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一种用于宫颈癌辅助诊断的免疫荧光双染试剂盒
| 专利名称： | 一种用于宫颈癌辅助诊断的免疫荧光双染试剂盒 |
| 摘要： | 本发明提供一种用于宫颈癌辅助诊断的免疫荧光双染试剂盒，所述试剂盒包括标记了葡聚糖的Ki67单克隆抗体和标记了葡聚糖的P16INK4A单克隆抗体组成的混合一抗工作液，DAPI染液。本发明试剂盒同时高效激发多色荧光，只需要一种激发光就能表现出所有的颜色，不需要切换波段，直接普通显微镜观察观测拍摄；减少了二抗的孵育过程，缩短了整个流程的操作时间；操作简单，灵敏度和准确度高。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 申请人： | 江苏美克医学技术有限公司 |
| 发明人： | 徐丽红;李文成;孙康俊;黄宝福 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 1900-01-20T00:00:00+0805 |
| 发布日期： | 1900-01-20T01:00:00+0805 |
| 申请号： | CN201911363146.1 |
| 公开号： | CN111089964A |
| 代理机构： | 上海盈盛知识产权代理事务所(普通合伙) |
| 代理人： | 孙佳胤 |
| 分类号： | G01N33/574;G01N33/577;G01N33/533;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/574;G01N33/577;G01N33/533 |
| 申请人地址： | 211800 江苏省南京市浦口区高新技术开发区江北新区新锦湖路3-1号二期D栋3层 |
| 主权项： | 1.一种用于宫颈癌辅助诊断的免疫荧光双染试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括标记了葡聚糖的Ki67单克隆抗体和标记了葡聚糖的P16INK4A单克隆抗体组成的混合一抗工作液，DAPI染液； 葡聚糖标记单克隆抗体通过以下方法制备： (1)将葡聚糖溶于磷酸盐缓冲溶液中，加入高碘酸钠进行氧化，避光30℃～37℃搅拌反应2-3小时后加入过量乙二醇终止；使用葡聚糖基质相同磷酸盐缓冲溶液进行透析过夜； (2)检测所需抗体磷酸盐缓冲溶液透析过夜； (3)将氧化葡聚糖和抗体混合反应后，加入适量氰基硼氢化钠避光反应时间为1.5-3小时，反应温度4℃-6℃； (4)加入适量乙二胺进行胺化反应后使用硼氢化钠还原，磷酸盐缓冲溶液透析过夜。 2.根据权利要求1所述的一种用于宫颈癌辅助诊断的免疫荧光双染试剂盒，其特征在于，Ki67单克隆抗体标记荧光素Pacific Green，P16INK4A单克隆抗体标记荧光素PacificOrange。 3.根据权利要求2所述的一种用于宫颈癌辅助诊断的免疫荧光双染试剂盒，其特征在于，标记荧光素时，使用磷酸盐缓冲液透析、纯化树脂柱纯化或者超滤离心管离心纯化中的一种来去除游离荧光素。 4.根据权利要求1所述的一种用于宫颈癌辅助诊断的免疫荧光双染试剂盒，其特征在于，工作液包括PH值为7.2-7.8的磷酸盐缓冲液。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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