定量检测结果。本发明方法保证了昆虫所含的痕量持久性有机污染物测定的准确性和可靠性，为复杂基质中多组分持久性有机污染物的快速筛查和准确定量提供了新技术手段。
专利类型：	发明专利
申请人：	江西省科学院
发明人：	刘煜;吴永明;涂文清;邓觅;杨春燕
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T19:00:00+0805
申请号：	CN202010118652.0
公开号：	CN111175418A
代理机构：	北京市盈科律师事务所
代理人：	陈琳
分类号：	G01N30/06;G01N30/88;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/06;G01N30/88
申请人地址：	330096 江西省南昌市高新技术开发区昌东大道7777号
主权项：	1.一种同时检测昆虫体内多类痕量持久性卤代有机污染物的方法，其特征在于：包括如下步骤： (1)取适量昆虫样品冷冻干燥后研磨成粉末状，然后称取适量粉末状样品； (2)向粉末状样品中添加所需检测对象对应的内标指示物，后用体积比为1∶1的二氯甲烷/正己烷溶剂进行加速溶剂萃取； (3)步骤(2)获得的萃取液一部分进行样品脂肪含量测定，另一部分加入浓硫酸后混合均匀，离心后移出有机相至特氟龙管加入浓盐酸，再次离心后移出有机相至特氟龙管； (4)利用超纯水将两次浓酸清洗后移出的有机相洗涤至中性，过无水硫酸钠除水，利用旋转蒸发仪浓缩，并用正己烷定容获得检测样品，检测样品分成两部分； (5)第一部分检测样品利用氮气吹干仪浓缩至适当体积，然后过弗罗里固相萃取净化小柱，经适量正己烷洗脱获得针对DDTs、PCBs、DP、PBBs、PBDEs和OBFRs的第一测试组分，再经适量二氯甲烷洗脱获得针对CPs的第二测试组分，对所述第一测试组分和第二测试组份用异辛烷定容，后分别加入所需测试对象对应的回收率指示物进行GC/MS检测； (6)第二部分检测样品利用氮气吹干仪浓缩至适当体积，然后经硅胶固相萃取柱分离净化，依次经正己烷和体积比为1∶1的正己烷/二氯甲烷混合溶剂预淋洗，后用一定量正己烷/二氯甲烷混合溶剂淋洗并收集淋洗液获得针对TBBPA和HBCDs的第三测试组分，后氮吹加入回收率指示物，用甲醇定容后经微孔滤膜过滤后进行HPLC/MS检测。 2.根据权利要求1所述的一种同时检测昆虫体内多类痕量持久性卤代有机污染物的方法，其特征在于：步骤(2)中内标指示物、步骤(5)和步骤(6)的回收率指示物的添加量均为10-100ng/lg干重样品；二氯甲烷/正己烷溶剂萃取用量为20-200ml/lg干重样品，加速溶剂萃取时间为5min、循环2次。 3.根据权利要求1所述的一种同时检测昆虫体内多类痕量持久性卤代有机污染物的方法，其特征在于：步骤(3)中浓酸酸洗的萃取液与浓硫酸和浓盐酸的添加体积比为9∶1∶1；步骤(4)定容体积为进行浓酸酸洗萃取液的2倍。 4.根据权利要求1所述的一种同时检测昆虫体内多类痕量持久性卤代有机污染物的方法，其特征在于：步骤(5)中弗罗里固相萃取净化小柱规格为6mL、1000mg，用量为1个/1mL检测样品；正己烷用量为3-5mL/1mL检测样品；正己烷/二氯甲烷用量为3-5mL/1mL检测样品。 5.根据权利要求1所述的一种同时检测昆虫体内多类痕量持久性卤代有机污染物的方法，其特征在于：步骤(6)中硅胶固相萃取柱规格为6mL、1000mg，用量为1个/1mL检测样品；预淋洗正己烷用量为3-5mL/1mL检测样品；预淋洗正己烷/二氯甲烷用量为1-3mL/1mL检测样品；收集淋洗正己烷/二氯甲烷用量为6-10mL/1mL检测样品；微孔滤膜滤径≤0.22μm。 6.根据权利要求1所述的一种同时检测昆虫体内多类痕量持久性卤代有机污染物的方法，其特征在于：所述DDTs包括p，p＇-DDE、p，p＇-DDDp和p＇-DDT，所述PCBs包括CB18、CB28/31、CB49、CB52、CB74、CB87/115、CB95、CB99、CB101、CB105、CB110、CB118、CB128、CB138、CB146/161、CB149/139、CB153/132、CB156、CB164/163、CB167、CB170/190、CB174/181、CB180/193、CB183、CB187、CB189、CB194、CB203/196、CB206和CB209；所述DDTs和PCBs对应的回收率指示物为CB82、CB198和CB204，内标指示物为CB24、CB30和CB65，检测方法为安捷伦气相色谱-质谱联用仪；所述PBDEs包括BDE28、BDE47、BDE100、BDE99、BDE154、BDE153、BDE183、BDE202、BDE197、BDE203、BDE196、BDE208、BDE207、BDE206和BDE209；对应的回收率指示物为BDE77、BDE181和BDE205，内标指示物为4-F-BDE67、BDE118、BDE128、3-F-BDE153和13C-BDE 