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原文传递一种CD28抗体活性检测方法

专利名称：	一种CD28抗体活性检测方法
摘要：	本发明提供了一种CD28抗体活性检测方法，具体包括：取人体T淋巴细胞制造细胞悬液；制作CD28抗体结合微粒，置于荧光抗体悬浮液内部并进行搅拌，静置，将染色后的CD28抗体结合微粒倒入到细胞悬液内部，使得CD28抗体结合微粒与细胞悬液内的T淋巴细胞相互结合；将细胞悬液缓慢倒置在细胞过滤吸附膜上，使得细胞悬液能够全面通过细胞过滤吸附膜上；将多层细胞过滤吸附膜缓慢翻转，将上面附着的CD28抗体结合微粒倾倒下来，在显微镜下进行操作并观察。本发明采用荧光染色的抗体结合微粒与T淋巴细胞相互结合，并利用细胞过滤吸附膜与抗体结合微粒之间的吸附作用，再通过显微镜进行观察结合数，即可得到CD28抗体的活性程度。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	上海;31
申请人：	上海毕合生物化学技术有限公司
发明人：	毕慧娟;王伟盛;蔡承轩
专利状态：	有效
申请日期：	2022-10-24T00:00:00+0800
发布日期：	2023-01-17T00:00:00+0800
申请号：	CN202211300257.X
公开号：	CN115616224A
分类号：	G01N33/68;G01N33/543;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68;G01N33/543
申请人地址：	200130 上海市浦东新区巴圣路160号6幢三层3008室
主权项：	1.一种CD28抗体活性检测方法，其特征在于，具体包括以下内容：步骤1、取人体T淋巴细胞，洗涤液洗涤，得样本细胞悬液，在适宜温度环境下静置；步骤2、制作CD28抗体结合微粒，并将CD28抗抗体结合微粒置于荧光抗体悬浮液内部并进行搅拌，将染色后的CD28抗体结合微粒置于适宜温度下静置一段时间，并将染色后的CD28抗体结合微粒倒入到细胞悬液内部，进行充分搅拌并孵育，使得CD28抗体结合微粒与细胞悬液内的T淋巴细胞相互结合在一起；步骤3、将上述细胞悬液缓慢倒置在细胞过滤吸附膜上，细胞悬液依次穿过多层细胞过滤吸附膜，在倾倒的时候，需要晃动多层细胞过滤吸附膜，使得细胞悬液能够全面通过细胞过滤吸附膜上；步骤4、将多层细胞过滤吸附膜缓慢翻转，将上面附着的CD28抗体结合微粒倾倒下来，在显微镜下进行操作并观察，由荧光标记的CD28抗体结合微粒来确定与T淋巴细胞的结合数量，从而判断CD28抗体活性。 2.根据权利要求1所述的一种CD28抗体活性检测方法，其特征在于：所述步骤1中的洗涤液为细胞培养用磷酸缓冲盐溶液PBS，其中含有1％的FBS，含有0.2％的EDTA。 3.根据权利要求1所述的一种CD28抗体活性检测方法，其特征在于：所述步骤2中的搅拌速度为1500r/min，搅拌时间为4分钟，随后将搅拌后的液体进行静置20分钟。 4.根据权利要求1所述的一种CD28抗体活性检测方法，其特征在于：所述步骤3中细胞过滤吸附膜共设置有三层，倒置细胞悬液的时候，需要缓慢的将细胞悬液沿细胞过滤吸附膜往复进行倾倒。 5.根据权利要求1所述的一种CD28抗体活性检测方法，其特征在于：所述步骤4中将CD28抗体结合微粒放置在载玻片上进行观察。