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原文传递一种快速筛查牛奶中多类兽药残留的方法

专利名称：	一种快速筛查牛奶中多类兽药残留的方法
摘要：	本发明公开了一种快速筛查牛奶中多类兽药残留的方法。所述方法包括如下步骤：将牛奶样品和净化剂加入至QuEChERS离心管中，加入缓冲液、锆珠和乙酸酸化乙腈，然后加入萃取盐，放入QuEChERS自动样品制备仪中震荡和离心得上清液；上清液经溶剂蒸发得残留物，残留物经复溶过膜后进行LC‑Q‑Orbitrap/MS检测即得。本发明建立自动QuEChERs前处理方法，操作简便、节省时间，可减少人为操作步骤，有效提高前处理方法的平行性，通过优化缓冲液pH、提取液体积、萃取盐种类、净化填料、定容液等条件，极大地提高了前处理方法的通用性，有效降低基质干扰，减小仪器损耗；其中高分辨质谱的采集模式优选为mDIA，可进行溯源性分析，并最大程度减少共流出物的干扰，提高采集的灵敏度和选择性。
专利类型：	发明专利
申请人：	黑龙江飞鹤乳业有限公司;中国检验检疫科学研究院
发明人：	刘英涛;仝凯旋;吕肖楠;谢瑜杰;于畅游;陈辉
专利状态：	有效
申请日期：	2022-05-11T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-21T00:00:00+0800
申请号：	CN202210509589.2
公开号：	CN117092227A
代理机构：	北京纪凯知识产权代理有限公司
代理人：	王春霞
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
申请人地址：	164800 黑龙江省齐齐哈尔市克东县庆祥街;
主权项：	1.一种牛奶中兽药残留的分析方法，包括如下步骤： (1)将牛奶样品和净化剂加入至QuEChERS离心管中，加入缓冲液、锆珠和乙酸酸化乙腈，然后加入萃取盐，放入QuEChERS自动样品制备仪中进行震荡和离心得上清液； (2)所述上清液经溶剂蒸发得到残留物，所述残留物经复溶过膜后进行LC-Q-Orbitrap/MS检测，即得到牛奶中的兽药残留含量。 2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于：步骤(1)中，所述缓冲液为EDTA-Mcllvaine缓冲溶液，pH值为4；所述缓冲液的用量为：2g牛奶：6mL缓冲液。 3.根据权利要求1或2所述的分析方法，其特征在于：步骤(1)中，所述乙酸酸化乙腈中乙酸的体积含量为1％，其用量为：2g牛奶：16mL乙酸酸化乙腈。 4.根据权利要求1-3中任一项所述的分析方法，其特征在于：步骤(1)中，所述萃取盐为无水硫酸镁、氯化钠、乙酸钠、柠檬酸二氢钠和柠檬酸三钠的复合物；所述萃取盐的用量为：2g牛奶：5～7.5g萃取盐。 5.根据权利要求1-4中任一项所述的分析方法，其特征在于：步骤(1)中，所述净化剂为乙二胺-N-丙基硅烷、十八烷基硅烷键合硅胶、二氧化锆胶和增强型脂质去除剂中至少一种；优选为所述乙二胺-N-丙基硅烷与所述十八烷基硅烷键合硅胶的混合物，质量比为0～90：30～200。 6.根据权利要求1-5中任一项所述的分析方法，其特征在于：步骤(2)中，在乙腈与水的混合液中进行定容。 7.