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原文传递与肝脏损伤、肝细胞凋亡相关特异蛋白分子标志物筛选方法

专利名称：	与肝脏损伤、肝细胞凋亡相关特异蛋白分子标志物筛选方法
摘要：	与肝脏损伤、肝细胞凋亡异常的蛋白分子标志物筛选方法，包括以下步骤：CBS小鼠对照组和实验组肝脏组织中PSMD10的筛选；人源肝细胞中PSMD10的表达验证；PSMD10干扰片段转染细胞肝细胞凋亡蛋白cleaved caspase3和cleaved caspase12的改变；PSMD10干扰片段转染细胞流式细胞术肝细胞凋亡率的改变；小鼠肝脏组织中ERs的检测；小鼠血清中肝功能的检测。本发明建立了由PSMD10、cleaved caspase3和cleaved caspase12组成的在HHcy诱导肝脏损伤，肝细胞凋亡检测中蛋白靶标，该方法简单可靠，容易推广。
专利类型：	发明专利
申请人：	宁夏医科大学总医院
发明人：	张慧萍;姜怡邓;徐龙;吴欣妍;焦运;马胜超
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T22:00:00+0805
申请号：	CN201911354334.8
公开号：	CN111189808A
代理机构：	宁夏合天律师事务所
代理人：	郭立宁
分类号：	G01N21/64;G01N15/14;G01N33/573;G01N33/68;C12Q1/6883;G;C;G01;C12;G01N;C12Q;G01N21;G01N15;G01N33;C12Q1;G01N21/64;G01N15/14;G01N33/573;G01N33/68;C12Q1/6883
申请人地址：	750004 宁夏回族自治区银川市兴庆区胜利街804号
主权项：	1.一种与肝脏损伤、肝细胞凋亡异常的蛋白分子标志物筛选方法，其特征在于，高同型半胱氨酸血症诱导肝脏损伤相关的蛋白标志物包括PSMD10（26S蛋白酶体非腺嘌呤核苷三磷酸酶），cleaved caspase3（含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3），cleaved caspase12（含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶12）。 2.根据权利要求1所述的与肝脏损伤、肝细胞凋亡异常的蛋白分子标志物筛选方法，其特征在于，该筛选方法包括以下步骤：（1）CBS（胱硫醚-β-合成酶)小鼠对照组和实验组肝脏组织中PSMD10（26S蛋白酶体非腺嘌呤核苷三磷酸酶）的筛选；（2）人源肝细胞中PSMD10（26S蛋白酶体非腺嘌呤核苷三磷酸酶）的表达验证；（3）PSMD10（26S蛋白酶体非腺嘌呤核苷三磷酸酶）干扰片段转染细胞肝细胞凋亡蛋白cleaved caspase3（含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3）和cleaved caspase12（含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶12）的改变；（4）PSMD10（26S蛋白酶体非腺嘌呤核苷三磷酸酶）干扰片段转染细胞流式细胞术肝细胞凋亡率的改变；（5）小鼠肝脏组织中ERs（内质网应激）的检测；（6）小鼠血清中肝功能的检测；分析比较HHcy（高同型半胱氨酸血症）诱导肝脏损伤中靶蛋白表达改变，与生化检测肝脏功能的结果相比诊断肝脏损伤的特异性、敏感性等指标并进行评价。 3.根据权利要求2所述的与肝脏损伤、肝细胞凋亡异常的蛋白分子标志物筛选方法，其特征在于，CBS+/-+HMD （胱硫醚-β-合成酶基因敲除小鼠杂合子喂养高蛋氨酸饮食）组PSMD10（26S蛋白酶体非腺嘌呤核苷三磷酸酶）表达明显增加，且凋亡的表达明显升高。 4.根据权利要求2所述的与肝脏损伤、肝细胞凋亡异常的蛋白分子标志物筛选方法，其特征在于，PSMD10（26S蛋白酶体非腺嘌呤核苷三磷酸酶），cleaved caspase3（含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3）和cleaved caspase12（含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶12）.等基因联合组成肝损伤诊断方法的特异性和灵敏度均与生化诊断的结果一致。 5.权利要求1所述与肝脏损伤、肝细胞凋亡异常的蛋白分子标志物筛选方法，其特征在于，该方法应用在肝损伤疾病早期诊断过程中。
所属类别：	发明专利