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原文传递一种甘蔗及甘蔗汁中3-硝基丙酸残留的气相色谱-串联质谱检测方法

专利名称：	一种甘蔗及甘蔗汁中3-硝基丙酸残留的气相色谱-串联质谱检测方法
摘要：	本发明公开了一种甘蔗及甘蔗汁中3‑硝基丙酸残留的气相色谱‑串联质谱检测方法。本发明采用乙酰氯‑甲醇法，乙酰氯与甲醇反应得到的盐酸‑甲醇使甘蔗及甘蔗汁中3‑硝基丙酸进行甲酯化的衍生化反应，生成3‑硝基丙酸甲酯。用甲苯提取、离心后，将上层液体加入QuEChERS萃取包，涡漩1min，10000rpm离心5min，取上层液体过0.22μm滤膜后，采用气相色谱‑串联质谱多反应监测模式下进行检测，外标法定量。本发明方法提取效率和灵敏度高、准确性和重复性好，可用于甘蔗及甘蔗汁中3‑硝基丙酸残留量的测定。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	浙江树人学院
发明人：	韩超;周秀锦;林宇;胡贝贞;陈瑶;程洁;黄超群;钱鸣蓉
专利状态：	有效
申请日期：	2023-09-04T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-14T00:00:00+0800
申请号：	CN202311138166.5
公开号：	CN117054563A
代理机构：	杭州求是专利事务所有限公司
代理人：	刘静
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
申请人地址：	312028 浙江省绍兴市柯桥区杨汛桥镇江夏路2016号
主权项：	1.一种甘蔗及甘蔗汁中3-硝基丙酸残留的气相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：步骤(1)：样品制备：将甘蔗去皮切块，用研磨仪搅碎待测；若样品为甘蔗汁则直接过滤去渣，获得甘蔗汁试样；步骤(2)：衍生化、提取和净化：称取步骤(1)中样品5.0g于离心管中，加入6mL体积分数为10％的乙酰氯甲醇和8mL甲苯溶液；然后将离心管充满氮气，旋紧螺旋盖；震荡混合后，80℃水浴放置2h，间隔20min取出振摇1次，水浴后取出冷却至室温，10000rpm离心5min，将反应后的样品上层液体转移至离心管中，加入QuEChERS萃取包进行净化，涡漩1min，10000rpm离心5min，取上层液体1mL，过0.22μm滤膜后再上GC-MS/MS进行分析；步骤(3)：基质匹配标准曲线的配制：取浓度为1.0μg/mL的3-硝基丙酸溶液20μL、40μL、80μL、160μL和320μL于装有5.0g空白样品的离心管中，按步骤(2)进行操作后上GC-MS/MS进行分析，制得标准曲线溶液4.0μg/kg、8.0μg/kg、16.0μg/kg、32.0μg/kg和64.0μg/kg。步骤(4)：待测样品溶液的检测：将步骤(2)中的提取净化后的样品溶液和步骤(3)中制备的标准曲线溶液在气相色谱-串联质谱仪上分别进样，以定量离子的峰面积为纵坐标(Y)，其质量浓度为横坐标(X，ng/mL)绘制标准曲线；基于标准曲线获得待测样品溶液中3-硝基丙酸的浓度，进而获得甘蔗及甘蔗汁中3-硝基丙酸的含量。 2.根据权利要求1所述的一种甘蔗及甘蔗汁中3-硝基丙酸残留的气相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：步骤(2)的衍生化方式中，采用乙酰氯-甲醇法，乙酰氯与甲醇反应得到的盐酸-甲醇使甘蔗及甘蔗汁中3-硝基丙酸进行甲酯化的衍生化反应，生成3-硝基丙酸甲酯；步骤(2)的净化方式中，待净化液采用QuEChERS萃取包净化除去甘蔗及甘蔗汁中样品中的色素和糖含量，避免其污染气相色谱-串联质谱仪以及干扰3-硝基丙酸的检测。 3.根据权利要求1所述的一种甘蔗及甘蔗汁中3-硝基丙酸残留的气相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：QuEChERS萃取包为PSA/GCB/C18(1.2g MgSO4，400mg PSA，400mgGCB，400mg C18)。 4.根据权利要求1所述的一种甘蔗及甘蔗汁中3-硝基丙酸残留的气相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：步骤(4)中气相色谱-串联质谱的参数条件如下：色谱条件：色谱柱：Agilent RXI-5Sil MS毛细管柱30m x 0.25mm x 0.25μm；色谱柱升温程序:50℃保持0min，以10℃/min升至150℃保持5min；载气：氦气，纯度99.999％；载气流速：1.0mL/min；进样口温度:260℃；进样量:1μL；进样方式：分流进样，分流比：10:1，吹扫流量3.0mL/min，吹扫时间1min；质谱条件：电子轰击电离源70eV，离子源温度：230C；传输线温度：280C；碰撞气：氮气；扫描类型：多反应监测模式MRM，扫描时间为5-10min；3-硝基丙酸甲酯，即3-硝基丙酸衍生化产物的定性定量离子对、碰撞能量的质谱参数见表1，表中标记为定量离子对；表1 3-硝基丙酸甲酯的GC-MS/MS分析参数定量离子。