根据权利要求1-6中任一项所述的分析方法，其特征在于：步骤(2)中，所述LC-Q-Orbitrap/MS中液相色谱检测条件为：色谱柱：Agilent Eclipse plus C18(3.0×150mm，1.8μm)；流动相：流动相A为0.1％甲酸-水，流动相B为乙腈；柱箱温度：30℃；进样量：5μL；液相洗脱程序：0min：2％B，1.8min：15％B，3.5min：20％B，6min：25％B，7min：30％B，11min：35％B，13.5min：55％B，16min：85％B，20min：100％B，25.1min：2％B，28min停止，流速设定为0.5mL/min；所述LC-Q-Orbitrap/MS的质谱检测条件为：离子源：电喷雾电离源ESI；扫描方式：full MS/multiplexing data-independent acquisition(mDIA)；毛细管温度：325℃；雾化气体：氮气；雾化气气压：0.14MPa；扫描范围：100～1000m/z；隔离窗口：52m/z；分辨率：70,000,FullMS；35,000,DIA；总循环次数：12次，MSX为4。 8.根据权利要求1-7中任一项所述的分析方法，其特征在于：所述兽药残留包括二嗪磷、黄体酮、甲苄喹啉、安眠酮、地西泮、磺胺吡啶、氯苯胍、磺胺吡唑、磺胺对甲氧嘧啶、芬苯达唑、噻菌灵、磺胺二甲嘧啶、磺胺二甲异嘧啶、甲苯咪唑、磺胺甲氧哒嗪、奥苯达唑、磺胺间二甲氧嘧啶、左旋咪唑、磺胺邻二甲氧嘧啶、克伦特罗、甲硝唑、丙硫多菌灵、癸氧喹酯、甲基睾酮、吡喹酮、苯乙醇胺A、甲氧苄啶、非班太尔、三氯苯达唑、氯丙那林、氮哌酮、奥芬达唑、东莨菪碱、育亨宾、倍硫磷亚砜、甲苯噻嗪、卡拉洛尔、妥布特罗、替硝唑、盐酸赛庚啶、脱氧卡巴氧、金刚乙胺、普鲁卡因、氯丙嗪、哌唑嗪、酚妥拉明、利多卡因、氟哌啶醇、阿托品、莱克多巴胺、金刚烷胺、睾酮、喷布特罗、群勃龙、美雄酮、盐酸利托菌、磺胺异噁唑、磺胺噻唑、氨苯砜、阿苯达唑砜、磺胺甲噁唑、苯甲酰磺胺、阿苯达唑亚砜、磺胺喹噁啉、磺胺嘧啶、氧氟沙星、阿苯达唑-2-氨基砜、奥比沙星、磺胺间甲氧嘧啶、马波沙星、磺胺苯吡唑、氟甲喹、恩诺沙星、二氟沙星、醋酸甲孕酮、芬苯达唑砜、洛美沙星、地美硝唑、噁喹酸、磺胺甲基嘧啶、醋酸美伦孕酮、克百威、山莨菪碱、奥司他韦、康力龙、泰妙菌素、吡利霉素、达那唑、西诺沙星、沙丁胺醇、盐酸特拉唑嗪、呋喃它酮、福莫特罗、马布特罗、孔雀石绿、乙氧酰胺苯甲酯、硫酸特布他林、沙拉沙星、环丙沙星、异丙嗪、羟基甲硝唑、磺胺甲噻二唑、那氟沙星、诺氟沙星、萘啶酸、加替沙星、培氟沙星、氟罗沙星、磺胺氯哒嗪、异丙喘宁/奥西那林、罗红霉素、竹桃霉素、丙酸睾丸素、敌敌畏、灭蝇胺、维吉尼霉素M1、磺胺脒、异丙肾上腺素、苯丙酸诺龙、磺胺醋酰、马拉硫磷、依诺沙星、达氟沙星、倍氯米松、卡巴氧、2-喹喔啉羧酸、洛硝达唑、司帕沙星、维吉尼霉素S1、蝇毒磷、杀虫脒、莫西沙星、可的松、泰万菌素、酞磺胺噻唑、氟苯尼考、林可霉素、班布特罗、磺胺氯吡嗪、强的松、倍他米松、地塞米松、塞布特罗、氢化可的松、头孢噻呋、磺胺恶唑、磺胺、甲基强的松龙、常山酮、啶蜱脲、可乐定、硝呋烯腙、醋酸氟氢可的松、呋喃唑酮、四环素、醋酸氟孕酮、吉米沙星、19-去甲睾酮、α-玉米赤霉烯醇、氯霉素、西马特罗、多西环素、倍硫磷、氟虫腈、氟甲砜霉素胺、盐酸美他环素、尼卡巴嗪、硝碘酚腈、泰乐菌素A、玉米赤霉酮和玉米赤霉烯酮。