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原文传递 一种植物组织半薄切片的制作方法
专利名称: 一种植物组织半薄切片的制作方法
摘要: 本发明公开了一种植物组织半薄切片的制作方法。所述植物组织半薄切片的制作方法包括如下步骤:选取植物组织依次经固定、脱水、预渗透、渗透、包埋、切片、烤片、脱树脂和染色;采用钢刀片进行所述切片;依次采用番红和固绿进行所述染色。本发明利用石蜡切片中常用的钢刀片为切片刀具,扩大了树脂切片的使用范围。本发明染色使用番红‑固绿复染的方法,与甲苯胺蓝染液相比,番红价格低于甲苯胺蓝的价格,储存要求也不高,在室温下即可保存,配置过程简便易行,不易产生沉淀,不同的组织结构呈现不同的颜色,可以更加明显的体现出组织的不同结构和成分,提高了切片的质量和图像效果。
专利类型: 发明专利
申请人: 中国科学院近代物理研究所
发明人: 刘瑞媛;李文建;金文杰;董喜存;周利斌
专利状态: 有效
申请日期: 1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期: 1900-01-20T08:00:00+0805
申请号: CN201911355631.4
公开号: CN111122267A
代理机构: 北京纪凯知识产权代理有限公司
代理人: 王春霞
分类号: G01N1/28;G01N1/30;G;G01;G01N;G01N1;G01N1/28;G01N1/30
申请人地址: 730000 甘肃省兰州市城关区南昌路509号中国科学院近代物理研究所
主权项: 1.一种植物组织半薄切片的制作方法,包括如下步骤: 选取植物组织依次经固定、脱水、预渗透、渗透、包埋、切片、烤片、脱树脂和染色; 采用钢刀片进行所述切片; 依次采用番红和固绿进行所述染色。 2.根据权利要求1所述的制作方法,其特征在于:所述切片得到的切片的厚度为3~7μm。 3.根据权利要求1或2所述的制作方法,其特征在于:采用所述番红进行染色的时间为12~16h; 所述番红染色后还包括采用水进行清洗脱色3~5次的步骤。 4.根据权利要求1-3中任一项所述的制作方法,其特征在于:采用所述固绿进行染色的时间为40~60min; 所述番红染色后还包括采用水进行清洗脱色4~6次的步骤。 5.根据权利要求1-4中任一项所述的制作方法,其特征在于:所述脱水的步骤如下:采用50~100%的乙醇水溶液进行逐级脱水,且采用50~95%的乙醇水溶液进行脱水一次,每个梯度放置1h;采用100%乙醇水溶液进行脱水两次,每次放置1h。 6.根据权利要求1-5中任一项所述的制作方法,其特征在于:所述预渗透采用的预渗透液由体积比为1:1的Technovit和乙醇组成; 所述渗透液由Technovit和HardenderⅠ组成,两者的配比为100mLTechnovit:1gHardenderⅠ; 所述预渗透的时间为2.5~4h,所述渗透的时间为20~24h。 7.根据权利要求1-6中任一项所述的制作方法,其特征在于:所述植物组织为叶片、根或茎秆。 8.根据权利要求1-7中任一项所述的制作方法,其特征在于:所述植物为高粱。
所属类别: 发明专利
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