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原文传递一种免疫球蛋白G4检测试剂盒及其制备方法

专利名称：	一种免疫球蛋白G4检测试剂盒及其制备方法
摘要：	本发明公开了一种免疫球蛋白G4检测试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，所述R1试剂包括以下成分：第一缓冲液0.01‑0.06mol/L；电解质10‑40g/L；促融剂30‑80g/L；第一表面活性剂1‑10g/L；第一防腐剂0.8‑1.2g/L；所述R2试剂包括以下成分：抗免疫球蛋白G4单抗包被胶乳颗粒0.1‑2.0g/L；第二缓冲液0.01‑0.1mol/L；稳定剂5‑30g/L；第二防腐剂0.8‑1.2g/L；第二表面活性剂0‑4g/L；封闭剂0‑4g/L。基于同一个发明构思，本发明还公开了一种免疫球蛋白G4检测试剂盒的制备方法。本发明的制备工艺为一步法，工艺简单，而且在机开封稳定性可延长至40天，稳定性好，节约成本，线性宽。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	青岛汉唐生物科技有限公司
发明人：	杨帆;宋金玲;孙娜;田永帅;史文艳;高仁玲
专利状态：	有效
申请日期：	2023-09-12T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-21T00:00:00+0800
申请号：	CN202311174463.5
公开号：	CN117092353A
代理机构：	青岛鼎丞智佳知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	王敬花
分类号：	G01N33/68;G01N33/543;G01N33/531;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68;G01N33/543;G01N33/531
申请人地址：	266100 山东省青岛市高新技术产业开发区河东路369号
主权项：	1.一种免疫球蛋白G4检测试剂盒，其特征在于，包括R1试剂和R2试剂，所述R1试剂包括以下成分：第一缓冲液0.01-0.06mol/L；电解质10-40g/L；促融剂30-80g/L；第一表面活性剂1-10g/L；第一防腐剂0.8-1.2g/L；所述R2试剂包括以下成分：抗免疫球蛋白G4单抗包被胶乳颗粒0.1-2.0g/L；第二缓冲液0.01-0.1mol/L；稳定剂5-30g/L；第二防腐剂0.8-1.2g/L；第二表面活性剂0-4g/L；封闭剂0-4g/L。 2.根据权利要求1所述的免疫球蛋白G4检测试剂盒，其特征在于，所述第一缓冲液和第二缓冲液分别为TRIS缓冲液、硼酸-硼砂缓冲液、HEPES缓冲液、MES缓冲液、PB缓冲液中的一种或几种。 3.根据权利要求1或2所述的免疫球蛋白G4检测试剂盒，其特征在于，所述促融剂为PEG6000、PEG8000、PEG12000、PEG20000中的一种或几种。 4.根据权利要求1所述的免疫球蛋白G4检测试剂盒，其特征在于，所述第一表面活性剂和第二表面活性剂分别为T-20、曲拉通-100、S9、甘油中的一种或几种。 5.根据权利要求1所述的免疫球蛋白G4检测试剂盒，其特征在于，所述第一防腐剂和第二防腐剂分别为Proclin300、叠氮钠、硫柳汞中的一种或几种。 6.根据权利要求1所述的免疫球蛋白G4检测试剂盒，其特征在于，所述稳定剂为海藻糖、蔗糖、EDTA-2Na中的一种或几种。 7.根据权利要求1所述的免疫球蛋白G4检测试剂盒，其特征在于，所述封闭剂为BSA、酪蛋白、乙醇胺、CE510中的一种或几种。 8.根据权利要求1～7任意一项所述的免疫球蛋白G4检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)试剂R1的配制按照试剂R1的组分含量，将第一缓冲液、电解质、促融剂、第一表面活性剂、第一防腐剂依次分别溶于纯水中，搅拌均匀，调pH至6.0-7.4，室温搅拌过夜即得试剂R1； (2)试剂R2的配制取粒径为180-220nm的胶乳微球于第二缓冲液中，置于10-40℃摇床，100-300r/min，摇匀5-10min；之后加入现配的EDC和NHS溶液，置于10-40℃摇床，100-300r/min，活化胶乳10-20min；在搅拌的情况下，加入第二缓冲液和单克隆抗体，置于10-40℃摇床，100-300r/min，偶联3-4h后从摇床中取出，置于搅拌器上，加入封闭剂于10-40℃摇床孵育20min后从摇床中取出，置于搅拌器上，分别加入第二表面活性剂、稳定剂，上述物质均在加完一种物质于10-40℃摇床孵育20min后再加入另一种物质，最后加入第二防腐剂，调pH至6.0-7.4，在10-40℃摇床稳定一夜后，即得试剂R2。 9.根据权利要求8所述的免疫球蛋白G4检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述单克隆抗体为鼠抗人免疫球蛋白G4抗体。 10.根据权利要求8所述的免疫球蛋白G4检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述胶乳微球与单克隆抗体之间的质量比为(60～100)：(1～3)。