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原文传递血浆中胺碘酮和去乙基胺碘酮的检测方法

专利名称：	血浆中胺碘酮和去乙基胺碘酮的检测方法
摘要：	本发明提供了一种血浆中胺碘酮和去乙基胺碘酮的检测方法，涉及药物检测的技术领域。该检测方法包括将经过前处理的样本使用高效液相色谱检测，将检测值带入标准曲线中，计算得到血浆样本中胺碘酮和去乙基胺碘酮的含量；前处理包括使用萃取剂萃取待测样本，萃取剂包括甲醇和乙腈。该检测方法缓解了现有技术中存在的血浆中胺碘酮和去乙基胺碘酮检测方法复杂耗时，检测成本较高的问题。
专利类型：	发明专利
申请人：	北京豪思生物科技股份有限公司;江苏豪思睦可生物科技有限公司;湖南豪思生物科技有限公司
发明人：	应洪波;张新星;栗琳;苏营雪;丁沛瑜;郑佳;周继福;薛元强;周立;丁亮
专利状态：	有效
申请日期：	2022-11-04T00:00:00+0800
发布日期：	2023-01-24T00:00:00+0800
申请号：	CN202211374694.6
公开号：	CN115639301A
代理机构：	北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	张金铭
分类号：	G01N30/06;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/06;G01N30/86
申请人地址：	102200 北京市昌平区回龙观镇科学园路7号院1号楼1层102-2;;
主权项：	1.血浆中胺碘酮和去乙基胺碘酮的检测方法，其特征在于，包括将经过前处理的样本使用高效液相色谱检测，将检测值带入标准曲线中，计算得到血浆样本中胺碘酮和去乙基胺碘酮的含量；所述前处理包括使用萃取剂萃取待测样本，所述萃取剂包括甲醇和乙腈。 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述萃取剂为甲醇和乙腈的混合体系，按体积百分比计含有甲醇5～15％和乙腈85～95％；优选地，所述萃取剂按体积百分比计含有甲醇10％和乙腈90％；优选地，所述待测样本和萃取剂的体积比为1:3～1:5；优选为1:4。 3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述前处理还包括将萃取剂和待测样本的混合体系震荡；优选地，所述震荡为在恒温振荡器中震荡3～10min，优选为震荡5min；优选地，将震荡后的萃取剂和待测样本的混合体系离心，取上清液至新的反应容器中，再次离心后进行高效液相色谱检测；优选地，所述将震荡后的萃取剂和待测样本的混合体系离心的离心条件为0～10℃，3000～5000rmp离心5～15min；优选地，所述将震荡后的萃取剂和待测样本的混合体系离心的离心条件为4℃，4000rmp离心10min；优选地，高效液相色谱检测前离心的离心条件为0～10℃，3000～5000rmp离心3～10min；优选地，高效液相色谱检测前离心的离心条件为4℃，4000rmp离心5min；优选地，前处理步骤在96孔板中进行。 4.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测的流动相包括流动相A和流动相B；所述流动相A为水相，所述流动相A中含有磷酸二氢钾和磷酸；所述流动相B为有机相；优选地，所述流动相A中含有浓度为5～10mM的磷酸二氢钾和0.1～0.5％v/v的浓磷酸，所述浓磷酸为浓度≥85％的高效液相色谱级磷酸；优选地，所述流动相A中含有浓度为5mM的磷酸二氢钾和0.2％v/v的浓磷酸；优选地，所述流动相B为乙腈。 5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述高效液相色谱检测使用WatersXBridge C18色谱柱；优选地，所述高效液相色谱检测的洗脱程序为： 0.00min，流动相A 50％，流动相B 50％； 10.00min，流动相A 40％，流动相B 60％； 12.00min，流动相A 15％，流动相B 85％； 14.00min，流动相A 15％，流动相B 85％； 14.10min，流动相A 50％，流动相B 50％； 15.00min，流动相A 50％，流动相B 50％。 6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述血浆的来源包括小鼠、大鼠、豚鼠、仓鼠、兔、雪貂、猫、狗、山羊、绵羊、奶牛、猪、马、猴或人，优选为人体血浆。 7.根据权利要求1-6任一项所述的检测方法，其特征在于，所述标准曲线为标准曲线工作液中标准品的含量与标准品检测值的对应关系；优选地，所述标准曲线以标准曲线工作液中标准品的色谱峰面积为因变量，以标准品工作液中标准品浓度为自变量进行线性回归。 8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述标准曲线工作液中胺碘酮和去乙基胺碘酮的浓度范围分别独立的为0.05～5.00μg/mL。 9.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于，所述标准曲线工作液的基质为动物血浆；优选为牛血浆；更优选为新生牛血浆。 10.根据权利要求1-6任一项所述的检测方法，其特征在于，所述检测方法还包括检测质控品；优选地，所述质控品包括低值质控品、中值质控品和高值质控品中的至少两种；所述低值质控品中胺碘酮和去乙基胺碘酮的浓度分别为0.80μg/mL；所述中值质控品中胺碘酮和去乙基胺碘酮的浓度分别为2.50μg/mL；所述高值质控品中胺碘酮和去乙基胺碘酮的浓度分别为3.80μg/mL。