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原文传递 一种TMB显色体系及其检测还原性物质的应用
专利名称: 一种TMB显色体系及其检测还原性物质的应用
摘要: 本发明公开了一种TMB显色体系及其检测还原性物质的应用,所述TMB显色体系由pH值为3.0~7.0的醋酸‑醋酸钠缓冲溶液、0.08~1.5mg/mL的Fe配合物水溶液、0.4~2.0mmol/L的TMB溶液组成,其中Fe配合物为Fe(Ⅲ)的邻菲啰啉或吡啶配合物。在无需过氧化氢存在的条件下,本发明显色体系中的Fe配合物氧化TMB产生蓝色氧化产物ox‑TMB,在652nm处产生最大紫外吸收。当向该体系中加入还原性物质谷胱甘肽、抗坏血酸等时,会与氧化产物ox‑TMB发生还原反应,使体系颜色变浅,且变浅的程度与还原性物质的浓度呈现正相关。因此,可实现这些还原性物质的比色检测。本发明显色体系无需强氧化剂的使用,检测时无需加热,具有操作简单、显色快速、灵敏度高、污染小、检出限低等优点。
专利类型: 发明专利
申请人: 陕西师范大学
发明人: 刘伟;张柳;侯越;吕聪聪
专利状态: 有效
申请日期: 1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期: 1900-01-20T22:00:00+0805
申请号: CN202010114473.X
公开号: CN111189823A
代理机构: 西安永生专利代理有限责任公司
代理人: 高雪霞
分类号: G01N21/78;G01N21/33;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/78;G01N21/33
申请人地址: 710062 陕西省西安市长安南路199号
主权项: 1.一种TMB显色体系,其特征在于:所述TMB显色体系由pH值为3.0~7.0的醋酸-醋酸钠缓冲溶液、0.08~1.5mg/mL的Fe配合物水溶液、0.4~2.0mmol/L的TMB溶液组成; 上述Fe配合物为是式A所示的Fe(Ⅲ)的邻菲啰啉配合物或式B所示的Fe(Ⅲ)的吡啶配合物: 2.根据权利要求1所述的TMB显色体系,其特征在于:所述Fe配合物水溶液的浓度为0.8~1.5mg/mL。 3.根据权利要求1所述的TMB显色体系,其特征在于:所述TMB溶液的浓度为0.8~1.2mmol/L。 4.根据权利要求1或3所述的TMB显色体系,其特征在于:所述TMB溶液是将3,3',5,5'-四甲基联苯胺用乙醇溶解后加去离子水制得。 5.根据权利要求1所述的TMB显色体系,其特征在于:所述醋酸-醋酸钠缓冲溶液的pH值为4.0~6.0。 6.权利要求1所述的TMB显色体系在还原性物质检测中的应用,所述的还原性物质为谷胱甘肽、抗坏血酸、半胱氨酸中任意一种。 7.根据权利要求6所述的TMB显色体系在还原性物质检测中的应用,其特征在于:将Fe配合物水溶液加入到醋酸-醋酸钠缓冲溶液中,然后加入TMB溶液,再加入不同浓度的还原性物质标准样品溶液,室温孵育5~20分钟后,通过紫外吸收光谱仪检测体系在652nm处的吸光度;其中,还原性物质为谷胱甘肽或半胱氨酸时,构建吸光度变化值与还原性物质浓度的线性关系,还原性物质为抗坏血酸时,构建吸光度与还原性物质浓度的线性关系;利用此线性关系检测未知浓度的还原性物质。 8.根据权利要求7所述的TMB显色体系在还原性物质检测中的应用,其特征在于:所述醋酸-醋酸钠缓冲溶液与TMB溶液、Fe配合物水溶液的体积比为20:1:5~20:1:10。
所属类别: 发明专利
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