专利名称: |
检测赭曲霉毒素A的电化学传感器和方法 |
摘要: |
本发明提供了一种利用特定碱基位点上标记电化学标记物(例如亚甲基蓝)的核酸适配体修饰的电极构建的电化学传感器和检测方法,可以实现快速灵敏检测赭曲霉毒素A。相应的核酸适配体利用末端标记的硫醇,核酸适配体被固定到金电极表面。通过考察一系列标记位点,优化出可使传感器产生灵敏信号变化的标记位点。通过测定电化学标记物的电化学信号变化可以实现对赭曲霉毒素A的检测。这种传感器操作简单、响应迅速、具有高灵敏度、而且可再生重复使用、具有高稳定性。利用制备的电化学传感器可以实现检测30pM赭曲霉毒素A,并可以用于复杂样品基质中赭曲霉毒素A的检测。 |
专利类型: |
发明专利 |
申请人: |
中国科学院生态环境研究中心 |
发明人: |
赵强;王超 |
专利状态: |
有效 |
申请日期: |
1900-01-20T00:00:00+0805 |
发布日期: |
1900-01-20T17:00:00+0805 |
申请号: |
CN201911373640.6 |
公开号: |
CN111024791A |
代理机构: |
中科专利商标代理有限责任公司 |
代理人: |
崔亚松;柴云峰 |
分类号: |
G01N27/327;G01N27/48;G;G01;G01N;G01N27;G01N27/327;G01N27/48 |
申请人地址: |
100085 北京市海淀区双清路18号 |
主权项: |
1.一种检测赭曲霉毒素A的电化学传感器,其特征在于,包括:利用赭曲霉毒素A核酸适配体修饰的电极,其中所述赭曲霉毒素A核酸适配体带有电化学标记物,所述电化学标记物位于所述赭曲霉毒素A核酸适配体的特定碱基上以增强检测信号。 2.根据权利要求1所述检测赭曲霉毒素A的电化学传感器,其中,所述赭曲霉毒素A核酸适配体为特异性结合赭曲霉毒素A的DNA序列。 3.根据权利要求1所述检测赭曲霉毒素A的电化学传感器,其中,所述电化学标记物为亚甲基蓝或二茂铁。 4.根据权利要求1所述检测赭曲霉毒素A的电化学传感器,其中,所述特定碱基选自A、G、C或T。 5.根据权利要求1所述检测赭曲霉毒素A的电化学传感器,其中,所述DNA序列包括SEQID NO:1或由SEQ ID NO:1组成,其5’端或3’端利用硫醇分子修饰,所述电化学标记物位于所述序列的第30位的T碱基上,或者所述DNA序列包括在SEQ ID NO:1的一端或两端减少或增加一个或多个碱基的序列,所述电化学标记物位于与SEQ ID NO:1的上述T碱基对应的T碱基上。 6.根据权利要求1所述检测赭曲霉毒素A的电化学传感器,其中,所述电极为金电极或具有金涂层或纳米金材料修饰的电极。 7.一种权利要求1-6任一项所述电化学传感器的制备方法,包括:将带有电化学标记物标记的赭曲霉毒素A核酸适配体固定在电极上。 8.根据权利要求7所述的电化学传感器的制备方法,其中,所述电极为经过表面处理的金电极,所述表面处理包括将所述金电极打磨(例如利用0.01-0.1μm的氧化铝粉打磨)后使用超纯水超声清洗,再进行电化学清洗。 9.一种利用权利要求1-6任一项所述电化学传感器检测赭曲霉毒素A的方法,包括将所述电极在含有待测样品的反应缓冲溶液中温育2-5分钟后,采用电化学法进行测定; 优选地,所述反应缓冲溶液为Tris-HCl缓冲溶液,其含有Ca2+或Mg2+(例如CaCl2或MgCl2,其浓度为1-100mM,优选为10-30mM)中的一种或两种和Na+或K+(例如NaCl或KCl,其为浓度为50-500mM,优选为100-300mM)中的一种或两种,pH为7-8(例如7.2、7.5或7.8)。 10.根据权利要求9所述的方法,其中,所述电化学法选自方波伏安法、差分脉冲伏安法或交流伏安法。 |
所属类别: |
发明专利 |