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原文传递一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法

专利名称：	一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法
摘要：	本发明涉及一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒及其制备方法，该试剂盒包含试剂A、试剂B和胸苷激酶1(TK1)校准品，其中试剂A为包被有抗胸苷激酶1(TK1)抗体的磁微粒混悬液，试剂B为碱性磷酸酶标记的抗胸苷激酶1(TK1)抗体酶结合物试剂。与现有技术相比，本发明提供了一种测定胸苷激酶1(TK1)含量的方法，利用本发明提供的试剂盒，根据双抗体夹心法的原理可以准确、灵敏、快速地测定样本中胸苷激酶1(TK1)的含量。
专利类型：	发明专利
申请人：	上海复星长征医学科学有限公司
发明人：	罗紫臣
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T22:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T21:00:00+0805
申请号：	CN201911332509.5
公开号：	CN111044724A
代理机构：	上海科盛知识产权代理有限公司
代理人：	蒋亮珠
分类号：	G01N33/573;G01N33/543;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/573;G01N33/543
申请人地址：	200444 上海市宝山区城银路830号
主权项：	1.一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，该试剂盒包含试剂A、试剂B和胸苷激酶1(TK1)校准品，其中试剂A为包被有抗胸苷激酶1(TK1)抗体的磁微粒混悬液，试剂B为碱性磷酸酶标记的抗胸苷激酶1(TK1)抗体酶结合物试剂。 2.根据权利要求1所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，所述的试剂A是由0.05-0.2mol/L的缓冲液、0.1％-0.5％防腐剂、1％-10％表面活性剂、0.01％-0.08％包被有TK1抗体的磁微粒配制而成。 3.根据权利要求1所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，所述的磁微粒为Fe2O3或Fe3O4磁性纳米粒子与有机高分子材料的复合体，在所述磁微粒表面含有一种或多种活性功能基团。 4.根据权利要求2或3所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，所述缓冲液选自磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、3-(N-吗啉基)丙磺酸缓冲液、2-(N-吗啉)乙磺酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液或羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液中的一种或多种；所述缓冲液的pH值为6～9；所述防腐剂选自叠氮化钠、N-甲基-异噻唑酮、N'-亚甲基-双[N'-(3-羟甲基-2,5-二酮-4-咪唑烷基)]脲或ProClin 300中的一种或多种；所述表面活性剂选自吐温20、吐温80、环氧乙烷-环氧丙烷嵌段共聚物或聚乙二醇辛基苯基醚；所述包被有TK1抗体的磁微粒为选择不同粒径和表面活性功能基团的磁微粒与TK1抗体形成的复合物，所述磁微粒表面的活性功能基团选自对甲苯磺酰基或羧基，所述的磁微粒的粒径为0.1-5μm。 5.根据权利要求1所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，所述的试剂B是由0.05-0.2mol/L的缓冲液、0.1％-0.5％防腐剂、1％-10％表面活性剂、1％-10％保护蛋白、0.1-1.0μg/ml碱性磷酸酶标记的TK1抗体酶结合物配制而成。 6.根据权利要求5所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，所述缓冲液选自磷酸盐缓冲液、三羟甲基氨基甲烷缓冲液、3-(N-吗啉基)丙磺酸缓冲液、2-(N-吗啉)乙磺酸缓冲液、硼酸盐缓冲液、甘氨酸缓冲液或羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液中的一种或多种；所述缓冲液pH值为6～9；所述防腐剂选自叠氮化钠、N-甲基-异噻唑酮、N'-亚甲基-双[N'-(3-羟甲基-2,5-二酮-4-咪唑烷基)]脲或ProClin 300中的一种或多种；所述表面活性剂选自吐温20、吐温80、十二烷基磺酸钠或聚乙二醇辛基苯基醚；所述保护蛋白选自酪蛋白酸钠或牛血清白蛋白；所述碱性磷酸酶标记的TK1抗体酶结合物为碱性磷酸酶和TK1抗体形成的复合物。 7.根据权利要求1所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，所述试剂A和试剂B中的TK1抗体为两种结合位点不同的单克隆抗体；两种TK1抗体选自兔抗多克隆抗体、羊抗多克隆抗体或鼠抗单克隆抗体。 8.根据权利要求1所述的一种胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒，其特征在于，所述试剂A和试剂B的体积比为1:5。 9.一种如权利要求1所述的胸苷激酶1磁微粒化学发光测定试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)试剂A的制备：在水中依次加入缓冲盐、表面活性剂、防腐剂，每次添加物料需要搅拌至完全溶解，调节pH值至6.0～9.0，然后过0.22μm滤膜得到试剂A稀释液，之后加入包被有TK1抗体的磁微粒得到试剂A； (2)试剂B的制备：在水中依次加入缓冲盐、表面活性剂、保护蛋白、防腐剂，每次添加物料需要搅拌至完全溶解，调节pH值至6.0～9.0，然后过0.22μm滤膜得到试剂B稀释液，之后加入碱性磷酸酶标记的TK1抗体酶结合物得到试剂B； (3)组成试剂盒：将上述制备的试剂A和试剂B按体积比R1：R2＝1:5分装入瓶组成试剂盒。
所属类别：	发明专利