详情

原文传递一种基于乏氧响应的铂超纳米粒子的尿液检测方法和应用

专利名称：	一种基于乏氧响应的铂超纳米粒子的尿液检测方法和应用
摘要：	本发明公开了一种基于乏氧响应的铂超纳米粒子的尿液检测方法及其应用。本发明的铂超纳米粒子PNCA由氨基化后的超小的铂纳米簇与乏氧响应的4,4’‑二羧酸偶氮苯azo通过EDC/NHS反应共价连接而成，并在其表面包裹上一层透明质酸HA后，该纳米粒子可特异性地靶向肿瘤部位。之后，在肿瘤部位乏氧环境还原酶的作用下，PNCA纳米粒子可还原降解为许多小的PtNCs，重新进入血液循环，由于其粒径小于肾脏可清除的临界值5.5nm，因此可从肾脏排泄到尿液中进行疾病状态的检测。由于PNCA纳米粒子的优异的乏氧响应效果以及PtNCs高效的肾脏清除效果，使得本发明在活体应用上，优势明显。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	南京大学
发明人：	宋玉君;徐琴
专利状态：	有效
申请日期：	2021-12-01T00:00:00+0800
发布日期：	2022-03-04T00:00:00+0800
申请号：	CN202111456866.X
公开号：	CN114137189A
代理机构：	江苏德善律师事务所
代理人：	何红梅
分类号：	G01N33/48;G01N31/10;G;G01;G01N;G01N33;G01N31;G01N33/48;G01N31/10
申请人地址：	210033 江苏省南京市栖霞区仙林大道163号
主权项：	1.一种基于乏氧响应的铂超纳米粒子的制备方法，其特征在于包括如下步骤： (1)将超小的铂纳米簇PtNCs表面进行氨基化，然后借助乏氧响应的4,4’-二羧酸偶氮苯azo与铂纳米簇PtNCs共价连接得到铂超纳米粒子PNCA，其中4,4’-二羧酸偶氮苯azo上的羧基是通过EDC/NHS反应活化后与PtNCs进行共价连接； (2)并在静电吸附的作用下，在PNCA纳米粒子最外层包裹上可以特异性靶向肿瘤细胞表面CD44受体的透明质酸HA，制得PNCAH铂超纳米粒子。 2.根据权利要求1所述的基于乏氧响应的铂超纳米粒子的制备方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述的铂纳米簇PtNCs为利用六水合氯铂酸和柠檬酸三钠通过一锅热法合成，其中柠檬酸三钠在反应中起到还原剂和保护剂的角色，反应中用到的六水合氯铂酸的浓度为1mM，柠檬酸三钠的浓度为3.88mM，反应温度为100℃。 3.根据权利要求2所述的基于乏氧响应的铂超纳米粒子的制备方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述的氨基化过程采用的分子为巯基乙胺，同时氨基化的过程中还加入了巯基乙醇防止铂纳米簇发生聚集，氨基化反应时巯基乙胺的浓度为0.4mM，巯基乙醇的浓度为0.6mM，反应时间为3h。 4.根据权利要求1所述的基于乏氧响应的铂超纳米粒子的制备方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述的EDC/NHS活化过程，EDC的中文名为1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，NHS的中文名为N-羟基琥珀酰亚胺，EDC反应时的浓度是30mM，NHS反应时的浓度为3.3mM，活化时间为2h；所述的铂纳米簇PtNCs与4,4’-二羧酸偶氮苯azo的质量比为90-100:1-6，反应时间为12h。 5.根据权利要求1所述的基于乏氧响应的铂超纳米粒子的制备方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述的HA的包裹过程，HA与加入的PNCA纳米粒子的质量比为1:2，反应时间为2h。 6.权利要求1至5所述的基于乏氧响应的铂超纳米粒子的尿液检测方法，其特征在于包括如下步骤：当把具有靶向效果的铂超纳米粒子递送进细胞或者小鼠，可在肿瘤部位乏氧解离为许多小的PtNCs，重新进入血液循环，进而可以经肾脏排泄到尿液中进行肿瘤状态的检测。 7.根据权利要求6所述的基于乏氧响应的铂超纳米粒子的尿液检测方法，其特征在于：所述的检测过程，在肿瘤乏氧环境中，N＝N键被破坏，PNCA纳米粒子发生解离释放出PtNCs，PtNCs在体内的最佳肾脏代谢时间为4h。 8.根据权利要求7所述的基于乏氧响应的铂超纳米粒子的尿液检测方法，其特征在于：利用PtNCs优异的过氧化氢酶活性，能够催化过氧化氢产生氧气进行检测，从而进行疾病状态的读出。 9.根据权利要求7所述的基于乏氧响应的铂超纳米粒子的尿液检测方法，其特征在于：细胞使用的是MDA-MB-231三阴性乳腺癌细胞，小鼠为BALB/c裸鼠，当把该铂超纳米粒子递送进细胞或者小鼠，实现纳米材料在肿瘤部位的解离以及肿瘤状态的诊断。 10.权利要求1所述的铂超纳米粒子PNCAH作为外源性生物标志物的应用。
所属类别：	发明专利