详情

原文传递一种宠物粮中使用腐败肉的检测方法

专利名称：	一种宠物粮中使用腐败肉的检测方法
摘要：	本发明公开了一种宠物粮中使用腐败肉的检测方法，包括以下：步骤a，制备第一样液；步骤b，制备第二样液；步骤c，固相萃取，制备第三样液；步骤d，进行第一次现象观察，及第二次现象观察；步骤e，结果判定。本发明的检测方法将宠物粮中的挥发性盐基氮通过固相萃取的方式富集提取，并与苯磺酰氯、氢氧化钠和盐酸依次进行两步反应，通过两次观察，根据两次反应是否有沉淀生成，进行定性判定，对宠物粮是否使用腐败肉进行快速检测，分析手段简便、专属性强、灵敏度高、现象明显，便于定性判定，不需要使用大型分析仪器及剧毒或致癌等危险试剂，对实验环境及实验人员的危害低，适用于对宠物粮进行大规模抽检或消费者自行检测。
专利类型：	发明专利
申请人：	广州智汇生物科技有限公司;广州爱尚宠生物科技有限公司;广州汇标检测技术中心
发明人：	李丰;毓志超;周建;文永贤
专利状态：	有效
申请日期：	2022-03-01T00:00:00+0800
发布日期：	2022-03-25T00:00:00+0800
申请号：	CN202210189073.4
公开号：	CN114235798A
代理机构：	广州文智专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	梁媛
分类号：	G01N21/82;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/82
申请人地址：	510000 广东省广州市黄埔区科丰路31号G2栋319房;;
主权项：	1.一种宠物粮中使用腐败肉的检测方法，包括以下：步骤a，称取1g±0.1待测宠物粮样品，粉碎后置于离心管中，加入纯净水、氯化钠溶液，震荡，离心，取上层清液，得到第一样液；步骤b，向所述第一样液中加入柠檬酸溶液、聚酰胺粉，震荡，加入甲醇-乙酸溶液，并补充加入纯净水，使溶液体积至6ml，震荡，离心，取上层清液，得到第二样液；步骤c，使用活化液对固相萃取柱进行活化处理，将所述第二样液加入活化后的固定萃取柱中进行上样处理，使用淋洗液对上样后的固相萃取柱进行淋洗，并收集洗脱液，得到第三样液，所述活化液中甲醇与水的体积比为5:95，所述淋洗液中乙酸乙酯与甲醇的体积比为95:5，并按照质量体积分数0.5%向其中添加三乙胺；步骤d，将所述第三样液使用氮气吹干，使用氢氧化钠的乙醇溶液进行复溶，置于离心管或透明西林瓶中，得到待测样液，向所述待测样液中逐滴加入苯磺酰氯的乙醇溶液，每加入1滴苯磺酰氯的乙醇溶液后轻摇1-2次，累计加入10滴苯磺酰氯的乙醇溶液后静置，进行第一次现象观察，再加入2ml纯净水，混匀后，逐滴加入盐酸溶液，每加入1滴盐酸溶液后轻摇1-2次，累计加入10滴盐酸溶液后静置，进行第二次现象观察；步骤e，结果判定：第一次现象观察时，有沉淀产生，第二次现象观察时，沉淀量增多，判定为阳性，即所述待测宠物粮样品中有使用腐败肉；第一次现象观察时无沉淀产生，第二次现象观察时无沉淀产生，或两次现象观察时仅有一次产生沉淀，判定为阴性，即所述待测宠物粮样品中没有使用腐败肉。 2.根据权利要求1所述的一种宠物粮中使用腐败肉的检测方法，其特征在于，所述待测宠物粮样品为干性宠物粮、半湿性宠物粮或湿性宠物粮中的一种。 3.根据权利要求1所述的一种宠物粮中使用腐败肉的检测方法，其特征在于，所述步骤a中氯化钠溶液为20℃条件下配制的饱和氯化钠溶液。 4.根据权利要求1所述的一种宠物粮中使用腐败肉的检测方法，其特征在于，所述步骤b中的柠檬酸溶液是质量体积分数为20%的柠檬酸溶液。 5.根据权利要求1所述的一种宠物粮中使用腐败肉的检测方法，其特征在于，所述步骤b中甲醇-乙酸溶液中甲醇与乙酸的体积为3:2。 6.根据权利要求1所述的一种宠物粮中使用腐败肉的检测方法，其特征在于，所述固相萃取柱的上层填料为100mg石墨化碳黑，所述固相萃取柱的下层填料为100mg中性氧化铝，所述固相萃取柱的柱管尺寸为3ml，所述固相萃取柱的填料粒径为120-150μm，所述固相萃取柱的填料的平均孔径为120Å。 7.根据权利要求1所述的一种宠物粮中使用腐败肉的检测方法，其特征在于，所述步骤c中上样处理的上样流速为1ml/min，所述淋洗液以1ml/min的淋洗流速对所述固相萃取柱进行淋洗。 8.根据权利要求1所述的一种宠物粮中使用腐败肉的检测方法，其特征在于，所述步骤d中氢氧化钠的乙醇溶液为1mol/L的氢氧化钠的乙醇溶液，所述苯磺酰氯的乙醇溶液为0.2mol/L的苯磺酰氯的乙醇溶液。 9.根据权利要求1所述的一种宠物粮中使用腐败肉的检测方法，其特征在于，所述步骤d中盐酸溶液是质量分数为36%~38%的盐酸溶液。 10.根据权利要求1所述的一种宠物粮中使用腐败肉的检测方法，其特征在于，所述步骤a中离心转速为10000rpm/min，所述步骤b中离心转速为4000rpm/min。
所属类别：	发明专利