209，检测方法：BDE28-183低溴代的BDEs用安捷伦气相色谱-质谱联用仪，BDE196-209高溴代的BDEs用岛津气相色谱-质谱联用仪；所述DP包括syn-DP、anti-DP；所述DBDPE包括DBDPE；所述DP和所述DBDPE对应的回收率指示物为BDE205，内标指示物为13C-BDE 209，检测方法采用岛津气相色谱-质谱联用仪；所述HBCDs包括α-HBCD、β-HBCD和γ-HBCD，对应的回收率指示物为18d-α-HBCD、18d-β-HBCD和18d-γ-HBCD，内标指示物为13C-α-HBCD、13C-β-HBCD和13C-γ-HBCD，检测方法采用安捷伦液相色谱-质谱联用仪；所述TBBPA包括TBBPA，对应的回收率指示物为18d-α-HBCD，内标指示物为13C-TBBPA，检测方法采用安捷伦液相色谱-质谱联用仪；所述CPs包括SCCPs(C10-13Cl5-10)、MCCPs(C14-17Cl5-10)，对应的回收率指示物为ε-HCH，内标指示物为13C-trans-chlordane，检测方法采用安捷伦气相色谱-质谱联用仪；所述OBFRs包括PBT、PBEB、HBB、PBB153和PBB209，对应的回收率指示物为BDE77、BDE181和BDE205，内标指示物为4-F-BDE67、BDE118、BDE128和3-F-BDE153，检测方法采用安捷伦气相色谱-质谱联用仪。 7.根据权利要求6所述的一种同时检测昆虫体内多类痕量持久性卤代有机污染物的方法，其特征在于：所述PCBs和所述DDTs的分析方法为安捷伦气相色谱-质谱联用仪，在电子轰击离子源(EI)下，采用选择离子检测(SIM)模式；载气为氦气，流速为1.1mL/min，脉冲不分流进样，进样量为1μL；色谱柱为DB-5MS(60m×250μm i.d.×0.25μm)，进样口温度290℃，离子源温度为260℃；GC升温程序：初始温度为120℃，以6℃/min升温至180℃，然后1℃/min升温至240℃并保持1min，再以6℃/min升温至290℃并保持15min，最后5℃/min升温至310℃并保持5min。 8.根据权利要求6所述的一种同时检测昆虫体内多类痕量持久性卤代有机污染物的方法，其特征在于： 3～7溴代单体的低溴代PBDEs，DP和OBFRs的分析采用安捷伦气相色谱-质谱联用仪，在负化学电离(NCI)下，选择SIM模式完成；使用DB-XLB色谱柱(30m×250μm i.d.×0.25μm)进行分离，柱流速为1mL/min。离子源压力为2.5×10-3Pa，采用无分流进样，进样量为1μL，进样口和离子源温度分别为290℃和200℃，界面温度280℃；GC升温程序：初始温度为110℃并保持1min，以8℃/min升温至180℃并保持1min，然后以2℃/min升温至240℃并保持5min，再以2℃/min升温至280℃并保持15min，最后10℃/min升温至300℃并保持15min；对于8～10溴代单体的高溴代PBDEs和DBDPE的分析采用岛津气相色谱-质谱联用仪，在负化学电离(NCI)下，选择SIM模式完成；使用DB-5HT色谱柱(15m×0.25mm i.d.×0.10μm)进行分离，柱流速为1mL/min；GC升温程序：初始温度为110℃并保持5min，以20℃/min升温至200℃并保持4.5min，然后20℃/min升温至310℃并保持20min。 9.根据权利要求6所述的一种同时检测昆虫体内多类痕量持久性卤代有机污染物的方法，其特征在于：所述CPs的分析采用安捷伦气相色谱-质谱联用仪，在电子捕获负化学电离(ENCI)下，选择SIM模式完成。使用DB-5HT色谱柱(15m×250μm i.d.×0.1μm)进行分离，柱流速为1.5mL/min。采用无分流进样，进样量为1μL，进样口和离子源温度分别为250℃和200℃，界面温度280℃。GC升温程序：初始温度为80℃并保持3min，以25℃/min升温至160℃并保持6min，然后以20℃/min升温至300℃并保持15min。 10.根据权利要求6所述的一种同时检测昆虫体内多类痕量持久性卤代有机污染物的方法，其特征在于：所述HBCDs和TBBPA的分析采用安捷伦液相色谱-质谱联用仪，在ESI负离子模式下，选择多反应监测模式(MRM)完成；使用XDB-C18色谱柱(50mm×4.6mm i.d.×1.8mm)进行分离，柱流速为0.3mL/min，柱温为35℃，进样量为10μL。流动相A为体积比为1∶9的甲醇水溶液，流动相B为乙腈，洗脱梯度为0min 70％A和30％B，5min 10％A和90％B，10min 70％A和30％B。
所属类别：	发明专利