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原文传递一种测定柑桔汁产品中酚类化合物及其前处理的方法

专利名称：	一种测定柑桔汁产品中酚类化合物及其前处理的方法
摘要：	本发明公开了一种测定柑桔汁产品中酚类及其前处理的方法，分析方法包括以下步骤：选出成熟的柑桔果实，处理得到果汁，所述果汁经过前处理后得到样品待测；采用高分辨率HPLC串联紫外和荧光检测器检测待测样品；对检测结果进行定量和定性分析；所述酚类为酚酸类、类黄酮苷类、甲氧基黄酮类、香豆素类以及呋喃香豆素类化合物。本发明通过对果汁分部提取，即离心处理后的上清液进行固相萃取富集、离心沉淀进行溶剂萃取，两者合并后进一步浓缩，再通过四元梯度高效液相色谱分离技术，结合紫外光电二极管阵列和荧光检测技术，可同时对柑桔汁产品中含有的多种酚类进行定性、定量分析，并鉴定柑桔类产品是否存在混合掺假的情况。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	重庆;50
申请人：	西南大学
发明人：	李贵节;程玉娇;韩冷;翟雨淋
专利状态：	有效
申请日期：	2021-11-17T00:00:00+0800
发布日期：	2022-03-11T00:00:00+0800
申请号：	CN202111364382.2
公开号：	CN114166961A
代理机构：	成都时誉知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	汪林
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/74
申请人地址：	400000 重庆市北碚区天生路2号
主权项：	1.一种测定柑桔汁产品中酚类的方法，其特征在于，包括以下步骤： S1、制取样品选出成熟的柑桔果实，处理得到果汁，所述果汁经过前处理后得到样品待测； S2、采用高分辨率HPLC分离待测样品成分-紫外和荧光检测各成分色谱条件为：色谱柱为AgilentPoroshell120EC-C8column(4.6×150mm,2.7μm)，保护柱为EC-C18guardcolumn(4.6×5mm,2.7μm)，流动相A为0.05%的磷酸溶液、流动相B为甲醇，流动相C为乙腈，流动相D为体积比为水：乙腈：四氢呋喃=55:20:25的混合溶液，流速为1ml/min，柱温保持在30℃；分离梯度由以下线性步骤组成：0-7min：83%流动相A，3%流动相B，2%流动相C和12%流动相D；7-8分钟：83%流动相A、3-0%流动相B、2-5%流动相C和12%流动相D；8-16分钟：83%流动相A、5%流动相C和12%流动相D；16-17分钟：83-81%流动相A、5-9%流动相C和12-10%流动相D；17-19分钟：81%流动相A、9%流动相C和10%流动相D；19-23分钟：81-79%流动相A、9-13%流动相C和10-8%流动相D；23-32分钟：79%流动相A、13%流动相C和8%流动相D；32-38分钟：79-69%流动相A、13-23%流动相C和8%流动相D；38-43分钟：69%流动相A、23-31%流动相C和8-0%流动相D；43-58分钟：69-0%流动相A、0-3%流动相B、31-97%流动相C；58-65分钟：3%流动相B和97%流动相C；65-90分钟：重新建立初始条件；检测器设置：紫外-可见光电二极管阵列检测器设置为扫描210-400nm，并在330、284、270、250 nm处监测紫外线响应；激发-发射荧光检测器设置为在340nm处激发，并记录340和560nm之间的发射光谱，在400、450和500nm处同时监测三个FL发射信号；所述酚类为酚酸、类黄酮苷、甲氧基黄酮、香豆素、呋喃香豆素类化合物。 2.根据权利要求1所述的一种测定柑桔汁产品中酚类的方法，其特征在于：所述样品需要进行前处理，所述前处理包括以下步骤： S11、选取成熟柑桔果实，通过柑橘提取机提取果汁，其后将得到的果汁过80目筛网精滤，所得精滤果汁快速冷冻并存储于-20℃下备用，或精滤果汁先经95℃巴氏灭菌30秒，再冻存于-20℃备用； S12、取冻存的果汁在13362g、4℃下离心10min； S13、其后取上清液通过Sep-Pak C-8 SPE柱，在氮气加压条件下，用4.5 mL磷酸/乙腈溶液缓慢冲洗SPE柱，随后通过氮气吹扫收集柱内残留的液体，得到含有上清液中的类黄酮苷、酚酸和其他极性分子的洗脱液，命名为F1；其后通过乙酸乙酯洗脱柱内保留的酚类物质；同时向离心后的果肉中加入乙腈，在20℃下超声5min，重复超声处理3次；其后将乙酸乙酯提取液和全部乙腈提取液合并，命名为F2；其后将F1和F2合并； S14、其后将合并的提取液在温度为40℃下的氮气流中干燥，其后加入甲醇，在超声条件为300W、2040℃的超声条件下超声5分钟，并用甲醇定容至1.8mL，其后通过0.20µm的过滤器过滤形成待测样品，并置于-20℃下冻存。 3.根据权利要求2所述的一种测定柑桔汁产品中酚类的方法，其特征在于：所述磷酸/乙腈溶液中磷酸和乙腈的体积比为73:27，pH为5.5，洗脱速率为2mL/min。 4.根据权利要求2所述的一种测定柑桔汁产品中酚类的方法，其特征在于：所述乙酸乙酯的洗脱速率为1mL/min。
所属类别：	发明专利