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原文传递一种以聚乙烯亚胺稳定的纳米铂粒子检测葡萄糖的方法

专利名称：	一种以聚乙烯亚胺稳定的纳米铂粒子检测葡萄糖的方法
摘要：	一种以聚乙烯亚胺稳定的纳米铂粒子检测葡萄糖的方法，其主要是先通过将聚乙烯亚胺溶液和四氯铂酸钾共孵育，加入硼氢化钠还原而制备成聚乙烯亚胺稳定的纳米铂粒子，取离心管将葡萄糖氧化酶与不同浓度梯度葡萄糖溶液混合，产生过氧化氢；另取离心管，加入聚乙烯亚胺稳定的纳米铂粒子的水溶液、四甲基联苯胺和缓冲溶液进行反应；两个离心管共混后，无色的四甲基联苯胺被氧化成蓝色氧化态四甲基联苯胺；在葡萄糖浓度为0.1～1.0mmol/L，建立652nm处氧化态四甲基联苯胺的吸光度与葡萄糖浓度的线性关系。本发明具有工艺简单，条件温和，效率高，检测成本低，反应易于控制等优点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河北;13
申请人：	燕山大学
发明人：	王龙刚;赖翔;赵禹;崔艳帅
专利状态：	有效
发布日期：	2019-01-01T00:00:00+0800
申请号：	CN201810057228.2
公开号：	CN108375573A
代理机构：	秦皇岛一诚知识产权事务所(普通合伙) 13116
代理人：	刘建年
分类号：	G01N21/78(2006.01)I;G01N21/33(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/78;G01N21/33
申请人地址：	066004 河北省秦皇岛市海港区河北大街西段438号
主权项：	1.一种以聚乙烯亚胺稳定的纳米铂粒子检测葡萄糖的方法，其特征在于：(1)聚乙烯亚胺(PEI)稳定的纳米铂粒子的制备：按1mL去离子水中加入0.5～1.0mg PEI，将PEI加入去离子水中，再加入1mol/L的盐酸调至pH＝4,按PEI与四氯铂酸钾的摩尔比1：25～150的比例，将四氯铂酸钾加入PEI水溶液，然后在20℃，转速500转/分钟的金属浴中孵育15～25min；再按PEI与硼氢化钠的摩尔比1：125～750的比例，将硼氢化钠溶于0.3mol/L的氢氧化钠水溶液中配成1mg/mL溶液，将硼氢化钠溶液加入到上述孵育好的溶液中，在上述同样的金属浴条件下孵育10～15min；然后再按盐酸与氢氧化钠的摩尔比1：1的比例，将1mol/L的盐酸加入到上述溶液中，调节溶液的pH至中性，溶液变色，最后在金属浴孵育2～3h，制得聚乙烯亚胺稳定的纳米铂粒子，即PEI‑Ptn，n代表平均每一个PEI分子中稳定的铂原子数；(2)葡萄糖检测：按葡萄糖氧化酶与葡萄糖的摩尔比1：12～120的比例，将葡萄糖氧化酶(GOx)分别与浓度为0.1～1.0mmol/L葡萄糖溶液混合，在50℃下反应30min，反应产生过氧化氢(H2O2)；另取离心管，配置浓度为4～10μmol/L的PEI‑Ptn溶液和6mmol/L的3,3’,5,5’‑四甲基联苯胺(TMB)溶液，按PEI‑Ptn:TMB的摩尔比为1：450～180的比例，将PEI‑Ptn、TMB加入到400μL，0.2mol/L，pH＝4.0的醋酸‑醋酸钠缓冲溶液，30℃下反应10min。将上述的PEI‑Ptn、TMB和醋酸‑醋酸钠混合缓冲溶液作为显色剂，分别加入到每个葡萄糖溶液中，30℃下反应20min，显色产物溶液颜色为蓝色，随葡萄糖浓度增大颜色变深，用紫外可见分光光度计在652nm下测量吸光度，并以吸光度为纵坐标，葡萄糖的浓度作为横坐标，绘制标准曲线并得出标准曲线方程，吸光度增大的程度与葡萄糖浓度在0.1～1.0mmol/L为线性关系。
所属类别：	发明专利