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原文传递捕获筛及其制备方法

专利名称：	捕获筛及其制备方法
摘要：	本发明涉及一种捕获筛，包括筛网骨架和设置于所述筛网骨架上的捕获物，所述捕获物能够与目标细胞或生物分子特异性结合，所述筛网骨架具有金属原子，所述的筛网骨架和所述捕获物之间通过巯基化物质连接，其中巯基化物质与所述筛网骨架通过反应形成金属‑硫键而结合，巯基化物质与所述捕获物通过反应形成酰胺键而结合；所述巯基化物质为巯基化海藻酸钠和巯基化透明质酸中的一种或两种的组合。本发明的捕获筛在筛网骨架表面通过金属‑硫键连接有巯基化物质，并通过在巯基化物质与捕获物之间形成酰胺键，实现将捕获物通过巯基化物质连接至筛网骨架上，且采用了巯基化海藻酸钠或巯基化透明质酸，在保证了较高的捕获效率的前提下，后续很方便的将捕获的物质洗脱。
专利类型：	发明专利
申请人：	上海邦先医疗科技有限公司
发明人：	颜菁;相鸿坤;杨天成
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T05:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T19:00:00+0805
申请号：	CN202010146153.2
公开号：	CN111175503A
代理机构：	苏州创元专利商标事务所有限公司
代理人：	汪青;俞春雷
分类号：	G01N33/569;C12N5/09;G;C;G01;C12;G01N;C12N;G01N33;C12N5;G01N33/569;C12N5/09
申请人地址：	201203 上海市浦东新区中国(上海)自由贸易试验区蔡伦路781号708室
主权项：	1.一种捕获筛，包括筛网骨架和设置于所述筛网骨架上的捕获物，所述捕获物能够与目标细胞或生物分子特异性结合，其特征在于，所述筛网骨架具有金属原子，所述的筛网骨架和所述捕获物之间通过巯基化物质连接，其中巯基化物质与所述筛网骨架通过反应形成金属-硫键而结合，巯基化物质与所述捕获物通过反应形成酰胺键而结合；所述巯基化物质为巯基化海藻酸钠和巯基化透明质酸中的一种或两种的组合。 2.根据权利要求1所述的捕获筛，其特征在于，所述捕获物上具有氨基，所述巯基化物质上具有羧基，所述捕获物与所述巯基化物质通过氨基和羧基反应形成酰胺键而结合。 3.根据权利要求1所述的捕获筛，其特征在于，所述巯基化物质的巯基化率为20~30%。 4.根据权利要求3所述的捕获筛，其特征在于，所述巯基化物质的巯基化率为25~30%。 5.根据权利要求1或3所述的捕获筛，其特征在于，所述巯基化物质的分子量为5kDa~35kDa。 6.根据权利要求4所述的捕获筛，其特征在于，所述巯基化物质的分子量为6kDa~34kDa。 7.根据权利要求6所述的捕获筛，其特征在于，所述巯基化物质的巯基化率为25~30%，所述巯基化物质的分子量为6kDa~34kDa。 8.根据权利要求1所述的捕获筛，其特征在于，所述金属原子为金原子，所述金属-硫键为金-硫键。 9.根据权利要求1所述的捕获筛，其特征在于，所述巯基化物质是由海藻酸钠和/或透明质酸与含有氨基的二硫代化合物在羧基活化剂的存在下反应后的产物经二硫键还原剂还原后得到。 10.根据权利要求9所述的捕获筛，其特征在于，所述海藻酸钠和/或透明质酸的分子量为5kDa~40kDa，所述的含有氨基的二硫代化合物为3,3'-二硫代二(丙酸肼)，所述羧基活化剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺，所述二硫键还原剂为三(2-羰基乙基)磷盐酸盐。 11.根据权利要求9或10所述的捕获筛，其特征在于，含有氨基的二硫代化合物与海藻酸钠和/或透明质酸的摩尔比为3~5：1；所述二硫键还原剂、羧基活化剂与海藻酸钠和/或透明质酸的摩尔比为15~16：1.5~2.5：1。 12.根据权利要求1所述的捕获筛，其特征在于，所述捕获物为上皮细胞粘附分子抗体，所述捕获筛用于捕获循环肿瘤细胞。 13.一种如权利要求1-12任意一项所述的捕获筛的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将筛网骨架与含有巯基化物质的溶液接触，所述筛网骨架上的金属原子与巯基化物质反应，使巯基化物质与筛网骨架上的金属原子连接；之后将连接有巯基化物质的筛网骨架与含有捕获物的溶液接触，使捕获物与巯基化物质连接，得到捕获筛。 14.根据权利要求13所述的捕获筛的制备方法，其特征在于，所述含有巯基化物质的溶液还包含三(2-羰基乙基)磷盐酸盐，且所述巯基化物质与三(2-羰基乙基)磷盐酸盐的质量比为1~2.5：1。 15.根据权利要求13所述的捕获筛的制备方法，其特征在于，在加入捕获物溶液前，向连接有巯基化物质的筛网骨架上加入活化试剂并进行孵育；所述活化试剂为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺中的一种或两种的组合。
所属类别：	发明专利