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原文传递一种电化学发光适配体传感器及检测氯霉素的方法

专利名称：	一种电化学发光适配体传感器及检测氯霉素的方法
摘要：	本发明提供一种电化学发光适配体传感器及检测氯霉素的方法，首先将二维层状碳化钛、硝酸锌和甘氨酸在氩气气氛下热处理得到Ti3C2‑ZnO纳米复合材料，然后将其修饰在玻碳电极表面，通过静电吸附作用负载含有ACT TCA GTG AGT TGT CCC ACG GTC GGC GAG TCG GTG GTA G碱基序列的适配体，构建电化学发光适配体传感器(Aptamer/Ti3C2‑ZnO/GCE)，并基于该电化学发光适配体传感器来检测氯霉素。该方法的检测范围为0.1ng/mL～100ng/mL，最低检测限为0.019ng/mL。本发明检测氯霉素的操作简单、选择性好、检测成本低、灵敏度高。
专利类型：	发明专利
申请人：	常州大学
发明人：	秦明;蒋鼎;陈智栋
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T20:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T10:00:00+0805
申请号：	CN201911323033.9
公开号：	CN110988070A
代理机构：	常州市英诺创信专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	王美华
分类号：	G01N27/30;G01N27/48;G01N21/76;G;G01;G01N;G01N27;G01N21;G01N27/30;G01N27/48;G01N21/76
申请人地址：	213164 江苏省常州市武进区滆湖路1号
主权项：	1.一种电化学发光适配体传感器，其特征在于：所述电化学发光适配体传感器是由含有ACT TCA GTG AGT TGT CCC ACG GTC GGC GAG TCG GTG GTA G碱基序列的适配体负载于Ti3C2-ZnO纳米复合材料修饰的玻碳电极表面而成。 2.根据权利要求1所述的电化学发光适配体传感器，其特征在于：由如下方法制得： (1)将碳化钛、硝酸锌和甘氨酸在氩气气氛下热处理得到Ti3C2-ZnO纳米复合材料，然后将Ti3C2-ZnO纳米复合材料分散于水中，得分散液； (2)将玻碳电极抛光，依次用硝酸溶液、乙醇溶液和超纯水超声清洗，室温下吹干，获得前处理后的玻碳电极待用；用移液枪移取步骤(1)制得的分散液滴涂在前处理后的玻碳电极表面，自然晾干，得到所述Ti3C2-ZnO纳米复合材料修饰的玻碳电极，再通过静电吸附作用将所述适配体负载在Ti3C2-ZnO纳米复合材料修饰的玻碳电极表面，自然晾干，制得所述电化学发光适配体传感器。 3.根据权利要求2所述的电化学发光适配体传感器，其特征在于：步骤(1)所得分散液中Ti3C2-ZnO纳米复合材料的浓度为2mg/mL。 4.根据权利要求3所述的电化学发光适配体传感器，其特征在于：所述步骤(2)中分散液的移取量为6μL；将适配体负载在Ti3C2-ZnO纳米复合材料修饰的玻碳电极表面的方法为：首先向含有KCl、NaCl、MgCl2和EDTA的Tris-HCl缓冲溶液中加入所述适配体，配制适配体浓度为0.5～10μmol/L的适配体溶液，然后移取6μL的所述适配体溶液并将其滴涂在所述的Ti3C2-ZnO纳米复合材料修饰的玻碳电极表面。 5.根据权利要求4所述的电化学发光适配体传感器，其特征在于：所述适配体溶液中适配体的浓度为2.5μmol/L。 6.一种基于电化学发光适配体传感器检测氯霉素的方法，其特征在于：所述方法为：以如权利要求1至5中任一项所述的电化学发光适配体传感器作为工作电极，Ag/AgCl为参比电极，铂丝电极为对电极组成三电极体系，样品中的氯霉素被定量捕捉到传感器的表面，通过产生的发光信号用于检测。 7.根据权利要求6所述的基于电化学发光适配体传感器检测氯霉素的方法，其特征在于，具体步骤为：步骤1，含K2S2O8的PBS缓冲溶液的配制：用pH为7.4的0.1mol/L的PBS缓冲溶液配制含0.1mol/L K2S2O8的PBS缓冲溶液；步骤2，不同浓度的氯霉素标准溶液的配制：首先配制氯霉素溶液，然后将氯霉素溶液加入步骤1中的含K2S2O8的PBS缓冲溶液中，得到一系列不同浓度的氯霉素标准溶液，氯霉素标准溶液的浓度范围为0.1ng/mL～100ng/mL；步骤3，标准曲线的绘制：将所述电化学发光适配体传感器置于步骤2配制的不同浓度的氯霉素标准溶液中浸泡相同时间，使电化学发光适配体传感器结合氯霉素，然后取出后淋洗，作为工作电极，Ag/AgCl为参比电极，铂电极为对电极，组成三电极体系，以步骤1中的含K2S2O8的PBS缓冲溶液为电解液，在-2.0～0V的电化学窗口范围内，光电倍增管高压800V，扫速0.1V/s，进行循环伏安扫描，记录发光强度-时间曲线，建立电化学发光适配体传感器结合氯霉素前后的发光强度差值与氯霉素标准溶液中的氯霉素浓度对数值的线性关系，得到相应的线性回归方程；步骤4，样品中氯霉素的检测所述样品先过滤再用步骤1中的含K2S2O8的PBS缓冲溶液调节pH，然后放入电化学发光适配体传感器浸泡相同时间，使电化学发光适配体传感器结合氯霉素，然后取出后淋洗，作为工作电极，再采用步骤3方法检测发光强度，再根据线性回归方程计算出样品中氯霉素的浓度。 8.根据权利要求7所述的基于电化学发光适配体传感器检测氯霉素的方法，其特征在于：步骤3中所述的浸泡时间为20min。
所属类别：	发明专利